МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение
Высшего образования «КРЫМСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
Им. В.И.ВЕРНАДСКОГО»
Медицинская академия имени С.И.Георгиевского
Р Е Ф Е Р А Т
ТЕМА: «Бактериологические исследования в акушерстве и гинекологии, необходимость на современном этапе, с учетом эры антибиотикорезистентности»
СТУДЕНТА: 4 курса 174-В группы 1-го медицинского факультета
Касумова Абдуллаха Зубайраевича
ПРОГРАММА ПРАКТИКИ: «Помощник врача стационара акушерско-гинекологического профиля»
СРОК ПРОХОЖДЕНИЯ ПРАКТИКИ: с 21.06.2021 по 02.07.2021г.
2021 год
Содержание
Введение…………………………………………………………………….…..…3
Определение, цели исследования, общая информация...…..…………………...5
Заключение…………………………………………………………….………….15
Список использованной литературы……………………………………..……...16
Введение
Типичная флора влагалища, из-за устойчивости численного и видового состава, предотвращает заселению влагалища болезнотворными микробами и подавляет излишнее репродукция условно-патогенных бактерий (УПМ), что в небольшом численности находятся в нормальном микроценозе. Микроэкосистема влагалища состоит из постоянно обитающих (облигатных) и переходных (случайных) микроорганизмов. Основными представителями нормальной микрофлоры влагалища являются:
- грамположительные облигатно-анаэробные и микроаэробные бактерии (lactobacterii, bifidobacterii, peptostreptokokki, clostridii, propionobacterii, mobiluncus bacteria),
- грамотрицательные облигатно-анаэробные бактерии (бактериоидс, превотелл, порфиромонас, фьюзобактрии, вейлнолелла),
- факультативно-анаэробные микроорганизмы (gardnerelli, corinebacteria, mycoplasma, stafilococcus и streptococcus, enterobacterium, дрожжи, грибы рода Кандида).
В разные периоды жизни женщины, в зависимости от инициативности репродуктивного процесса и гормонального баланса, микроценоз влагалища обладает некоторые особенности. Накануне первого менструального процесса и формированием менструальной функции на фоне неактивных яичников в микрофлоре влагалища доминируют грамположительные кокки- эпидермальные и другие коагулазонегативные стафилококки, микрококки, негемолитический стрептококк. Редко встречают непатогенных нейссерий и коринебактерий, еще реже-эшерихии и энтерококки. С наступлением полового созревания число лактобактерий увеличивается, и у половозрелых девченок флора приблизительно безоглядно представлена лактобактериями.
У здоровых дам репродуктивного возраста среднее число микроорганизмов в выделениях из влагалища составляет 107-109 КОЕ / мл (колониеобразующие единицы на миллилитр) и складывается из более чем 40 разнообразных видов. Бациллы Додерлейна - Lactobacillus spp. (95-98%) - огромный комплекс бактерий, в основном микроаэрофилы. Несмотря на разновидность видового состава лактобактерий, выявленных из влагалища здоровых дам (более десяти видов), невозможно выделить ни одного вида, который присутствовал бы у всех женщин. Чаще всего получается выделить следующие лактобактерии: L.acidofili, L.brevis, L. yensenii, L. kazei, L. leyshmanii, L. Plantarum. Среди транзиторных вагинальных микроорганизмов наиболее распространены коагулазоотрицательные стафилококки, в первую очередь S. эпидермидис, Коринобактерии spp., Стрептококки spp., Бактериоидес, Превотелла spp., Микоплазма хоминис, которые находятся в умеренных количествах (до 104 КОЕ / г).
Определение, цели исследования, общая информация
Бактериологический посев на микрофлору - это микробиологическое лабораторное исследование биологического материала человека путем посева на определенные питательные среды при определенном температурном режиме с целью выявления в нем любого количества патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и дальнейшего решения задач специфического лечения.
Материалом для исследования может служить любая биологическая жидкость человека, но в гинекологии чаще всего используется бактериологическая культура из уретры и половых органов.
Бактериологический метод незаменим при инфекциях, вызванных условно-патогенными микроорганизмами (урогенитальные микоплазмы, дрожжевые грибы, энтробактерии, Streptococcus spp., Staphylococcus spp. и др.), так как только с его помощью можно оценить количество возбудителя. Определение чувствительности к антибактериальным препаратам позволяет избежать назначения бесполезных, но небезопасных препаратов и подобрать адекватную терапию.
