В последние годы отмечается клиническое многообразие трихофитии у собак, наличие атипичных и стертых клинических форм, что, в свою очередь, затрудняет своевременную диагностику. Атипичные формы заболевания необходимо дифференцировать с простым лишаем у собак, розовым лишаем Жибера, псориазом, микробной и себорейной экземой, атопическим дерматитом, гидраденитом, хронической пиодермией, вульгарным сикозом [20].
Поверхностная, инфильтративная и нагноительная формы трихофитии представляют собой последовательные стадии развития патологического процесса. Клиническая картина поверхностной трихофитии достаточно характерна. У собак появляются один или несколько очагов розового цвета, округло-овальной формы, с четкими границами, шелушением; по периферии очагов могут располагаться фолликулярные узелки. При инфильтративной форме очаги поражения резко очерчены, кожа гиперемирована, отечна, инфильтрирована и несколько возвышается над общим уровнем, могут встречаться единичные пустулы, корочки гнойно-геморрагического характера.
При развитии процесса на коже часто поражаются пушковые волосы, что приводит к развитию остиофолликулитов; при поражении головы или области бороды и усов волосы обламываются. Нагноительная форма трихофитии у собак чаще развивается на волосистой части головы либо в зоне роста бороды и усов вследствие дальнейшего прогрессирования микотического процесса.
Гиперемия кожи в области очага поражения усиливается, появляются множественные фолликулиты, сливающиеся в массивный инфильтрат, значительно выступающий над поверхностью кожи и болезненный при пальпации. Как правило, при нагноительной форме трихофитии наблюдается увеличение регионарных лимфатических узлов, повышение температуры тела, нарушение общего состояния животного. При инфильтративно-нагноительной форме трихофитии волосы в очагах поражения очень легко эпилируются. Зачастую при развитии рубцовых изменений кожи волосы полностью не восстанавливаются [14].
Клинический диагноз трихофитии у собак должен быть подтвержден данными лабораторных исследований. В обычной клинической практике при трихофитии ограничиваются микроскопическим и культуральным методами исследования зараженного материала. Перед микроскопией пораженные объекты (кожные чешуйки, волосы, покрышки пузырьков) предварительно обрабатывают 10%-ным раствором едкого калия или 25%-м раствором натрия гидроксида для просветления препарата. Поэтому часто этот метод диагностики называют КОН-тестом. Микроскопическая идентификация микромицетов напрямую в клиническом образце является быстрым диагностическим методом, однако наличие ложноотрицательных результатов более чем в 15% случаев указывает на недостаточную специфичность и чувствительность метода. Данным методом можно выявить наличие дерматомицетов, но идентификация их не представляется возможной. Также этот тест ограничивает субъективная оценка врача-лаборанта. Так, чувствительность прямой микроскопии при грибковом поражении головы животного, по данным ряда авторов, варьирует от 67 до 91% [31].
С целью повышения специфичности и чувствительности разработан ряд методик, позволяющих просто и быстро идентифицировать различные виды микромицетов. В микологических лабораториях просветление препаратов для микроскопического исследования проводят 15-30%-ным раствором КОН, в который добавляют 5-10%-ный раствор темно-синих чернил фирмы «Паркер» (Parkers Superchrome Blue-Black Ink). При этом методе гифы и споры дерматомицетов окрашиваются в голубой цвет [25].
В последнее время разработан и внедрен в практику новый метод микроскопии нативных препаратов с окраской калькофлюором белым. Этот реагент в качестве отбеливающего средства используется в текстильной и бумажной промышленности. Совместное применение калькофлюора белого с КОН позволяет выявлять как молодые, так и зрелые гифы дерматомицетов. Применение метода окраски калькофлюором белым при микроскопической диагностике дерматомикозов позволяет на 10% увеличить выявляемость грибковой инфекции по сравнению со стандартным КОН-методом. Краска флуоресцирует в ультрафиолетовом свете (при коротковолновом облучении). Визуализация проводится под флуоресцентным микроскопом [40].
