Министерство сельского хозяйства и продовольствия Республики Беларусь
Витебский орден «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины
Главное управление ветеринарии Минсельхозпрода Республики Беларусь
Курсовая работа
Тема:
ДИАГНОСТИКА ДЕРМАТОФИТОЗОВ ЖИВОТНЫХ
ВИТЕБСК - 2011
Общие положения
Дерматофитозы (трихофития, микроспория) - инфекционные болезни животных и человека, характеризующейся поражением кожи и ее производных.
Возбудители - микроскопические грибы, относящиеся к группе несовершенных грибов отдела Denteromycota (Fungi imperfecti), порядку гифомицеты (Hyphomycetales) и родам Trichophyton и Microsporum. Возбудители дерматофитозов животных, регистрируемые в республике Беларусь представлены в таблице 1. Дерматофитозы (трихофития и микроспория) регистрируются повсеместно на территории республики, наносят значительный экономический ущерб животноводству и представляет большую опасность для человека.
Таблица 1. Видовой состав дерматофитов выявленных у сельскохозяйственных животных Республики Беларусь
| Вид животного | Вид возбудителя |
| Крупный рогатый скот | Tr.verrucosum,Tr.mentagrophytes |
| Лошади | Tr. equinum,Tr. mentagrophytes, M.canis, M. Equinum |
| Овцы | T. verrucosum var. Autotrophcum |
| Свиньи | Tr.mentagrophytes, M.canis, M.gyp- seum, M. Nanum |
| Собаки и кошки | M. canis |
| Пушные звери и кролики | Tr. mentagrophytes, M. сanis |
| Куры и индейки | Tr. gallinae |
Диагноз на дерматофитозы ставят на основании характерных клинических признаков, эпизоотологических данных и результатов лабораторных исследований, включающих световую микроскопию и люминесцентное исследование патологического материала, выделение культуры гриба, и его идентификацию.
Отбор патологического материала
Материал для исследования у больных и подозрительных по заболеванию животных берут в виде глубокого соскоба из периферических частей свежих пораженных участков кожи, не подвергавшихся лечебным обработкам
Корочки с остатками волос, волосы, чешуйки отбирают пинцетом из пораженных участков (по возможности менее загрязненных) и помещают в чистые бумажные пакеты. Использовать для этой цели пробирки нецелесообразно, поскольку в них создается повышенная влажность, способствующая развитию плесневых грибов и бактерий.
На образцы отобранного патматериала направляемого в ветеринарную лабораторию для микологического исследования оформляют сопроводительную записку с указанием вида, возраста, клинических признаков болезни, место локализации пораженных участков кожи, даты взятия патматериала, а также район, область и хозяйство.
Методы лабораторной диагностики
дерматофитоз животное болезнь микроскопия
Микроскопия в люминесцентном микроскопе
Для люминесцентного анализа патологического материала используют ртутно-кварцевые лампы ПРК-2,ПРК-4, Л-80,ЛД-130 и другие люминесцентные аппараты, оснащенные фильтром Вуда.
Материал отбирают от больных дерматофитозом животных, не подвергавшихся лечению, и помещают в чашки Петри, облучают ртутно-кварцевой лампой и просматривают в затемненном помещении Патологический материал просматривают на расстоянии 20-25 см от светофильтра. Волосы, кожные чешуйки, инфицированные возбудителем микроспории, дают характерное изумрудно-зеленое свечение. Свечение может отсутствовать у животных черной масти, а также при инфицировании животных штаммами не продуцирующими пигмент птиридин. Поэтому при отрицательных результатах люминесцентной диагностики необходимо провести микроскопическое и культуральное исследования. При поражении трихофитоном пораженные волосы не имеют такого свечения. С помощью переносной ртутно-кварцевой установки можно исследовать в затемненном помещении животных подозрительных в заболевании.
Микроскопия в световом микроскопе
Для микроскопического исследования патматериал помещают в стерильную чашку Петри, которую ставят на темный фон (черную бумагу).
С помощью препаровальной иглы и глазного скальпеля отбирают и отрезают утолщенные корневые части волос, покрытые белым налетом и кожные чешуйки. Длина отрезков волос, подготовленных к микроскопии, должна составлять 1-2 мм. Затем несколько отрезков волос и чешуек (8-10) помещают на предметное стекло в каплю 20% NaOH или KOH, слегка подогревают над пламенем горелки до появления белого ореола вокруг капли, после чего добавляют 1 каплю теплого 50% водного стерильного раствора глицерина и покрывают покровным стеклом. Предметные и покровные стекла должны быть чистыми и сухими. Чтобы не сломать покровное стекло его берут одной рукой за два ребра, а затем большим и указательным пальцем другой руки осторожно протирают марлей или салфеткой с обеих сторон. Исследуемый материал помещают в капле жидкости на предметном стекле, расправляют препаровальной иглой. Покровное стекло подводят ребром к капле жидкости и плавно опускают на объект. Из-под стекла жидкость вытесняет воздух, предотвращая образование воздушных пузырьков. Если капля жидкости выступает за пределы покровного стекла, ее избыток убирают фильтровальной бумагой, а если жидкости мало, то ее дополнительно вносят пипеткой у ребра покровного стекла, откуда она всасывается в силу капиллярности. Вначале микроскопируют с объективом x 10, затем x 40.
При микроскопии пораженных волос от животных, больных дерматофитозами устанавливают, что возбудителям трихофитии присуще наличие округлых спор (артроспор) гриба образующих вокруг волоса чехол. Они могут располагаться как на поверхности, так и внутри волоса. В чешуйках, на ранних стадиях встречается ветвящийся мицелий. Споры грибов T. verrucosum, T. verrucosum var. autotrophicum, T. equinum более крупные (2,5-7 до 12 мкм), чем споры дерматофита T. mentagrophytes (2-4 мкм). Для возбудителей микроспории характерно то, что артроспоры (1,5 - 3,5 мкм) беспорядочно располагаются у основания волоса, а иногда образуют чехлы на его поверхности. Споры резко преломляют свет и плотно прилегают друг к другу. Искривление мицелия и распад его на споры обуславливают характерное для микроспории мозаичное расположение спор. В редких случаях мозаичность расположения спор выражена несколько слабее. Кроме того в чешуйках встречается ветвящийся мицелий.
Обнаружение грибных элементов в патологическом материале (артроспоры, мицеальные нити) дает возможность поставить предварительный диагноз на трихофитию или микроспорию. Для идентификации и определения вида возбудителя необходимо выделить грибы в чистой культуре.