Изучение микробиоценоза влагалища (бактериальная культура) помогает диагностировать дисбактериоз (бактериальный вагиноз), выявить возбудителя неспецифического бактериального вагинита, грибковой инфекции, воспалительных заболеваний органов малого таза или инфекций, передающихся половым путем.
Этот метод исследования основан на способности микроорганизмов размножаться на искусственных питательных средах, что позволяет идентифицировать типы бактерий и грибков, обитающих на слизистой оболочке, определять их концентрацию и чувствительность к антибактериальным препаратам. Если выявлен вероятный возбудитель инфекционно-воспалительного процесса, его инкубируют с антибиотиками или используют диффузионные диски, пропитанные лекарственным средством - препаратом, к которому чувствителен выделенный микроорганизм - это предотвращает рост бактерий.
Резкое снижение количества лактобактерий и чрезмерный рост условно - патогенных микроорганизмов приводит к дисбиотическим нарушениям, которые клинически могут проявляться в виде воспаления стенок влагалища- вагинита, сопровождающегося сильным зудом, ощущением жжения и аномальными выделениями. Патологические изменения микроценоза влагалища могут возникать при лечении антибиотиками (местными или системными), цитостатиками, гормонами, лучевой терапией, особенно на фоне эндокринопатий (в первую очередь при сахарном диабете), при анемии, врожденных пороках развития половых органов, при применении контрацептивов и нарушениях в иммунной системе.
Цели исследования.
- Для диагностики дисбиотических нарушений состава микрофлоры влагалища;
- определить микроорганизм, вызвавший развитие инфекционно-воспалительного процесса влагалища и органов малого таза;
- для определения препаратов, к которым чувствителен возбудитель инфекционно-воспалительного процесса (для подбора эффективной антибактериальной терапии);
- для диагностики неспецифического бактериального вагинита / вульвовагинита, бактериального вагиноза, вульвовагинального кандидоза.
Показания.
- Клинические признаки воспалительных заболеваний влагалища и органов малого таза (зуд, жжение, боли);
- при обнаружении инфекционно-воспалительных изменений при микроскопии мазка из влагалища;
- если лечение вагинита неэффективно;
- При подборе антибактериальных препаратов для терапии воспалительных процессов;
- Выявление носительства инфекции;
- Выявление ИППП;
- В случае планирования зачатия и последующего вынашивания плода;
Результаты исследований в различных странах показали, что C. albicans был наиболее изолированным микроорганизмом в вагинальном секрете исследуемой популяции. Предыдущие исследования показали, что эти дрожжи являются наиболее изолированным микроорганизмом в женских половых путях. C. albicans до сих пор считался комменсалом, но в настоящее время из-за ВИЧ-инфекции, ослабляющей иммунную систему, этот микроорганизм может способствовать возникновению заболеваний, передающихся половым путем. Энтеробактерии были первым выделенным семейством бактерий. Среди этих бактерий E. coli составляла более 75% Enterobacteriaceae. S. agalactiae, также известный как стрептококк группы B (GBS), является основным микробным агентом, вызывающим серьезные инфекции у новорожденных
Стрептококк группы B (GBS) является третьей по значимости причиной бактериального менингита у новорожденных после пневмококков и энтеробактерий и второй по значимости причиной сепсиса новорожденных в странах Африки к югу от Сахары. Большинство этих инфекций связано со значительной заболеваемостью и смертностью.
