Антицентромерные антитела

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

СОЭ используют для наблюдения за активностью заболевания при ревматоидном артрите, гигантоклеточ-ном артериите, ревматической полимиалгии и некоторых других васкулитах.

СОЭ измеряется по высоте (в миллиметрах) столбика, образовавшегося при осаждении эритроцитов в специальной трубке (Westergren или Wmtrobe) за 1 ч.

СОЭ — это непрямой показатель изменений в содержании белков "острой фазы" и концентрации иммуноглобулинов. Белки "острой фазы" представляют собой гетерогенную группу белков (фибриноген, ингибиторы протеаз и пр.), которые

синтезируются в печени в ответ на воспаление. Цитокин воспаления, интерлейкин-6, является наиболее сильным медиатором, стимулирующим выработку в печени белков острой фазы. Любые состояния, сопровождающиеся повышением концентрации белков острой фазы или гипергаммаглобулинемией (поли- или моноклональной), вызывают увеличение СОЭ за счет повышения диэлектрической константы плазмы. В результате происходит уменьшение межэритроцитарных сил отталкивания, что способствует агрегации эритроцитов и ускоряет их оседание. Увеличение СОЭ, не связанное с воспалением, может наблюдаться у пациентов пожилого возраста, женщин и при беременности.

СОЭ определяют по методам Westergren и Wintrobe. Метод Westergren более предпочтителен: используется 200-миллиметровая трубка; предусмотрен этап разведения, что устраняет влияние анемии.

Метод Wintrobe: используется 100-миллиметровая трубка; отсутствует этап разведения. Поскольку в методе Westergren используется более длинная трубка, только он позволяет определить СОЭ 50-60 мм/ч.

Значительно повышенная СОЭ (100 мм/ч) бывает при:

Бактериальная инфекция (35 %)

Болезни соединительной ткани: гигантоклеточный артериит, ревматическая полимиалгия, СКВ, прочие васкулиты (25 %)

Опухоли: лимфомы, миеломная болезнь, прочие (15 %)

Другие причины (22 %)

Причина неизвестна (3 %)

Значительно пониженная СОЭ (0 мм/ч)

Афибриногенемия(дисфибриногенемия)

Агаммаглобулинемия

Крайняя степень полицитемии (гематокритное число 65 %)

Повышенная вязкость плазмы

С-реактивный белок

СРБ — это белок, состоящий из пяти идентичных, нековалентно связанных друг с другом субъединиц, расположенных в одной плоскости по принципу кольцевой симметрии. Его функция заключается в связывании с элементами клеточной стенки, Clq-фракцией комплемента и рецепторами на нейтрофилах и моноцитах, что способствует запуску и поддержанию воспалительного ответа. Синтез СРВ как белка "острой фазы" происходит в печени под влиянием интерлейкина-6 и других цитокинов. Повышение его концентрации отмечается в течение первых 4 ч от момента тканевого повреждения и достигает максимума через 24-72 ч. Концентрация СРВ определяется методами ELISA, радиоиммунодиффузии или нефелометрии. В норме этот показатель обычно < 0,08 мг/дл. Концентрация 8-10 мг/дл свидетельствует о бактериальной инфекции или о системном васкулите.

Оба теста - СОЭ и СРБ - служат для определения концентрации компонентов "острой фазы" и позволяют количественно оценить генерализованный воспалительный процесс. Величина СОЭ зависит от многих факторов и, следовательно, ее специфичность низка. Тем не менее определение СОЭ — это недорогостоящая и легко выполнимая процедура. Концентрация СРБ отражает содержание конкретного белка "острой фазы", что более специфично. Его концентрация возрастает и снижается быстрее (снижается на 50 % за 24 ч), чем СОЭ, для которой характерны длительно сохраняющиеся высокие показатели (снижается на 50 % за 1 нед) после затухания воспаления. Основным недостатком метода измерения СРБ является его высокая себестоимость по сравнению с таковой для СОЭ.

Антинуклеарные антитела

Исследование на AHA должно выполняться тогда, когда возникает подозрение, что у пациента аутоиммунное заболевание. Исследование на AHA, как правило, не используется в качестве скринингового теста и не входит в комплекс исследований в диагностически неясных случаях.

