Материалы и методыВ исследование были включены 29 первичных больных РШМ, находившихся на Г—ГУ стадиях заболевания (по FГGO) и проходивших лечение в Ульяновском областном клиническом диспансере. Материалом для исследования служили послеоперационные образцы опухолевой ткани, плазма и эритроциты. Диагноз у всех больных был подтвержден морфологически. В качестве группы госпитального контроля (с целью получения для исследования ткани внешненормальной шейки матки) к обследованию были привлечены 20 пациенток, подвергнувшихся в том же отделении операции по поводу миомы матки (группа сравнения). Образцом при исследовании плазмы и эритроцитов служила донорская кровь. В 1-ю группу (п = 10) вошли пациентки с начальными стадиями РШМ (Га1, Га2 по FГGO), во 2-ю (п = 12) — с ограниченным опухолевым процессом (ГЬ—ГГа стадии) и в 3-ю (п = 11) — с распространенным процессом (ПЬ—ГУ). Интенсивность ПОЛ в гомогенатах, плазме и эритроцитах оценивали по уровню малонового диальдегида (МДА) в тесте с тиобарбитуровой кислотой [8]. Ферментативный компонент АО-системы (АОС) оценивали по уровням активности каталазы, глутатион-редуктазы (ГР), глутатион-трансферазы (ГТ) [9] и супероксиддисмутазы (СОД) [10] и пересчитывали на 1 мг белка для ткани. Белок определяли по Брэдфорду [11].
Статистический анализ был проведен с использованием программы Statistica 6.0 с помощью непараметрического критерия Манна—Уитни.
Результаты
В ходе проведенных исследований на всех стадиях заболевания было установлено значимое увеличение уровня МДА в опухолевой ткани по сравнению с таковым в ткани внешне не измененной шейки матки.
При изучении ферментативного звена АО-защиты в опухолевой ткани при РШМ была отмечена зависимость уровня активности от стадии заболевания. Так, активность СОД, значимо повышенная по отношению к группе сравнения, у пациенток с начальными стадиями РШМ (3,21 ± 1,301 у.е./мг белка против 0,71 ± 0,169 у.е./мг белка в контроле) снижается на стадии с ограниченным опухолевым процессом (ГЬ—ГГа) и продолжает снижаться на стадии с распространенным (ГГЬ—ГУ) процессом (1,91 ± 0,082 и 1,52 ± 0,329 у.е./мг белка соответственно). Данные представлены на рис. 2. Сходная динамика активности имела место и для ка-
контроль 1-я 2-я 3-я
Группы обследования
0,14 - - - -3,5
0,12 - т - » * -3,0
/ \л
0,10 - / \ Ч - -2,5 "
0,08 - (\ Ж -2,0 |
0,06 - - 1,5 ^
<и
0,04 - 1,0 *
0,02 -0,5
0 1 1 -0
контроль 1-я 2-я 3-я
Группы обследования
Каталаза —СОД
Рис. 2. Активность каталазы и СОД в опухолевой ткани больных РШМ на разных клинических стадиях заболевания
талазы опухолевой ткани. Незначительно повышенная на начальной стадии заболевания (0,13 ± 0,043 ммоль/ мин/мг белка против 0,12 ± 0,012 ммоль/мин/мг белка в контроле) активность каталазы последовательно и значительно снижалась на последующих стадиях заболевания (0,09 ± 0,018 и 0,07 ± 0,016 ммоль/мин/мг белка соответственно), см. рис. 2.
В то же время динамика ГР и ГТ — ферментов глу-татионовой группы эндогенных АО — несколько иная. Нами было зарегистрировано существенное и значимое возрастание активности этих ферментов при прогрессировании РШМ (рис. 3).
Таким образом, при снижении активности СОД и каталазы имело место увеличение активности глута-тионзависимых ферментов ГР и ГТ. На снижение ка-талазной активности опухолевой ткани при РШМ указывают также и другие авторы [8]. Существует мнение, что подобная динамика ферментативного звена АОС в злокачественных клетках свидетельствует о ведущей роли ГР и ГТ в инактивации пероксидов [7].
Кроме того, снижение активности СОД и каталазы может быть связано со снижением генерации Н 2О2,
0^--------------1-------------1-------------1------------1
контроль 1-я 2-я 3-я
Группы обследования
Рис. 3. Уровни ГР и ГТ в ткани опухоли РШМ в динамике заболевания
Таблица 1. Система ПОЛ — АО в плазме больных РШМна разных клинических стадиях
Показатель Группа
контроль (и = 10) 1-я (и = 10) II я - 3-я (и = 11)
МДА, мкмоль/л 7,995 ± 0,544 5,403 ± 0,734 (р = 0,019) 4,228 ± 0,461 (р = 0,001) 3,672 ± 0,406 (р = 0,001)
ГР, мкмоль/мин/л 0,018 ± 0,008 0,082 ± 0,014 (р = 0,001) 0,023 ± 0,004 (р = 0,062; р1 = 0,002) 0,025 ± 0,004 (р = 0,059; р1 = 0,002)
ГТ, мкмоль/мин/л 0,031 ± 0,008 0,051 ± 0,010 (р = 0,042) 0,059 ± 0,013 (р = 0,038) 0,045 ± 0,005 (р = 0,082; р1 = 0,066)
Каталаза, ммоль/мин/л 0,231 ± 0,046 0,127 ± 0,053 (р = 0,005) 0,043 ± 0,012 (р = 0,002; р1 = 0,006) 0,026 ± 0,005 (р = 0,002; р1 = 0,056)
Примечание. Здесь и в табл. 2:р — относительно соответствующего показателя в группе контроля;р1 — относительно соответствующего показателя на предыдущей стадии.