Для окрашивания гистологических срезов волос широко применяют метод PAS (периодическая кислотная реакция) окрашивания. Последний мало отличается от процедуры окрашивания тканевых срезов и сопровождается окраской определенных гликанов (полисахаридов), находящихся в клеточной стенке дерматомицетов. С целью выявления наиболее информативного метода диагностики J. Weinberg и соавт. сравнили четыре диагностических теста, а именно: микроскопический, культуральный, метод люминесцентной микроскопии с белым калькофлюором и биопсии ногтя. Авторы установили чувствительность микроскопии в 80%, культурального метода в 59% и биопсии ногтя - в 92% по сравнению с люминесцентной микроскопией с белым калькофлюором, который был выбран в качестве основного метода. Преимуществом всех вышеперечисленных методик микроскопии является их быстрая и простая техника проведения, однако они не дают возможность идентифицировать вид микромицетов [12].
Для установления видовой принадлежности возбудителя проводится посев материала на питательную среду Сабуро с последующей идентификацией выделенной культуры. Известен способ выделения дерматомицетов на плотной среде Сабуро с селективными добавками в виде пенициллина (20000 ЕД) или стрептомицина (40000 ЕД), гентамицина (0,005 г/л), левомицетина (0,16 г/л). Недостатком данной культуральной среды является медленный рост выделяемых культур, что обуславливает длительные сроки диагностики. С целью сокращения сроков роста культур рядом авторов предложены различные модификации состава среды Сабуро. Описан способ культивирования дерматофитов в жидкой среде, содержащей кератин [28].
З.Р. Хисматуллиной и соавт. был разработан способ идентификации дерматомицетов с использованием культуральной среды Сабуро с гидролизатом кератина, позволяющий сократить сроки выделения грибов из материала больного животного. Увеличение скорости роста культур микромицетов происходит при содержании в питательной среде гидролизата кератина выше 20 г/л. Высев дерматофитов предлагаемым способом позволяет проводить идентификацию для Tr. mentagrophytes var. gypseum на 4-5-й день, для Tr. verrucosum - на 7-8-й день [33].
Одной из попыток усовершенствовать и обеспечить массовую культуральную диагностику дерматомицетов является разработка тестовой среды для дерматофитов (DTM, delmatophyte test medium), содержащей агар Сабуро с антибиотиками, циклогексимидом и индикатором роста культуры дерматофитов. Внедрение среды DTM произвело на свет концепцию «офисного культивирования», при котором появилась возможность наблюдать рост в одноразовых чашках не в специальной лаборатории, а непосредственно в кабинете врача-ветеринара, поскольку рост культуры идет при комнатной температуре [34].
Даже при соблюдении всех правил сбора материала, при наличии оборудования и высоком профессионализме сотрудников лаборатории число выявляемых положительных результатов культурального исследования весьма невелико. Культуральный метод - это специфический диагностический тест, который требует до 8 недель времени, прежде чем результат будет получен. Однако при этом, по данным зарубежной литературы, доля положительного культурального исследования едва достигает 50%, в отечественных исследованиях возбудитель не удается выделить и в 64% случаев. Это обусловлено техническими погрешностями (нарушение правил забора материала, его транспортировки и т.д.), но чаще всего - проведением предшествующей (как правило, местной) антифунгальной терапии у собак их владельцами. Владельцы собак часто занимаются их самолечением с применением наружных антимикотических средств, что приводит не только к изменению клинической картины, но и, естественно, к появлению ложноотрицательных результатов исследования при дерматофитиях [30].
Некоторыми авторами неоднократно предлагались разные диагностические подходы, которые позволили бы усовершенствовать идентификацию грибковой инфекции, дополнить или заменить классические методы. Поэтому, помимо рутинных микроскопического и культурального методов, активно изучаются новые возможности, такие как определение антигена Tr. verrucosum var. verrucosum методом иммуноферментного анализа, а также прямая ДНК-диагностика дерматомицетов. Молекулярно-биологические методики, такие как РСИ-RFLP, ПЦР реального времени и мультиплексный ПЦР, были адаптированы для определения дерматомицетов в клинических образцах. Эти молекулярные методы имеют хороший потенциал для прямого определения дерматомицетов, вместе с тем они еще нуждаются в стандартизации для обычных клинических лабораторий [1].
