Франко-американо-британская классификация миелоидных и лимфоидных опухолей (ФАБ-классификация) (Bennet J. M. etal, 1976, 1985) основана на морфоцитохимических особенностях незрелых лейкозных клеток. Одновременно с появлением ФАБ-клас-сификации и на смену подобным ей пришли классификации мор-фоиммуноцитогенетические (MlС-workingclassification, 1986, 1988), иммунологические - EGIL (Бене М. К. и др., 1996) и др. В последнее время появились классификации миелоидных и лимфоидных опухолей, которые дополнили существовавшие прежде и кроме морфоиммуноцитогенетических свойств клеток учитывают их молекулярно-генетические характеристики (Воробьев А. И. и др., 2002;"Классификация ВОЗ /Хэррис Н. Л. и др., 2000/; Wardi-man J. W. и др., 2002). Кроме острых лейкозов, представленных в ФАБ-классификации, они включают ряд новых наименований, в частности вторичные миел областные лейкозы, связанные с проводимым лечением алкилирующими препаратами и радиационным облучением, ряд лейкозов со специфическими цитогенетическими и молекулярно-генетическими нарушениями, миелобластный лейкоз с мультилинейной дисплазией и др. Согласно рекомендациям создателей классификации ВОЗ, диагноз острого лейкоза может быть установлен при достижении 20%-ного уровня бластных клеток в костном мозге (30%-ного - по ФАБ-классификации).
С развитием техники получения моноклональных антител (МКА) появилась возможность изучения иммунологических маркеров клеток различных клеточных линий (линейные маркеры) и маркеров различных уровней дифференцировки клеток. Методы проточной цитометрии, иммуноцитохимические, метод непрямой иммунофлюоресценции и другие позволяют выявить экспрессию поверхностных клеточных иммунных маркеров, объединяемых в группы дифференцировочных антигенов - кластеров дифференцировки (CD), - определить принадлежность клеток к миелоидной или лимфоидной клеточным линиям и стадию созревания клетки на пути ее дифференцировки. Благодаря иммунофе-нотипированию клеток среди Т-клеточных острых лимфобласт-ных лейкозов (ОЛЛ) были выделены в зависимости от стадии дифференцировки про-Т-тип, пре-Т-тип, кортикальный Т-тип, зрелый Т-тип. Среди В-клеточных ОЛЛ выделены про-В-тип, тип Common, пре-В-тип, зрелый В-тип ОЛЛ. Кроме этого, выделены иммунологические варианты так называемых стволовоклеточных лейкозов.
Значительная часть острых миелобластных лейкозов диагностируется морфоцитохимически. Определение иммунофенотипамиелобластов необходимо при отсутствии в лейкозных клетках основных цитохимических маркеров - миелопероксидазы, хлор-ацетат-эстеразы, липидов или их слишком слабой активности. Поэтому определение антигенного профиля субстратных клеток лейкозной популяции необходимо при острых миелобластных лейкозах с минимальной дифференцировкой, монобластных, мегака-риобластных лейкозах, эритромиелозе и эритробластном лейкозе. Диагностике некоторых типов миелобластных лейкозов, вошедших в новейшие классификации, помогают выявленные корреляции между цитогенетическими аномалиями в лейкозных клетках и их иммунологическими детерминантами. Трудно ассоциировать иммунофенотип и цитогенетические особенности клеток с их мор-фоцитохимическими характеристиками и проводить корреляции между ними. Однако названия лейкозов базируются по-прежнему на морфологических особегпгостях клеток, а в основе новейших классификаций лежат морфоцитохимические характеристики, и диагностическая работа во многих лабораториях начинается с мор-фоцитохимического анализа клеточного субстрата. Тем не менее необходимо еще раз подчеркнуть, что только комплексное использование всех современных методов может сделать диагностику лейкоза успешной.
Цитохимическая окраска клеток позволяет разделить острые лейкозы на 2 основные группы - острые лимфобластные лейкозы (ОЛЛ) и острые нелимфобластные лейкозы (ОНЛЛ), а также, основываясь на морфоцитохимических характеристиках клеток, выделить среди ОНЛЛ несколько основных вариантов. Классификация ОЛЛ в настоящее время полностью основана на иммунофе-нотипировании и цитогенетике, и тем не менее в ряде случаев мор-фоцитохимия может иметь некоторое вспомогательное значение в предварительной дифференциальной диагностике Т- и В-клеточных форм ОЛЛ.
Цитохимические реакции проводятся на мазках крови, лейко-концентратов, костного мозга, на отпечатках и срезах биопсийного материала из лимфоузлов, селезенки, кости и других органов и тканей.
Проведение цитохимических реакций требует строгого соблюдения многих правил, связанных с приготовлением препаратов и рабочих растворов из реактивов, фиксацией мазков, условиями их инкубации в процессе реакции и дальнейшей окраской.
Цитохимические реакции следует проводить до начала терапии лейкоза. Результаты исследований, которые проводятся в процессе лечения, в период рецидивов заболевания, сильно зависят от химиотерапии, в результате которой может не только измениться характер и интенсивность цитохимических реакций, но также может быть полностью редуцирована активность некоторых ферментов.
Очевидно, что просто морфологическая диагностика вариантов острого лейкоза без цитохимических исследований чаще всего невозможна, и в то же время любое цитохимическое исследование начинается с анализа морфологических особенностей исследуемых клеток, с обычной паноптической окраски. Поэтому правильно говорить о морфоцитохимических исследованиях клеток.