Основным из используемых в настоящее время методов определения АНА является флюоресцентная микроскопия. Клетки, ставшие после соответствующей обработки проницаемыми, фиксируются к предметному стеклу и инкубируются с сывороткой крови больного, что позволяет AHA связаться с клеточными ядрами. После промывания добавляются вторые антитела, способные к флюоресценции. Они связываются с антителами больного (которые, в свою очередь, связаны с ядрами). Свечение ядер клеток выявляется с помощью флюоресцентного микроскопа. Концентрация AHA в сыворотке крови больного определяется путем разведения последней перед ее добавлением к фиксированным клеткам — чем больше степень разведения (титр), при которой еще отмечается свечение ядер, тем выше концентрация AHA в сыворотке больного.

В качестве субстрата для исследования AHA в большинстве лабораторий используются НЕр-2 клетки (клон пролиферирующих клеток, происходящий из клеточной линии эпителиальной опухоли человека) вместо клеток замороженных срезов внутренних органов грызунов (мышиные печень или почки), поскольку быстро растущие и делящиеся НЕр-2-клетки содержат больший ассортимент ядерных антигенов (таких как SS-A и антигены центромера) в более высокой концентрации. В последнее время были разработаны иммуноферментные методы (ELISA) определения AHA. Они различаются в зависимости от производителя и иногда не позволяют определить некоторые из AHA, выявляемых иммунофлюоресцентным методом. Однако простота выполнения методов ELISA привела к постепенному вытеснению методов флюоресцентного определения AHA.

Предел, за которым тест на AHA становится положительным, был произвольно установлен как уровень антинуклеарных антител, превышающий таковой для 95 % популяции здоровых лиц. В каждой лаборатории определяются свои показатели положительного теста, и они могут сильно различаться по абсолютной величине. В большинстве учреждений граница нормы и патологии соответствует титру 1 /40-1/80 В лабораториях, использующих в качестве субстрата для выявления AHA НЕр-2-клетки, клинически значимый титр обычно 1: 160.

Положительный тест на AHA еще не является достаточным основанием для постановки нозологического диагноза. В то же самое время низкий титр AHA не позволяет с полной уверенностью исключить аутоиммунное заболевание. Тест на AHA должен использоваться в основном как исследование, подтверждающее обоснованность подозрения врача на наличие СКВ или другого аутоиммунного заболевания.

Результат теста на AHA положительным у здоровых лиц. Тест на AHA считается положительным, когда уровень (титр) AHA превышает таковой для 95 % здоровых лиц Таким образом, до 5 % здоровых людей могут оказаться "АНА-позитивными". У них титр обычно < 1: 320, а характер свечения ядра чаще всего крапчатый или гомогенный. Встречаемость таких AHA выше у женщин и лиц пожилого возраста.

У очень немногих больных (1-2 %) с активной нелеченой СКВ тест на AHA дает отрицательный результат. У таких пациентов обычно имеются антитела к ядерному антигену SS-A, а отрицательный результат теста на AHA объясняется отсутствием достаточного количества антигена SS-A в материале, используемом при флюоресцентном методе исследования, что не позволяет выявить наличие соответствующих антител. Кроме того, увеличивается число "АНА-негативных" больных СКВ (10-15 %) в процессе лечения по мере снижения активности заболевания. У пациентов с СКВ и нефропатией и почечной недостаточностью и получающих диализную терапию тест на AHA также нередко оказывается отрицательным (40-50 %).

ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ ТЕСТА НА AHA (%)

При лекарственной волчанке (волчаночноподобныйо синдром, связанный с приемом лекарственных веществ, тест на AHA может оставаться положительным в течение месяцев или даже лет после отмены препарата. АНА под влиянием лекарств может быть и без проявлений лекарственной волчанки.

Антицентромерные антитела

Антицентромерные антитела выявляются у 60-90 % больных с ограниченной формой склеродермии (CREST-синдром), а антитела к SCL-70 (к топоизомеразе I) обнаруживаются у 20-33 % пациентов с диффузной формой системной склеродермии.