Чувствительность к антибиотикам (антибиотикорезистентность) - это термин, используемый для описания чувствительности бактерий к антибиотикам. Тестирование на чувствительность к антибиотикам (AST) обычно проводится, чтобы определить, какой антибиотик будет наиболее эффективным при лечении бактериальной инфекции in vivo. Тестирование на чувствительность к антибиотикам часто выполняется методом Кирби-Бауэра, в то время как другие методы включают метод Стокса, Е-тест (также основанный на диффузии антибиотиков) и методы разведения в агаре и бульоне (для определения минимальной ингибирующей концентрации). Агар Мюллера-Хинтона наиболее часто используется в этом тесте на чувствительность к антибиотикам. Исследования были направлены на выделение, идентификацию и проверку чувствительности к антибиотикам против инфекций, вызывающих патогенные микроорганизмы у женщин, с помощью мазков. Это удобное исследование для информирования врачей об устойчивости и чувствительных штаммах этих микробов, в то время как эпидемиологически оно полезно для осведомленного женского сообщества, чтобы принять меры защиты от этих возбудителей. Однако, поскольку для получения надежных результатов обычно требуется 1-2 дня, эти методы не позволяют направить лечение на ранних, часто критических, стадиях инфекции. Как следствие, врачу остается трудный выбор: назначить антибиотик широкого спектра действия или рискнуть, что первый назначенный антибиотик окажется неэффективным.
Некоторые антибиотики, такие как норфлоксацин, ципрофлоксацин и цефамандол, являются антибиотиками выбора против грамположительных кокков, в то время как цефамандол, гентамицин, цефтриаксон и ципрофлоксацин следует использовать против грамотрицательных бактерий, выделенных из женских половых путей; однако использовать эти антибиотики следует осторожно, чтобы избежать быстрого появления резистентности.
Замечательная разница в чувствительности к антибиотикам среди видов лактобацилл. В частности, L. paracasei subsp. paracasei показал более высокую устойчивость, чем L. acidophilus, в отношении более чем 50% испытанных лекарственных препаратов. Эти различия подчеркивают важность типирования лактобацилл для оценки правильного выбора антибиотикотерапии. Группировка антибиотиков по бактериальной устойчивости in vitro позволяет нам определить, какой препарат используется для лечения инфекций у женщин фертильного возраста, менее разрушительно для нормальной микрофлоры влагалища и, следовательно, является лучшим выбором для сохранения влагалищной среды. В ходе различных исследований все препараты были активны в отношении лактобацилл и возможно только надо указать, какие из них менее активны или которых следует избегать из-за чрезмерной активности (например, имипенем и пиперациллин-тазобактам). Кроме того, также в составе антибиотика классы можно выбирать между менее или более активными препаратами. В наших условиях, что касается класса амигликозидов, например, канамицин (74% устойчивых изолятов) менее деструктивен, чем амикацин (24%), а тобрамицин (68%) более активен в наших изолятах, чем сообщалось ранее в другом месте (18). Точно так же пе-оксацин (72% устойчивых изолятов) можно использовать у женщин вместо ципрооксацина. (46%), который широко используется в Италии. Фузидиевая кислота (82% устойчивые изоляты) или тейкопланин (54%) могут быть предпочтительнее для инфекций, вызванных устойчивыми к оксациллину стафилококками, по сравнению с ванкомицином (22%).
Устойчивость микроорганизмов к противомикробным препаратам - явление довольно динамичное. Это подчеркивает необходимость текущих данных о распространенности и восприимчивости для учреждений или географических регионов. Результаты исследований показали, что многие женщины инфицированы одним или несколькими микробами. Присутствие этих микробных патогенов в половых путях может быть связано с отсутствием правил гигиены или принятием некоторых рискованных форм поведения, таких как отказ от использования презервативов или наличие нескольких сексуальных партнеров. Следует приложить усилия для включения правил телесной гигиены в программы антеннального консультирования в стране.
Устойчивые к антибиотикам бактерии представляют собой все более серьезную проблему общественного здравоохранения во всем мире. Когда устойчивость к антибиотикам присуща всем штаммам вида бактерий, ее обычно называют внутренней устойчивостью. Напротив, когда штамм типично восприимчивого вида устойчив к данному антибиотику, он считается приобретенной устойчивостью. Виды бактерий могут обладать внутренней устойчивостью к антибиотикам из-за отсутствия мишени, наличия мишеней с низким сродством, непроницаемости клеток для антибиотика или наличия механизмов оттока нескольких лекарственных препаратов, которые выделяют его. Приобретение устойчивости происходит через генетическую мутацию или усиление гена устойчивости к противомикробным препаратам (AMR) посредством горизонтального переноса. Перенос поддерживается наличием генов AMR в конъюгативных и мобилизуемых генетических элементах, таких как плазмиды, транспозоны или интегративные и конъюгативные элементы. В настоящее время существует острая необходимость ограничить распространение таких генов, которые могут передаваться условно-патогенным и патогенным бактериям.
