Распространение риккетсий

Методические указания для студентов к практическому занятию № 41.

Тема занятия: Микробиологическая диагностика риккетсиозов.

Цель: Изучение методов лабораторной диагностики риккетсиозов.

Модуль 2. Специальная, клиническая и экологическая микробиология.

Содержательный модуль 10. Патогенные прокариоты и эукариоты.

Тема 41: Микробиологическая диагностика риккетсиозов.

Актуальность темы: Заболевания, вызываемые риккетсиями, называются риккетсиозами, они распространены во всех странах мира. До недавнего времени семейство риккетсий включало роды Rickettsia, Orienta, Erlichia, Coxiella. По современной класификации семейство Rickettsiaceae включает два рода: Rickettsia, Orienta. Род Coxiella исключен из семейства Rickettsiaceae и отнесен к порядку Legionellales.

Распространение риккетсий

Сохранилось клинико-эпидемиологическое деление риккетсий по связи с переносчиком. Выделена группа болезней передающихся вшами и блохами (сыпной и крысиный тиф), клещами (группа клещевых лихорадок, эрлихиозы, ориенции).

Эпидемический сыпной тиф - острая инфекционная болезнь, вызывается Rickettsia prowazekii, которая имеет форму кокков и палочковидных клеток, окрашивается по способу Здродовского.

Риккетсии Провацека - внутриклеточные паразиты. Их культивируют в желточном мешке куриного эмбриона, в культуре клеток, в кишечнике платяных вшей.

Риккетсии Провацека содержат два антигена. Один из них поверхностный, термостабильный растворимый, не является видоспецифичным. Второй антиген – термолабильный, видоспецифичен. Риккетсии Провацека образуют токсин, тесно связанный с телом клетки. Есть предположения, что он является белком т.к. термолабилен. К R. prowazekii восприимчивы морские свинки, белые мыши.

Источником инфекции при эпидемическом сыпном тифе является только больной человек, а передается заболевание через платяную и головную вошь. Последние, насосавшись крови больного сыпным тифом, становятся заразными через 5-6 дней. Зараженная вошь с фекалиями выделяет большое количество риккетсий, которые через поврежденную при расчесах кожу попадают в кровь. Риккетсии адсорбируются на поверхности эпителия сосудов, проникают внутрь клеток и размножаются в цитоплазме. Затем клетки разрушаются, риккетсии попадают в ток крови и поражают новые клетки. Инкубационный период при сыпном тифе равен 12-14 дней.

Риккетсии обнаруживаются в организме больного в течение всего лихорадочного периода. Болезнь характеризуется высокой температурой, интоксикацией, поражением нервной и сердечно-сосудистой системы, на коже появляется розеолезно-петехиальная сыпь.

Материалом для исследования является кровь. Используют серологические реакции: РСК, РА Вейгля с риккетсиями Провацека, РНГА (реакция непрямой гемагглютинации) для обнаружения антител.

После перенесенного заболевания формируется стойкий длительный антимикробный и антитоксический иммунитет. Во время острой риккетсиозной инфекции характерно образование IgM а в период реконвалесценции обнаруживаются в основном IgG.

У части переболевших сыпным тифом допускается длительное носительство риккетсий с возможным последующим рецидивом и возникновением повторного сыпного тифа или болезни Брилля. При болезни Брилля в крови больного определяются Ig G,что помогает дифференцировать эпидемический сыпной тиф от болезни Брилля. С этой целью сыворотки предварительно обрабатывают 2 меркаптоэтанолом, который разрушает дисульфидные связи Ig M.

Для профилактики сыпного тифа применяют живую комбинированную сыпно-тифозную вакцину ЖКСВ – Е из штамма Е, химическая сыпнотифозная вакцина из антигенов клеточной стенки риккетсий.

Лечение проводится антибиотиками тетрациклинового ряда, левомицетином.

Наряду с эпидемическим сыпным тифом встречается эндемический сыпной тиф, возбудителем которого является Rikettsia typhi. По своим биологическим свойствам она во многом сходна с риккетсиями Провацека.

Эндемический сыпной тиф распространен среди диких грызунов – крыс, мышей. Крысиные блохи нападают на человека и заражают его. Человек заражается при втирании в кожу фекалий блох, путем употребления пищевых продуктов, загрязненных мочой грызунов.

