В систему крови входят костный мозг, селезенка, лимфатические узлы, кровь и лимфа. Из болезней крови наиболее часто встречаются анемии, лейкоз, лимфогранулематоз, геморрагический диатез. Форменные элементы крови поражают возбудители ряда инвазионных болезней, а органы кроветворения — вирусы, радиоактивное излучение, химические вещества.
При исследовании системы крови собирают анамнез, проводят осмотр и наблюдение за животным, термометрию, исследуют слизистые оболочки, лимфатические узлы, кожу по общепринятым методам, исследуют селезенку; проводят общий анализ крови, мочи, по показаниям — пунктата костного мозга.
При сборе анамнеза обращают внимание на возможный дефицит в рационе белка, железа, кобальта, меди, витамина В12, то есть веществ, принимающих непосредственное участие в кроветворении. Собирают данные о инвазионных болезнях, язвенной болезни желудка. Осмотром выявляют бледность слизистых оболочек, которая характерна для анемии, кровоизлияния (геморрагический диатез). При пальпации лимфоузлов обнаруживают их увеличение при лейкозах, лимфомах (лимфогранулематоз, лимфосаркома). При лейкозах и лимфомах увеличенные лимфатические узлы болезненные, не нагнаиваются, не образуют свищей в отличие от поражений другой этиологии (туберкулез).
Исследование селезенки. Селезенка принимает участие в кроветворении (лейкопоэз), разрушении эритроцитов и иммунных реакциях организма. Она расположена в левом межреберье. Селезенка доступна для клинического исследования у лошадей и при ее увеличении — у плотоядных. У лошадей она непосредственно прилегает к левой реберной стенке позади задней границы перкуссионного поля легкого. У плотоядных увеличенную селезенку можно обнаружить путем пальпации через брюшную стенку, положив животное на правый бок. Левой ладонью придавливают правую брюшную стенку, правой рукой при этом прощупывают подреберную область и находят селезенку. Увеличение селезенки отмечают при лейкозах, лимфомах, кровопаразитарных болезнях (пироплазмоз, анаплазмоз), циррозе и амилоидозе печени, гемолитической анемии, при ряде острых и хронических инфекционных болезней.
Взятие образцов крови. Небольшое количество крови для общего ее анализа берут из сосудов внутренней или наружной поверхности ушной раковины. У собак, кошек, пушных зверей кровь берут из латеральной подкожной вены предплечья или голени, лапки (пальца), кончика хвоста; у кур — из гребня или сережки, из вен внутренней поверхности крыла; у уток и гусей — из ступни конечности или из большой плюсневой вены. Когда для анализа необходимо большое количество цельной крови, плазмы или сыворотки, то кровь у крупного рогатого скота, лошадей, овец, коз, верблюдов берут из яремной вены; у свиней — из орбитального венозного синуса; у плотоядных — из вен конечностей; у птиц — из вен внутренней поверхности крыла. При взятии крови соблюдают правила асептики и антисептики. Предварительно место укола выстригают и протирают спиртом. У моногастричных животных кровь берут до кормления в утренние часы, а у жвачных — утром, через 4 ч после кормления.
В чистые сухие пробирки для получения цельной крови и плазмы предварительно вносят одно из противосвертывающих средств (антикоагулянт). В расчете на 10 мл крови берут следующее количество антикоагулянта: 2...3 капли 1%-го раствора гепарина или 3...4 капли 10%-го раствора трилона - Б, 15...20 мг натрия цитрата или такое же количество натрия щавелевокислого и др. Передозировать эти средства нельзя, так как высокая их концентрация вызывает в крови различные изменения вплоть до гемолиза. Если кровь берут из сосудов сразу в меланжер (смеситель) или в капилляр от гемометра Сали, то антикоагулянт не используют.
Кровь в пробирки наливают по стенке во избежание гемолиза. При отправке в лабораторию не допускают замораживания и сильного охлаждения крови, так как это приводит к гемолизу. В лаборатории кровь в пробирке для сыворотки обводят тонкой спицей из нержавеющей стали и ставят в термостат при 37...38 °С на 1...2 ч или оставляют при комнатной температуре для окончательного отделения сыворотки. Отделившуюся сыворотку сливают в центрифужные пробирки и центрифугируют 15 мин при частоте вращения 3000 мин. Для получения плазмы кровь с антикоагулянтом центрифугируют в таком же режиме. Плазма крови в отличие от сыворотки содержит фибриноген. Для лабораторных исследований пригодны сыворотка или плазма без гемолиза крови. Цельную кровь, плазму и сыворотку хранят в холодильнике.