Таблица 2. Система ПОЛ — АО в эритроцитах больных РШМ на разных клинических стадиях
Показатель Группа
контроль (и = 10) 1-я (и = 10) II я - <4 3-я (и = 11)
МДА, мкмоль/л 305,43 ± 10,36 417,62 ± 42,23 (р = 0,032) 485,6 ± 32,15 (р = 0,016) 437,57 ± 30,99 (р = 0,010)
ГР, мкмоль/мин/л 0,073 ± 0,006 0,057 ± 0,006 (р = 0,063) 0,076 ± 0,010 (р = 0,141) 0,086 ± 0,008 (р2 = 0,012)
ГТ, мкмоль/мин/л 0,204 ± 0,025 0,311 ± 0,034 (р = 0,025) 0,377 ± 0,034 (р = 0,009) 0,321 ± 0,027 (р = 0,012)
Каталаза, ммоль/мин/л 41,83 ± 2,80 10,70 ± 5,49 (р = 0,005) 14,56 ± 2,16 (р = 0,020) 27,75 ± 4,62 (р = 0,032)
СОД, у.е./л 0,827 ± 0,193 0,703 ± 0,142 (р = 0,168) 0,773 ± 0,096 (р = 0,160) 0,769 ± 0,147 (р = 0,095)
Примечание. р2 — относительно соответствующего показателя на предыдущей стадии.
ингибирующей размножение клеток, в динамике прогрессии РШМ. Повышенное содержание ГТ и ГР при одновременном снижении активности каталазы и СОД приводит к усилению диспропорции образования 02- и Н2О2.
При изучении параметров системы ПОЛ — АО в плазме больных РШМ выявлено, что уровень МДА, существенно сниженный по сравнению с таковым в группе контроля уже на начальной стадии заболевания, при прогрессировании опухоли продолжает уменьшаться (табл. 1). В группе с ограниченным опухолевым процессом концентрация МДА составляет 2,59 ± 0,316, во 2-й — 2,81 ± 0,241, в 3-й — 2,09 ± 0,163 мкмоль/л против 7,994 ± 0,543 мкмоль/л в группе контроля. Данные об активности каталазы и ГР в плазме крови у больных РШМ представлены в табл. 1. Стадия 1а характеризуется
достоверным повышением активности ГР относительно таковой в группе контроля, на стадиях 1Ь—11аЬ наблюдается значительное падение активности ГР как относительно предыдущей стадии, так и по отношению к контрольным значениям. На стадиях с распространенным опухолевым процессом (3-я группа) активность фермента близка к показаниям, полученным в группе контроля. Активность данного фермента в эритроцитах больных РШМ меняется в зависимости от стадии, при этом зафиксировано достоверное его падение. Активность каталазы в плазме и эритроцитах подчиняется той же динамике (табл. 1, 2). СОД также снижается, причем особенно на стадии 1а (см. табл. 2).
В эритроцитах больных РШМ уровень МДА был выше показателей в группе контроля на всех стадиях опухолевого процесса.
Выводы. Таким образом, опухолевая трансформация сопровождается изменениями внутриклеточного метаболизма, в том числе образованием и утилизацией АФК. Снижение активности СОД — фермента, катализирующего в митохондриях реакцию дисмутации 02- с образованием Н2О2, а также повышение активности глутатионзави-симых ферментов, ГТ и ГР, участвующих в разложении
перекисей, может свидетельствовать о том, что количество супероксидного анион-радикала, усиливающего пролиферацию, возрастает, а количество Н2О2, ингибирующей клеточную пролиферацию, значительно снижено. Полученные результаты позволяют предположить возникновение на фоне оксидативного стресса в динамике опухолевой прогрессии РШМ популяции клеток со сниженным содержанием Н2О2.
Литература; https://elibrary.ru/item.asp?id=16365679 1. Бебнева T.H., Прилепская B.K. Папилломавирусная инфекции рак шейки матки. Практ гинекол 2001; 3(3):77-82.
2. Parkin D.M., Bray F., Ferlay J., Pisani P. Global cancer statistics, 2002. CA Cancer J Clin 2005;55(2):74—108.
3. Писарева Л.Ф., Бояркова A.^, Коюкова E.B., Коюкова T.B. Особенности заболеваемости раком шейки матки населения Читинской области. Сиб онкол журн 2010; 6(42):42-7.
4. Чиссов B.^, Старинский B.B., Петрова EB. Злокачественные новообразования в России в 2002 г. (заболеваемость и смертность). М., 2004.
КиберЛенинка: https://cyberleninka.ru/article/n/sravnitelnaya-harakteristika-oksidativnogo-stressa-pri-rake-sheyki-matki-na-raznyh-klinicheskih-stadiyah-zabolevaniya