В 2004 году в России были разработаны и успешно применены в клинических условиях первые генетические зонды для прямой диагностики дерматофитии кожи, волос и ногтей. Данный проект был инициирован в 2003 году Национальной академией микологии с целью изучения возможности применения полимеразной цепной реакции (ПЦР) в выявлении Trichophyton rubrum в клинических образцах. Затем был создан аналогичный метод для Trichophyton mentagrophytes [15].
Лишь несколько авторов сравнивали в клинических образцах КОН-микроскопию и культивирование с ПЦР-методом. В исследовании Nagao и соавт. определили Trichophyton rubrum посредством «вложенной» ПЦР, имеющей мишенью ген внутреннего транскрибируемого спейсера 1 (ВТС1), который был негативен как по данным КОН-микроскопии, так и по данным культивирования. Yan и соавт. сравнили случайно праймируемую ПЦР с общепринятыми методами показали, что случайно праймируемая ПЦР - это более быстрый, чувствительный и специфичный метод для диагностики дерматофитий. Подобных исследований в отношении возбудителей трихофитии у собак не проводилось [28].
В соответствии с общими тенденциями, наблюдаемыми в сфере диагностики, ПЦР реального времени может в будущем стать заменой методам прямой микроскопии и культивирования. Высокая цена ПЦР на сегодняшний день и редкость применения этого метода в ветеринарных клиниках является лимитирующим фактором, но это может измениться в результате уменьшения цен на рынке реагентов и появлением сбережений, вызванных заменой общепринятой диагностики [6].
Таким образом, традиционные доступные методы лабораторной диагностики трихофитии у собак не всегда позволяют определить вид возбудителя и соответственно выбрать оптимальный метод лечения. Назревшая необходимость в методах быстрой и точной идентификации возбудителей открывает перспективы для внедрения в диагностику данного заболевания такого современного, высокочувствительного и специфичного метода исследования, как метод полимеразной цепной реакции [13].
После подтверждения диагноза трихофитии у собак с лечебной целью вводят 2- или 3-кратно вакцину против трихофитии. Одновременно назначают средства, обладающие фунгистатическими и фунгицидными свойствами. В начальном периоде болезни пораженные места обрабатывают раствором салициловой кислоты на 5%-й настойке йода, а также жидкостями и пастами, обладающими фунгицидными свойствами. Достаточно широко представлен ряд готовых фунгицидных форм: фунгин, нитрофунгин; мази: ундециновая, цинкундан, микосептин, «Ям», клотримазол, вединол, экалин, травоген; раствор «Никлофен», эпацид F, Апит. Смазывать или втирать в пораженные участки кожи 2-3 раза в день. Лечебный эффект усиливается при одновременном введении гризеофульвина или низорала. После выздоровления для ускорения роста волос в пораженные участки кожи втирают Carbolici cristall, Ricini и др. Ежедневно втирают в кожу больного животного для стимуляции роста волос [24].
Профилактика трихофитии у животных создает предпосылки для ликвидации трихофитии у человека <https://www.zoonoz.ru/208.php>. Поэтому меры борьбы направлены на выявление и изоляцию больных животных. Их помещают в специальные изоляторы, не чистят и лечат противогрибными средствами. Подстилку сменяют ежедневно, сжигая старую. При профилактике болезни проводят тщательную очистку и дезинфекцию щелочным формалином (500 г каустической соды, 5,5 л формалина и 94 л воды) стен, ограждений, станков, пола. Инструменты, используемые при лечении, следует хорошо дезинфицировать 30%-ной уксусной кислотой или 5%-ным раствором хлорамина. Подозрительных по заболеванию животных наблюдают или подвергают превентивному лечению. Также при профилактики трихофитии необходимо соблюдать гигиенические требования, обеспечивать животных витамином А [26].
При каждом случае заболевания собак возникает необходимость медицинского осмотра всех лиц, находящихся в контакте с животными, и членов их семей. Больных изолируют и лечат. Регулярно сменяют и подвергают дезинфекции постельное белье, а также принадлежности для стрижки и бритья, дети должны носить колпак. Активизируют санитарно просветительную работу среди населения, разъясняя опасность заражения от больных животных и людей и пути распространения болезни. Санитарное просвещение детей проводится в школах [19].
трихофития собака эпидемический клинический