При бактериологическом исследовании в норме в посеве преобладают лактобактерии, условно-патогенные микроорганизмы отсутствуют или выявляются в небольшом количестве – менее 104.
При бактериальном вагинозе резко снижается или отсутствует рост лактобактерий, увеличивается количество условно-патогенных микроорганизмов. При посеве могут быть выделены анаэробные микроорганизмы, Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, Mobiluncus spp., Bacteroides spp., Пептострептококки.
При вульвовагинальном кандидозе на фоне снижения количества лактобактерий наблюдается увеличение Candida spp. более 104. При этой патологии микроскопия материала должна выявить псевдомицелий гриба.
Неспецифический бактериальный вульвовагинит характеризуется ростом одного или нескольких условно-патогенных микроорганизмов в диагностически значимом титре при снижении количества или отсутствии лактобактерий в культуре.
Правила забора биологического материала для бактериологического посева.
- Воздержаться от половых контактов за день до проведения процедуры!
- За сутки до проведения отказаться от применения любых вагинальных лекарств и гигиенических средств!
- Вечером и в день взятия запрещено спринцевание!
за 2 часа до сдачи анализа лучше воздержаться от мочеиспускания(при заборе из уретры)!
запрещено проводить эти исследования в период приема антибактериальных препаратов!
- Исследования не проводится во время менструации!
Материал берется следующим образом: в полость погружается стерильный ватный тампон, который затем немедленно погружается в пробирку и затем отправляется в лабораторию. Посторонние микроорганизмы, например, из воздуха, не должны попадать в материал. Только в этом случае результаты исследований будут достоверными.
В лаборатории изучение собранного материала происходит следующим образом: материал высевается на питательные среды, при этом строго соблюдается определенный температурный режим. Во время этого процесса микроорганизмы начинают активно размножаться и делиться, что позволяет специалисту идентифицировать среди них возбудителя. Примерно через неделю наблюдающий гинеколог получает результат теста, который дает ему возможность назначить и провести антибактериальную терапию.
Чаще всего мазок для бактериологического посева используют в гинекологии в случае обнаружения бактерий, грибков в исследуемых полостях. В сочетании с ПЦР-тестом для выявления инфекций и вирусов используется культуральный мазок.
Мазок бактериальной культуры в случае кандидоза имеет некоторые отличия в исследовании. Забор сделан точно так же, как и выше. Материал берется из сводов влагалища, затем его погружают в определенную питательную среду.
Идентификация патогенов заключается в следующем: когда мазок погружается в окружающую среду, если в нем содержатся грибы кандиды, они начинают размножаться, и когда достигается определенное количество, может быть проведено исследование. Благодаря этому можно определить не только наличие грибка, но и его тип, чувствительность к лекарственным препаратам, а также точное количество грибов, выросших при посеве.
Бактериологическая культура также определяет возбудителей микроплазмоза и уреаплазмоза на питательных средах. Для этого исследования требуется взять мазки из свода влагалища, из шейки матки, со слизистой оболочки полости уретры. После получения материала определите возбудителя, его рост, количество. Определены наиболее эффективные препараты. Сложность и специфичность этого диагностического лабораторного исследования заключается в том, что оно может дать точный результат только в том случае, если патогенные микроорганизмы жизнеспособны в собранном материале.
Преимущества бактериологического посева.
-Высокая специфичность метода (перекрестных ложных реакций не наблюдается);
-Возможность исследовать абсолютно любую биологическую жидкость человека;
-Лечебная цель – определение чувствительности выявленного микроба к тому или иному лечебному средству (антибиотикограмма), что позволяет с достаточно высокой точностью проводить лечебные назначения.
Недостатки бактериологического посева:
-Длительность получения результата.
-Высокие требования к забору материала
-Определенные требования к квалификации персонала бактериологических лабораторий.
Оценка результата бактериологического исследования.
Колониеобразующая единица (КОЕ) - одна микробная клетка, способная образовать колонию, или видимая колония микробов. По КОЕ возможно определить концентрацию или количество микроорганизмов в исследуемом образце. Подсчет КОЕ проводится разными методами: подсчетом колоний под микроскопом, методом серийных разведений, секторным методом.