Общий клинический анализ крови. Включает подсчет эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, микроскопию мазка с дифференцированием клеток, определение содержания гемоглобина, гема-токрита, СОЭ, времени свертывания крови. Анализы выполняют известными (рутинными) методами или используют автоанализаторы.
Родоначальной клеткой для всех форменных элементов крови является стволовая клетка, которая дает начало общей клетке — предшественнице миелопоэза и общей клетке — предшественнице лимфопоэза. Из клетки — предшественницы миелопоэза в костном мозге, проходя определенные стадии и образуются эритроциты, тромбоциты, моноциты и зернистые лейкоциты. Из клетки — предшественницы лимфопоэза в костном мозге и лимфоидной системе образуются лимфоциты: Т-лимфоциты — клетки, обеспечивающие реакции клеточного иммунитета, и В-лимфоциты — клетки, обеспечивающие реакции гуморального иммунитета.
В крови здоровых животных находятся зрелые клетки: эритроциты, тромбоциты, лейкоциты (базофилы, эозинофилы, палочкоядерные и сегментоядерные нейтрофилы, лимфоциты, моноциты) и тучные клетки. Появление в крови незрелых промежуточных клеток миелопоэза (ретикулоцитов, нормоцитов, эритробластов, миелобластов, миелоцитов) и лимфопоэза (плазмобластов, пролимфоцитов, лимфобластов) свидетельствует о развитии патологии кроветворения. Исследование крови начинают с подсчета эритроцитов и лейкоцитов.
Эритроциты — мелкие клетки крови, содержащие гемоглобин, благодаря чему способны переносить кислород из легких к тканям, а углекислый газ — в обратном направлении — из тканей к легким. Зрелые эритроциты млекопитающих — безъядерные клетки в форме двояковогнутого диска. Эритроциты птиц и низших позвоночных — ядерные клетки эллипсоидной формы.
В нефиксированном (нативном) препарате эритроциты выглядят как желтоватые округлые образования, а в фиксированных и окрашенных мазках — как круглые клетки розового или серовато-розового цвета с просветлением в центре.
Уменьшение количества эритроцитов в крови — эритроцитопения возможна при длительном недокорме животных, постгемаррагической, гемолитической, железодефицитной и гипопластической анемиях, лейкозах, злокачественных новообразованиях. Эритроцитопения также сопровождает инфекционные и инвазионные болезни, гепатиты и гепатозы, хронические нефриты.
Увеличение содержания эритроцитов в крови (эритроцитоз) встречается при сильной диарее вследствие сгущения крови, при обильном потоотделении, непроходимости тонкого отдела кишечника, сильной мышечной перегрузке. Нахождение животных на высоте 1400...2000 м и выше над уровнем моря сопровождается повышением количества эритроцитов в крови.
При исследовании эритроцитов обращают внимание на изменение их размера — анизоцитоз (микроциты, макроциты, мегалоциты), формы — пойкилоцитоз (овалоцитоз, микросфероцитоз, серповидность), на интенсивность окрашивания (нормохромные, гипохромные, гиперхромные, полихроматофильные) и наличие включений в эритроцитах (тельца Жолли, кольца Кэбота, базо-фильная пунктация, ядерные формы).
Тромбоциты — кровяные пластинки — мелкие безъядерные клетки крови диаметром 4...5мкм, участвующие в свертывании крови, их количество (тыс./мкл): у КРС 260...700; лошадей 200...500; собак 250...550; кошек 100...500. В окрашенных мазках крови они выглядят как мелкие круглые или овальные образования. При снижении их концентрации возникает кровоточивость, развивается гемофилия.
Лейкоциты — разнообразные по морфологическим признакам и функциям клетки сосудистой системы крови. Они выполняют функции защиты организма путем фагоцитарной активности и участия в формировании гуморального иммунитета, в восстановительном процессе при тканевом повреждении. Лейкоциты, в цитоплазме которых содержится специфическая зернистость, называются зернистыми или гранулоцитами. К ним относятся нейтрофилы (палочкоядерные, сегментоядерные и юные), эозинофилы и базофилы. Незернистые лейкоциты (агранулоциты) характеризуются отсутствием специфической зернистости в цитоплазме и несегментированными ядрами. К ним относятся два вида — лимфоциты и моноциты.
Увеличение количества лейкоцитов (лейкоцитоз) бывает патологическим и физиологическим. Патологический лейкоцитоз отмечается при гнойно-воспалительных процессах, сопровождающих пневмонию, бронхопневмонию, плеврит, перикардит, ретикулоперитонит, перитонит, абсцессы печени, эндометрит и многие другие болезни. Выраженный лейкоцитоз наблюдается при инфекционных болезнях, хирургической инфекции, лейкозах, лимфогранулематозе. Он возникает при отравлениях мышьяком, ртутью, укусах ядовитых насекомых и змей. Увеличение количества лейкоцитов может быть в результате введения больших доз камфары, калия йодистого, белковых препаратов, вакцин, сывороток.
