Плотные гранулы однородные сферические электронно-плотные везикулы, ~ 200 нм в диаметре и окружена единичной мембраной. Существование subpopula-ных плотных гранул, хранящих конкретных РАГ исследовали двойной или тройной маркировки со специфическими антителами. Все плотные гранулы выставлены несколько маркировки, показывающая локализацию различной ГРА в пределах одних и тех же гранул (Сибли и др., 1995; Фергюсон и др, 1999a;. Labruyere и др., 1999). Количество варьирует между DGs различных Infec-гами этапов. Наибольшее количество (~ 15) наблюдалось в тахизоитах и спорозоитах, с промежуточными номерами (8-10) в bradyzoites и несколько (3-6) в мерозоитах. Это может коррелировать с числом ГРА выражается и типа PV, образованной (смотри ниже).
Есть еще несколько нерешенных вопросов, касающихся как формирование плотных гранул и сортировки ГРА белков в этих органеллах. В частности, является ли плотные гранулы функционально-союзница аналогична конститутивными по сравнению с регулируемыми секреторными везикулами не полностью установлен. В других эукариотических клетках, сортировка белков с конститутивной по сравнению с регулируемым секреторных путей происходит в транс-Гольджи сеть (TGN). Белки, предназначенные для регулируемого агрегата секреции и упакованы в незрелых секреторных гранул (ISGs). Клатриновых везикула бутон из этого ISGs и перерабатывать белки обратно в TGN или эндосых, что приводит к дальнейшей концентрации секреторных белков. Специфические белки оболочки, которые были определен в TGN, включают как адаптер белка, AP1 и Ap3, и адаптер-родственные белки, GGAs (для обзора см АРВАНЫи Замок,
В токсоплазмозе, никогда не наблюдались незрелые плотные гранулы. Кроме того, переходная и стабильная экспрессия несколько растворимых белков репортера в Toxoplasma показала, что любой растворимый белок, при условии, что имеет сигнальный пептид, доставляются в плотные гранулы, а затем секретируются в PV. В противоположность этому, добавление якорь GPI-сигнала предназначается тот же белок-репортер к плазматической мембране
| ГРАНУЛЫПЛОТНЫХ |
через транспортные везикулы (Карстен и др., 1998). С другой стороны, белок TgSAG1, для которых домен якоря GPI-сигнала был удален направляются в PV с помощью плотных гранул (Striepen и др., 1998). Таким образом, плотные гранулы образуют путь составившее-tutive по умолчанию для растворимых белков в токсоплазмы.
Тем не менее, морфологический, плотные гранулы resem-BLE плотных ядра гранул, участвующие в регулируемой секреции в клетках млекопитающих, что указует на reten-ции и конденсацию секреторных продуктов могут произойти во время формирования плотных гранул. Превалируют-ную модель сортировки по удержанию в высших органных измах является селективное агрегирование регулируется, но не конститутивный, секреторные белки, что ограничивает способность бывшего уйти от созревания GRAN-üles в процессе конститутивного везикулы многообещающий (Arvan и замок, 1998). Это Condensa-ции может быть связан с неотъемлемым свойством Regu-ведено секреторными белков к агрегации с помощью тонких изменений в формовочной грануле, в то время как торговля через различные отсеки секреторного пути.
Большинство белков ГРА не являются по своей природе растворимыми, и предсказал, как тип 1 трансмембранных белков. Действительно, они становятся Мембранными associ-ованным после их секреции в PV (Lecordier и др., 1999). В плотных гранулах, то ГРА, по существу, находятся как оба растворимых и aggre-закрытые формы (Labruyere и др, 1999; Lecordier. И др., 1999). Механизм, с помощью которого эти белки остаются исключенными из endomembranous системы паразита неизвестна.
Есть сигналы, которые опосредуют GRA нацеливания и / или агрегацию в плотные гранулы? Поскольку плотные гранулы никогда не сообщались, составившими-Tute кислого отделения, белок конденсация вряд ли приведут с существенным снижением рНа. AP-1 ортолог был локализован в трансе-наиболее цистерны аппарата Гольджи (Нго и др., 2003) и, несмотря на то, что YXXφмотивы были локализованы в цитоплазматических хвостов двух белков ГРА (GRA4 и GRA7), они не были RECOG-зовал по Toxoplasma AP-I (Нго и др., 2003). Если поставка ГРА плотных гранул зависит от особенностей их трансмембранного
Домен (ТВД) (Карстен и др., 2004) или на белок-белковых взаимодействий еще не полностью продемонстрирована (Гендрин, Braun и Cesbron-Delauw, unpub-ликовано). Принимая во внимание, что GRA1, самый распространенный продукт плотных гранул, представляет собой кальций-связывающий белок (Cesbron-Delauw и др., 1989), роль Са2+ в регулировании агрегации остается возможность.