Результатом бакпосева является как качественная оценка (сам факт наличия возбудителя в исследуемом образце), так и количественная оценка (концентрация возбудителя в материале).
Расшифровка количественного результата проводится самым простым способом. Выделяют 4 степени роста (обсемененности) микроорганизмов в исследуемом материале.
1-я – скудный рост бактерий, отмечаемый только на жидкой питательной среде;
2-я – рост бактерий одного вида (численностью до 10 колоний) на плотной питательной среде;
3-я – от 10 до 100 колоний на плотной среде;
4-я – более 100 колоний.
Следует отметить, что исследование рекомендовано сочетать с микроскопией отделяемого из половых органов, окрашенного по Граму. При клинических признаках инфекционно-воспалительных заболеваний половых органов необходимо в первую очередь исключать инфекции, передающиеся половым путем. Все условно-патогенные микроорганизмы могут встречаться и у здоровых женщин и проявляют свои патогенные свойства только при значительной концентрации. Результаты исследования должны интерпретироваться с учетом симптомов заболевания и жалоб пациентки.
Заключение
Бактериологический метод исследования в диагностике целого ряда заболеваний до настоящего времени остается «золотым стандартом», несмотря на появление множества конкурирующих методик и методов диагностики. Высочайшая информативность бактериологического метода обусловлена самой методологией его проведения: образец биологического материала, содержащий микроорганизмы, переносится на среду, идентичную нативному биотопу по минимальному набору питательных субстратов, а в процессе культивирования создаются благоприятные условия для дальнейшего роста и размножения микроорганизмов. Методика культивирования требует больших ресурсов, строгого соблюдения норм и стандартов, исследование занимает несколько дней и имеет высокую себестоимость. Вместе с тем данный метод помогает ответить на три главных вопроса клинической микробиологии и медицинской экологии, необходимых для диагностики бактериальных инфекций и оценки биоценозов: качественный состав биотопа; количественная характеристика каждого вида микроорганизмов; антибиотикочувствительность и резистентность. В настоящее время не существует ни одного лабораторного метода, который в целом обладал бы большей информативностью по сравнению с бактериологическим. Вместе с тем необходимо отметить, что бактериологический метод не всегда является оптимальным: в ряде случаев альтернативные методы диагностики менее трудоемки и не менее информативны.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
1. Радзинский В.Е. (ред.). Гинекология: Практикум. М.; 2010.
2. Кулаков В.И., Савельева Г.М., Манухин И.Б. (ред.). Гинекология: Национальное руководство. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2009.
3. Каптильный В.А., Беришвили М.В., Мурашко А.В. Акушерство и гинекология. Практические навыки и умения с фантомным курсом: Учебное пособие. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2016.
4. Каптильный В.А., Беришвили М.В., Мурашко А.В. Методические рекомендации по практическим навыкам и умениям в акушерстве и гинекологии: Учебное пособие. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2016.
5. Каптильный В.А., Беришвили М.В., Мурашко А.В. Схема написания истории родов: Учебное пособие. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2016.
6. Кулаков В.И. Руководство по амбулаторно-поликлинической помощи в акушерстве и гинекологии. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2011.
7. Карпищенко А.П. (ред.). Медицинская лабораторная диагностика. Программы и алгоритмы. СПб.: Интермедика; 2010.
8. Кулаков В.И., Прилепская В.Н. (ред.). Практическая гинекология: Клинические лекции. 4-е изд. М.: МЕДпресс-информ; 2008.
9. Радзинский В.Е. Руководство к практическим занятиям по гинекологии: Учебное пособие. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2009.
10. Савельева Г.М., Бреусенко В.Г. (ред.). Гинекология: Учебник для студентов медицинских вузов. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2012.
11. Савельева Г.М. Гинекология. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2011.
12. Серова В.Н., Сухих Г.Т. Акушерство и гинекология: Клинические рекомендации. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2014.
13. Цвелев Ю.В., Кира Е.Ф. Руководство к практическим занятиям по гинекологии. СПб.: Фолиант; 2009.
14. Oyelowo T., Urbano R. et al. Mosby’s Guide to Women’s Health: A Handbook for Health Professionals. St. Louis: Mosby Elsevier; 2007.