Физиологический умеренный лейкоцитоз бывает при беременности, после физических нагрузок, приема богатой белком пищи (у плотоядных), стрессах.
Уменьшение количества лейкоцитов (лейкоцитопения) является результатом угнетения кроветворных органов, истощения, пониженной реактивности организма. Смена лейкоцитоза лейкоцитопенией при воспалительных и гнойно-септических заболеваниях служит показателем понижения резистентности организма, угнетения кроветворения, ухудшения состояния больного животного. Лейкоцитопения может быть следствием длительного введения в организм больших доз сульфаниламидов, амидопирина, левомицетина, синтомицина, препаратов ртути, мышьяка, висмута. Она отмечается при алейкемической форме лейкоза, отравлениях некоторыми ядами, вирусных болезнях и др.
При оценке результатов исследования учитывают не только общее число лейкоцитов в крови, но и процентное, а также абсолютное содержание отдельных видов лейкоцитов (лейкоформула), наличие или отсутствие незрелых клеток. Увеличение или уменьшение тех или иных клеток лейкоцитов, появление молодых форм, дегенеративные изменения в клетках свидетельствуют о развитии патологического процесса в организме.
Базофилы — клетки диаметром 8...14мкм, в цитоплазме которых имеются крупные базофильные гранулы, содержащие гепарин. Ядро базофилов крупное, сегментированное, окрашивается в фиолетово-розовый цвет. Они принимают участие в иммунологических реакциях аллергического типа и процессах свертывания крови. В крови присутствуют в небольшом количестве. Увеличение их содержания наблюдается при хроническом лейкозе и гипофункции щитовидной железы. Уменьшение числа базофилов учесть трудно из-за малого содержания их в крови.
Эозинофилы — клетки крови диаметром 8...20мкм, отличаются обильной крупной розовой зернистостью, заполняющей всю цитоплазму. Они обладают некоторой фагоцитарной и двигательной активностью, участвуют в аллергических реакциях.
Эозинофилия — увеличение содержания эозинофилов — наблюдается при паразитарных заболеваниях (трихинеллез, опис-торхоз, аскаридоз, эхинококкоз и др.), ревматизме, при хроническом миелолейкозе, лимфогранулематозе и других злокачественных новообразованиях, ожоговой болезни, обморожении. Увеличение содержания эозинофилов при воспалительных и гнойно-септических процессах на фоне лимфоцитоза и незначительного ядерного сдвига нейтрофилов является предвестником благоприятного исхода заболевания.
Эозинопения — уменьшение содержания эозинофилов — отмечается при сепсисе, тяжелых формах интоксикации, в агональном состоянии.
Нейтрофилы (палочкоядерные и сегментоядерные) — лейкоцитарные клетки, обладающие выраженной защитной функцией, связанной с фагоцитарной и двигательной их активностью, способностью вырабатывать бактерицидные (лизоцим) и антитоксические вещества. Диаметр зрелых нейтрофилов 7.. 15 мкм. Их отличительный признак — мелкая зернистость в цитоплазме. Ядро у молодых клеток несегментировано и напоминает изогнутую S-образной формы палочку (палочкоядерные нейтрофилы). В процессе созревания клеток ядро как бы перекручивается, образуя сегменты, соединенные тонкими нитями хроматина (сегментоядерные нейтрофилы). В окрашенных мазках крови цитоплазма нейтрофилов розово-серого цвета. Мелкая зернистость в цитоплазме нейтрофилов у собак и кошек окрашивается в розово-фиолетовый цвет, у лошадей и жвачных она воспринимает кислые и основные красители.
Нейтрофилез — увеличение содержания нейтрофилов (палочкоядерных, сегментоядерных) происходит при воспалительных процессах (пневмония, перитонит, пиелонефрит, септицемия, плеврит), интоксикациях. Выраженный нейтрофильный лейкоцитоз с обнаружением молодых форм нейтрофилов вплоть до промиелоцитов и миелобластов (сдвигядра влево) наблюдается при острых бактериальных пневмониях,тяжелых инфекциях, остром гемолизе. Появление в крови незрелых нейтрофилов (миелоцитов, промиелоцитов, миелобластов) отмечается при лейкозе и злокачественных поражениях.
Нейтропения — снижение содержания в крови нейтрофилов является признаком падения сопротивляемости организма инфекциям, воздействию ионизирующего излучения, цитостатических препаратов. Нейтропения обычно сопровождается лейкопенией.
