ЧЕК-ЛИСТ Критерии оценки постановки реакции связывания комплемента (РСК)




Критерии оценки
  Полностью названа цель применения РСК, полностью дано определение РСК, названы используемые компоненты реакции.
  РСК проводится в два этапа: I-этап. Взаимодействие антигена и антитела, связывание происходит в 1-й пробирке (опыт). Во 2-й (КА) и 3-й (КС) пробирках связывания не происходит, т.к. они являются контрольными, в них нет одного из ингредиентов (или антигена, или антитела).
  II-этап. Добавление гемолитической системы (гемолитическая сыворотка + эритроциты барана) для определения в каком состоянии находится комплемент (в связанном или свободном).
  В случае положительного результата в опытной пробирке не произойдет гемолиз ввиду отсутствия свободного комплемента. В контрольных пробирках произойдет гемолиз т.к. в присутствии свободного комплемента гемолитическая сыворотка гемолизирует эритроциты барана.
  В случае отрицательного результата во всех 3-х пробирках произойдет гемолиз. Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

ЧЕК-ЛИСТ Критерии оценки постановки реакции определения токсигенности дифтерийных бактерий.

Критерии оценки
  Полностью названа цель применения реакции, полностью дано определение, названы используемые компоненты реакции.
  На середину чашки с питательным агаром кладут фильтровальную бумагу, заранее смоченную антитоксической противодифтерийной сывороткой.
  С 2-х сторон от бумаги делают посев культур, выделенных от больных. Чашки помещают в термостат при t – 37оС на 24 часа.
  Через сутки учитывают результат: Линии преципитации (или «усики») образуются в местах взаимодействия экзотоксина с антитоксином. Происходит реакция нейтрализации токсина антитоксином.
  Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

ЧЕК-ЛИСТ Критерии оценки постановки цветной пробы для определения типа вируса полиомиелита.

Критерии оценки
  Полностью названа цель применения цветной пробы для определения типа вируса полиомиелита, полностью дано определение, названы используемые компоненты реакции.
  В 3 пробирки с культурой клеток вносят по 0,25 мл вируссодержащего материала.
  Затем вносят по 0,25 мл типовых сывороток вируса полиомиелита (I, II, III) в соответствующие пробирки.
  Сверху заливают вазелиновым маслом по 0,6 мл. Инкубируют в термостате 48-72 часа.
  Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

ЧЕК-ЛИСТ Критерии оценки постановки реакции иммунофлюоресценции прямой (РИФ).

Критерии оценки
  Полностью названа цель применения РИФ, полностью дано определение РИФ, названы используемые компоненты реакции.
  Готовится препарат, содержащий исследуемые микроорганизмы (АГ).
  Фиксируют его жидким фиксатором (ацетоном).
  Обрабатывают специфической люминесцирующей сывороткой. Отмывают избыток сыворотки.
  Высушивают препарат и рассматривают в люминесцентном микроскопе. При положительной реакции наблюдается свечение антигена. Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

ЧЕК-ЛИСТ Критерии оценки постановки полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Критерии оценки
  Полностью названа цель применения ПЦР, полностью дано определение ПЦР, названы используемые компоненты реакции.
  Исследуемую ДНК собирают в пробирку. Прогревают. При этом комплементарные нити ДНК разъединяются. Этот этап называется денатурацией ДНК.
  К образовавшимся одноцепочечным ДНК присоединяют праймеры. Этот этап называется «отжигом» (присоединением).
  Фермент полимераза достраивает комплементарные цепи ДНК. Этот этап называется «элонгация» (удлинение). Как правило, проводится 30 циклов, что позволяет получить 230 копий участка ДНК возбудителя.
  Объяснить механизм реакции.

ЧЕК-ЛИСТ Критерии оценки постановки реакции иммуноферментного анализа (ИФА)

Критерии оценки
  Полностью названа цель применения ИФА, дано определение ИФА, названы используемые компоненты реакции.
  Специфический антиген адсорбируют в лунках полистеролового планшета. Инкубируют с испытуемыми сыворотками человека 30 минут.
  Отмывают несвязавшиеся иммуноглобулины промывочным раствором.
  Связавшиеся иммуноглобулины выявляют с помощью антиглобулиновой сыворотки, к которой прикреплен фермент пероксидаза. Инкубируют 30 минут.
  Добавляется субстрат (пероксид водорода) и индикатор (диамин бензидин), которые позволяют оценить ферментативную активность по интенсивности окраски. Прокомментировать полученный результат: принцип оценивания интенсивности окраски. Объяснить механизм реакции.


Поделиться:




Поиск по сайту

©2015-2024 poisk-ru.ru
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2016-04-12 Нарушение авторских прав и Нарушение персональных данных


Поиск по сайту: