Алгоритм определения групп крови АВ0
При помощи цоликлонов.
Цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ предназначены для определения групп крови человека по системе АВ0, применяются взамен или параллельно с иммунными сыворотками. Цоликлоны изготавливают из асцитной жидкости мышей, в которой содержатся специфические иммуноглобулины, направленные против антигенов А и В человека.
Цоликлон анти-А – красного цвета, цоликлон анти-В – синего, анти-АВ – бесцветный. Срок хранения упаковки – 2 года при температуре 2-8˚С. Вскрытый флакон хранится в холодильнике при той же температуре в течение месяца. 
Оснащение:
· цоликлоны анти-А и анти-В
· планшет
· скарификаторы одноразовые
· лабораторные маркированные пипетки
· стеклянные палочки
· песочные часы
· спирт этиловый 70%
· стерильные шарики
· пинцет
· пробирка с исследуемой кровью
Исследуемая кровь может быть взята из пальца или из вены (предпочтительнее периферическая, капиллярная кровь из пальца) в пробирку с консервантом и без консерванта. В помещении, где проводится определение, должно быть хорошее освещение и температура 15-25˚С.
1. Произведите маркировку планшета: карандашом по стеклу (или маркером) разделите планшет на три части и надпишите анти-А, анти-В и анти-АВ. По краю планшета напишите фамилию того, чья кровь исследуется.
2. Нанесите на планшет под соответствующими надписями индивидуальными пипетками по одной большой капле цоликлонов.
3. Нанесите рядом с каплями антител по одной маленькой капле исследуемой крови. Соотношение капель цоликлонов и крови 10:1.
4. Смешайте кровь с цоликлоном индивидуальной сухой стеклянной палочкой.
5. Наблюдайте за ходом реакции визуально при легком покачивании планшета в течение 3-х минут. Обычно агглютинация наступает через 3-5 секунд.
Интерпретация результатов
Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных хлопьев, которые быстро сливаются в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются. При положительной реакции с тремя цоликлонами к каждой капле необходимо добавить по 1 капле изотонического раствора хлорида натрия, перемешать индивидуальной стеклянной палочкой и повторно внимательно оценить результат реакции.
Алгоритм определения резусной принадлежности крови в реакции прямой агглютинации на плоскости цоликлоном анти-D супер
Оснащение:
· цоликлон анти-D супер;
· исследуемая кровь;
· планшет.
Последовательность действий:
· на планшет под надписью «анти-D» наносят одну каплю реагента цоликлона (0,1 мл) и 1 маленькую каплю исследуемой крови (0,02-0,03 мл);
· содержимое смешивают стеклянной палочкой, после чего планшет осторожно покачивают в руках;
· агглютинация наступает в течение 1 мин, но покачивания продолжают не менее 3 мин.
· Оценка результата:
- агглютинация указывает на резус- положительную реакцию,
- отсутствие агглютинации на резус- отрицательную реакцию.
Знаком плюс (+) обозначено наличие агглютинации, знаком минус (-) - отсутствие агглютинации.