Лимфоциты — клетки крови диаметром от 4,5 до 18 мкм с округлым или овальным ядром, цитоплазмой, окрашенной в светло-синий или голубой цвет с видимым перинуклеарным просветлением (характерный признак). Различают малые, средние и большие лимфоциты. По своим иммунологическим функциям выделяют Т-лимфоциты и В-лимфоциты.
Лимфоцитоз — увеличение содержания лимфоцитов — характерный признак хронического лимфолейкоза. Незначительный лимфоцитоз бывает при пневмонии, роже, остеомиелите, сепсисе, он указывает на фазу выздоровления.
Лимфоцитопения — уменьшение содержания лимфоцитов встречается при некоторых тяжелых инфекциях, воспалительных и гнойно-септических заболеваниях и в прогностическом отношении является неблагоприятным симптомом.
Моноциты — самые крупные клетки нормальной крови (диаметр 10...20 мкм) с круглым ядром бобовидной или подковообразной формы. В патологических случаях ядро может быть сегментировано. Структура ядра нежная, сетчатая, в окрашенных мазках бледно-фиолетового цвета. Цитоплазма может содержать мелкую зернистость, вакуоли, зерна пигмента. Моноциты фагоцитируют микробные тела, клеточные остатки, различные токсические продукты.
Моноцитоз — увеличение содержания моноцитов встречается при острых инфекционных заболеваниях, а также при туберкулезе, бруцеллезе, злокачественных опухолях, сепсисе.
Моноцитопения — уменьшение количества моноцитов наблюдается при тяжелых септических процессах, некоторых инфекционных болезнях.
Для подсчета форменных элементов крови и дифференцирования лейкоцитов используют счетные камеры или автоматические счетчики.
Гемоглобин — дыхательный пигмент крови состоит из белка глобина и — гема. Глобин по своему строению близок к альбумину, синтезируется в печени. Гем представляет комплекс с двухвалентным железом. Основная функция гемоглобина — перенос кислорода из легких к тканям организма. Гемоглобин участвует в транспорте углекислого газа из тканей в легкие, в поддержании кислотно-основного равновесия в организме, то есть обладает буферными свойствами. Гемоглобин способен соединяться с оксидом углерода, образуя карбоксигемоглобин, с оксидами азота с образованием метгемоглобина, но при этом теряет способность присоединять и переносить кислород из легких к тканям.
Понижение гемоглобина отмечается при дефицитных анемиях вследствие недостатка железа, меди, кобальта, витамина В12, фолиевой кислоты, белков, при хронических интоксикациях, гепатитах, гепатозах, расстройствах желудочно-кишечного тракта, инфекционных и инвазионных болезнях и других заболеваниях.
Гематокрит — соотношение объема плазмы и форменных элементов крови, выраженное в процентах по объему. Увеличение гематокритной величины отмечается при анемиях, кровопотерях, а уменьшение — при сгущении крови.
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Эритроциты крови несут отрицательный заряд, поэтому они отталкиваются друг от друга и не склеиваются. Если кровь с антикоагулянтом набрать в вертикально стоящий сосуд, эритроциты начинают оседать под влиянием силы тяжести. Ускорению оседания эритроцитов способствуют глобулины, фибриноген, мукополисахариды, содержание которых увеличивается при многих воспалительных процессах, инфекциях, злокачественных опухолях, нефрите.
Для определения СОЭ пользуются микрометодом Панченкова. При вертикальном положении пипетки Панченкова СОЭ у взрослых животных следующее, мм/ч: КРС— 0,5..1,5, лошади— 40...70, собаки — 2...6.
Замедление СОЭ отмечается при диарее (тяжелой форме диспепсии молодняка), обильном потении, полиурии, механической и паренхиматозной желтухах, непроходимостях кишечника. Повышение СОЭ наблюдается при большинстве воспалительных процессов, инфекциях, злокачественных опухолях, коллагенозах, нефрозах, анемиях.
Цветовой показатель — среднее содержание гемоглобина в одном эритроците. Он характеризует степень насыщения эритроцитов гемоглобином по сравнению с нормой. Цветовой показатель вычисляют путем деления концентрации гемоглобина в 1 мкл крови, на число эритроцитов в том же объеме крови.
В норме цветовой показатель равен единице или близок к ней. Снижение его до 0,8 и ниже (гипохромия) свидетельствует о слабом насыщении эритроцитов гемоглобином, что отмечается при железодефицитной анемии.
Увеличение цветового показателя выше единицы (гиперхромия) отмечается при В12- и фолиеводефицитных, гипопластических анемиях. При острых кровотечениях, хронических лейкозах, некоторых гемолитических анемиях отмечается нормохромная анемия, при которой цветовой показатель близок к единице.