РНК-содержащий препарат RN-13 состоит из оптимального и стабильного сочетания 0,2 % растворов органических экстрактов Dyckerhoff с 0,5 % раствором Na-РНК дрожжей с добавлением аланинового буфера и натрия хлорида до изотонической концентрации. Активные ингредиенты по природе являются очищенной натриевой солью рибонуклеиновых кислот (РНК-Na). Одна ампула (5 мл) содержит 6,3 мг натриевой соли рибонуклеиновой кислоты телёнка и дрожжей.
Субстанция RN-13, помимо РНК дрожжей, содержит рибонуклеиновые кислоты крупного рогатого скота из следующих органов: сосудистая стенка, кора головного мозга, сердце, гипофиз, гипоталамус, печень, селезенка, кора надпочечников, почки, яичники, плацента, семенники, таламус.
Комплекс RN-13 предназначен для защиты кожи, нейрогормональной регуляции, иммуномодуляции, регенерации клеток. Его назначение в реабилитации больных раком следующее: для повышения жизненного потенциала, оказания общего активирующего эффекта, повышения иммунитета, активации любой терапии, эффективно восстанавливает функции внутренних органов и иммунной системы после использования химио- и радиотерапии".
Цель работы. Исследование острой токсичности РНК-содержащего препарата RN-13.
Материалы и методы. Острую токсичность изучали на двух видах животных: крысах, мышах при внутрижелудочном пути введения. Опыты проводили на нелинейных беспородных белых крысах массой тела: самцы 305-330 г, самки 245-255 г; на нелинейных беспородных белых мышах массой тела: самцы и самки 20-24 г. В каждой экспериментальной группе насчитывалось по 5 самок и 5 самцов (крысы и мыши). RN- 13 вводили в максимально допустимых объемах: крысам в дозе 10,0 мл/кг, мышам - 20,0 мл/кг(Рис. 2).
Рис.2 Внутрижелудочное введение препарата мышам
Оценку токсического воздействия исследуемого препарата на организм экспериментальных животных проводили по клинической картине интоксикации и выживаемости животных. При внутрижелудочном введении препарата регистрировали в динамике массу тела у крыс – на 0, 3, 7 и 14 сутки, у мышей – на 0, 7 и 14 сутки. Биохимические показатели сыворотки крови, характеризующие функциональное состояние печени крыс: содержание общего белка, альбумина и показатель тимоловой пробы определяли до начала опыта и на 14 сутки.
Наблюдение за животными проводили в течение 14-ти суток. На 14-й день крыс и мышей подвергали эвтаназии путем передозировки углекислым газом, вскрывали по F. Rое, оценивали макроскопическое состояние внутренних органов и систем, определяли абсолютную и относительную массу внутренних органов (Таблица 3).
Результаты и их обсуждение
Внутрижелудочное введение крысам препарата RN-13 в дозе 10 мл/кг вызвало следующую картину клинической интоксикации: через 1- 2 минуты после введения препарата дыхание у животных учащенное, они сидят неподвижно, нахохлившись. Спустя 3-5 минут дыхание стабилизуется. Спустя 1,5- 2 часа после введения препарата крысы активно умываются, пьют воду и принимают пищу.
Подобные симптомы картины клинической интоксикации отмечались при введении исследуемого препарата мышам в дозе 20,0 мл/кг. Спустя 1 час состояние животных удовлетворительное, охотно поедали корм и пили воду.
Последующее наблюдение за животными не выявило изменений в общем состоянии опытных животных: состояние шерстного покрова, слизистых глаз, поведение животных, потребление пищи и воды не имело отличий от интактных животных.
Влияние препарата RN-13 на массу животных представлено в таблицах 1, 2.