Патогенез эндемического сыпного тифа сходен с патогенезом эпидемического сыпного тифа. Лабораторная диагностика имеет большое значение для дифференциации с эпидемическим сыпным тифом и болезнью Брилля. Используются серологические реакции (РСК, РАР) со специфическими антигенами. В затруднительных случаях прибегают к заражению самцов морских свинок, у которых возбудитель эндемического сыпного тифа наряду с лихорадкой вызывает развитие периорхита (скротальный феномен). Возбудитель эпидемического сыпного тифа вызывает только лихорадку, без возникновения орхита.

Конкретные цели:

1. Ознакомиться с биологическими особенностями и классификацией риккетсий.

2. Изучить методы лабораторной диагностики эпидемического и эндемического сыпного тифа.

3. Знать классификацию риккетсиозов.

4. Изучить биологические препараты для диагностики и профилактики эпидемического сыпного тифа.

5. Уметь трактовать результаты лабораторных исследований, которые проводятся для диагностики сыпных тифов – эпидемического и эндемического.

Уметь:

1. Микроскопировать готовые микропрепараты и находить в них риккетсии.

2. Знать, какой материал для исследований брать от больных риккетсиозом.

3. Ставить серологические реакции для диагностики сыпного тифа.

4. Трактовать результаты серологических исследований.

Теоретические вопросы:

1. Таксономия R.prowazekii.

2. Классификация риккетсиозов.

3. Морфология и методы окраски R.prowazekii.

4. Источник инфекции и пути передачи возбудителя сыпного тифа. Механизм передачи инфекций.

5. Патогенез. Материал для исследования.

6. Методы лабораторной диагностики эпидемического сыпного тифа.

7. Болезнь Брилля-Цинссера. Дифференциация ее от эпидемического сыпного тифа.

8. Иммунитет при сыпном эпидемическом тифе. Специфическая профилактика.

9. Источник инфекции, пути передачи эндемического сыпного тифа.

10. Дифференциация эпидемического и эндемического сыпного тифа.

Практические задания, которые выполняются на занятии:

1. Микроскопия микропрепаратов из материала, содержащего риккетсии, окрашенных по Здродовскому и Романовскому-Гимзе.

2. Учет готовой реакции агглютинации Вейгля. Трактовка результатов исследования.

3. Изучение диагностикумов для диагностики и вакцин для профилактики риккетсиозов.

4. Изучение метода культивирования риккетсий в кишечнике вши по фотографии.

5. Изучение схемы лабораторной диагностики эпидемического сыпного тифа.

6. Оформление протокола.

Литература:

1. Коротяев А.И., Бабичев С.А., Медицинская микробиология, иммунология и ви-усология /Учебник для медицинских ВУЗов, Ст-Пб.: «Специальная литература», 1998.- 592с.

2. Пяткин К.Д. Кривошеин Ю.С. Микробиология с вирусологией и иммунологией.- Киев: Вища школа, 1992.- 431с.

3. Медицинская микробиология /Под редакцией В.И. Покровского.- М.:ГЕОТАР-МЕД, 2001.- 768с.

4. Руководство к практическим занятиям по микробиологии, иммунологии и вирусологии. /Под ред. М.П. Зыкова.- М. «Медицина». 1977.– 288с.

5. Конспект лекции.

Дополнительная литература:

1. Тiтов М.В. Iнфекцiйнi хвороби.- К., 1995.– 321с.

2. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебник /Под редакцией А.А. Воробьева.- М.: Медицинское информационное агенство, 2004.- 691с.

Короткие методические указания к работе на практическом занятии:

В начале занятия проводится проверка уровня полготовки студентов к занятию.

Самостоятельная работа состоит из изучения методов лабораторной диагностики эпидемического сыпного тифа. Ставится акцент на основном методе диагностики – серологическом.

Далее студенты микроскопируют готовые микропрепараты из риккетсий, окрашенные по Здродовскому, по фотографиям изучают методы культивирования риккетсий в кишечнике вши.

Студенты получают готовые демонстрационные штативы с реакцией Вейгля, проводят ее учет, трактуют результаты и делают выводы.

Потом студенты изучают биологические препараты: диагностикумы для серологических реакций, вакцины для профилактики эпидемического сыпного тифа.

В конце занятия проводится тестовый контроль и анализ результатов самостоятельной работы каждого студента.