|
ДНК-полимеразы, самая большая и состоит примерно из 2500 нуклеотидных пар; обычно она действует как ДНК-полимераза, но при образовании промежуточных РНК может обеспечивать обратную транскрипцию (сходство со стратегией репликации ретровирусов).
Компонентами сердцевины, помимо ДНК-полимеразы являются, НBс- и НВе-антигены. В свободном виде НВс-антиген не обнаруживается; он ассоциируется с частицей Дейна и выявляется в ядрах инфицированных гепатоцитов. НВе-антиген представляет собой секреторную форму HBc-антигена и, соответственно, может обнаруживаться в свободном виде (обычно в ассоциации с HBs-антигеном).
Сердцевина вириона окружена липопротеидной мембраной, отдельные фрагменты которой (L, M и S-формы HBs-антигена) могут синтезироваться независимо от репликации вируса; существуют филаментозная, палочкообразная и сферическая морфологические формы HBs-антигена. Следует учитывать, что HBs-антиген не обладает самостоятельной инфекционной активностью, однако является маркером возможного присутствия инфекта в исследуемом материале. Все HBs-антигены имеют общую детерминанту, которая является в то же время и протективным антигеном вируса.
К настоящему моменту идентифицировано восемь генотипов HBV, обозначаемых от A до H; их определение еще не стало рутинным методом в диагностике HBV-инфекции, однако в ряде случаев могло бы быть принципиальным в отношении решения вопроса о предстоящей терапии. Так, известно, что генотипы А и В HBV значительно лучше отвечают на терапию интерфероном-альфа по сравнению с другими, и в этом смысле рекомендации по внедрению в практику рутинного обследования пациента с хроническим гепатитом В являются совершенно очевидными.
Репродукция HBV имеет особенности, которые влияют на перспективы противовирусной терапии.
Установлено, что вирус может поражать не только гепатоциты, но и другие клетки (почек, поджелудочной железы, костного мозга, лимфоцитов), хотя и значительно менее интенсивно.
Взаимодействие вируса с клеткой может реализовываться двумя путями. Первый – репликативный – характеризуется репликацией ДНК и синтезом вирусных белков с последующим формированием вирионов; второй – интегративный – характеризуется встраиванием вирусной ДНК в геном гепатоцита и играет важную роль в канцерогенезе. В биоптатах и аутоптатах печени, полученных от больных первичным раком печени, в большинстве случаев (80-85%) удается обнаружить последовательности HBV-ДНК.
Репликация вируса гепатита В считается одной из самых сложных среди ДНК-содержащих вирусов. При попадании HBV в гепатоцит его геном движется в сторону клеточного ядра и трансформируется в ковалентно замкнутую циркулярную ДНК. Затем происходит ее транскрипция и образуется промежуточная РНК, которая может выходить в цитоплазму, где полимераза вируса обеспечивает процесс обратной транскрипции и трансформации этой РНК в новую циркулярную ДНК. Эрадикация HBV существенно затруднена, поскольку стабильная длинная, имеющая ковалентно замкнутая циркулярная ДНК (cccDNA), попадая в клеточное ядро гепатоцита, интегрирует в геном клетки-хозяина.
Основное количество нуклеокапсидов после формирования наружной оболочки выделяется из гепатоцита, однако неиспользованные частицы возвращаются в ядро, как бы реинфицируя его.
Особенностью продуктивной вирусной инфекции при ВГВ является то, что ВГВ сам не обладает цитолитическим эффектом и не разрушает гепатоциты. Повреждение опосредуется цитотоксическими CD8 Т-лимфоцитами, которые узнают инфицированные клетки по накопившимся на поверхности гепатоцита принадлежащим НВс-антигену вирусным олигопептидам, локализованным совместно с молекулами 1-го класса главного комплекса гистосовместимости, и удаляют их. Удаление клеток провоцирует клеточное воспаление и вызывает острый гепатит. Когда инфекция сама разрешается, формируется иммунитет. Если вирус не элиминируется, тонкий баланс между вирусной репликацией и иммунной защитой нарушается, что приводит к развитию хронического гепатита и цирроза. В хронически инфицированных клетках вирусная ДНК может интегрировать в ДНК клетки-хозяина. Результатом этой интеграции может быть развитие гепатоцеллюлярной карциномы.
Большую проблему для здравоохранения представляет возможность бессимптомного носительства вируса. Механизм длительной персистенции связан с интеграцией вирусной ДНК в клеточный геном. До недавнего времени считалось, что исчезновение HBsAg и появление анти-HBs-антител служит надежным показателем элиминации возбудителя.