Таблица 1
Изменение массы тела мышей при однократном введении препарата RN- 13 в дозе 20,0 мл/кг
Периоды наблюдения, сутки | Масса мышей, г | |||
До введения препарата | После введения препарата | |||
Самцы | Самки | Самцы | Самки | |
22,00 | 18,62 | 22,27 | 18,72 | |
21,95 | 19,07 | 22,36 | 19,26 | |
24,95 | 21,34 | 24,53 | 21,55 |
Таблица 2
Изменение массы тела крыс при однократном внутрижелудочном введении препарата RN- 13 в дозе 10,0 мл/кг
Периоды наблюдения, сутки | Масса крыс, г | |||
До введения препарата | После введения препарата | |||
Самцы | Самки | Самцы | Самки | |
274,00 | 259,00 | 277,00 | 263,00 | |
276,00 | 267,00 | 282,00 | 271,00 | |
284,00 | 265,00 | 287,00 | 269,00 | |
291,00 | 273,00 | 297,00 | 278,00 |
Введение препарата крысам в дозе 10,0 мл/кг, мышам в дозе 20,0 мл/кг не оказало существенного влияния на массу тела животных. Из данных наблюдений следует, что в течение периода наблюдения животные прибавили в массе по сравнению с исходными данными.
Таблица 3
Коэффициенты массы внутренних органов животных после однократного внутрижелудочного воздействия
Показатели | До введения препарата | После введения препарата | ||
Самцы | Самки | Самцы | Самки | |
Мыши, доза 20,0 мл/кг | ||||
Сердце | 0,457 | 0,406 | 0,48 | 0,43 |
Легкие | 0,87 | 0,828 | 0,92 | 0,88 |
Печень | 6,04 | 5,16 | 6,52 | 5,54 |
Селезенка | 0,71 | 0,63 | 0,82 | 0,72 |
Почка: левая | 0,715 | 0,655 | 0,74 | 0,67 |
Почка: правая | 0,703 | 0,665 | 0,72 | 0,68 |
Яичко: левое | 0,343 | - | 0,36 | - |
Яичко: правое | 0,308 | - | 0,32 | - |
Тимус | 0,158 | 0,149 | 0,17 | 0,16 |
Крысы, доза 10 мл/кг | ||||
Сердце | 0,328 | 0,335 | 0,34 | 0,35 |
Легкие | 0,676 | 0,695 | 0,71 | 0,71 |
Печень | 2,82 | 3,2 | 2,93 | 3,24 |
Селезенка | 0,35 | 0,3 | 0,41 | 0,31 |
Почка: левая | 0,312 | 0,3 | 0,32 | 0,31 |
Почка: правая | 0,372 | 0,298 | 0,38 | 0,31 |
Яичко: левое | 0,364 | - | 0,40 | - |
Яичко: правое | 0,292 | - | 0,30 | - |
Тимус | 0,079 | 0,068 | 0,083 | 0,075 |
Содержание общего белка, концентрации альбумина и показатель тимоловой пробы в сыворотке крови крыс практически не изменяются по сравнению с исходными данными (таблица 4).
Таблица 4
Биохимические показатели сыворотки крови крыс при однократном внутрижелудочном введении препарата RN-13 в дозе 10,0 мл/кг
Показатели | Исходные данные | На 14 сутки | ||
Самцы | Самки | Самцы | Самки | |
Общий белок, г/л | 87,96 | 87,72 | 79,97 | 85,67 |
Альбумин, г/л | 38,57 | 39,74 | 35,35 | 36,12 |
Тимоловая проба, ед. | 0,55 | 0,41 | 0,30 | 0,30 |
Макроскопическое исследование трупов животных не выявило изменений в их внешнем виде: состояние кожных и шерстных покровов обычное. При вскрытии внутренние органы в торакальной и абдоминальной полостях были обычными по цвету, консистенции, анатомо-топографическим параметрам. Относительная масса внутренних органов крыс и мышей, которым вводили исследуемый препарат, не выходила за пределы физиологической нормы.
Результаты проведенных исследований показали, что РНК-содержащий препарат RN-13, при внутрижелудочном пути введения крысам и мышам, относится к малоопасным веществам (IV класс опасности)[6]. LD50 (среднесмертельная концентрация – доза препарата, при которой погибает 50% животных) не определена из-за низкой токсичности изучаемого объекта.