Вопросы для самоконтроля и задания
1. Назовите основные части светового микроскопа.
2. Какие элементы входят в состав механической
и осветительной частей микроскопа, и каково их значение?
3. Назовите значение оптической части микроскопа и ее
составляющих. Дайте характеристику объективов.
4. Что такое разрешающая способность микроскопа, и каковы
способы ее увеличения?
5. Каков порядок работы с микроскопом?
6. Каковы правила оформления результатов наблюдений?
7. Назовите последовательность этапов приготовления
временных препаратов.
8. Какие реактивы используют при окраске растительных
образцов?
Рекомендуемая литература
1. Андреева И. И., Родман Л.С. Ботаника. – 3, 4-е изд. - М.: КолосС, 2003, 2005, 2007, 2010.
2. Андреева И. И., Родман Л.С., Чичев А.В. Практикум по анатомии и морфологии растений. - М.: КолосС, 2005.
3. Лотова Л. И. Ботаника. Морфология и анатомия высших растений. М.: КомКнига, 2007.
4. Хржановский В.Г., Пономаренко С.Ф. Практикум по курсу общей ботаники.- М.: Агропромиздат, 1989.- 416 с.
5. Хржановский В.Г., Пономаренко С.Ф. Ботаника.- 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Агропромиздат, 1988. – 383 с.
МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ
ДОНЕЦКОЙ НАРОДНОЙ РЕСПУБЛИКИ
ДОНБАССКАЯ АГРАРНАЯ АКАДЕМИЯ
Кафедра биологии растений, экологии и БЖД
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
к лабораторной работе
Микроскопирование ботанических объектов
по ботанике
Макеевка 2017
Методические указания к лабораторной работе "Микроскопирование ботанических объектов" по ботанике.- /Сост. Шелихов П.В.- Макеевка: ДонАгрА, 2017.- 12 с.
Составитель: канд. биол. наук, доцент, заведующий кафедрой биологии растений, экологии и БЖД Шелихов Петр Владимирович
|
Методические указания утверждены на заседании методической комиссии агрономического факультета 01 сентября 2017 года, протокол № 1.
Лабораторная работа
Микроскопирование ботанических объектов
Цель работы: ознакомиться с устройством микроскопа и правилами работы в лаборатории ботаники.
Задачи:
1) ознакомиться с правилами техники безопасности при работе в ботанической лаборатории;
2) изучить устройство микроскопа и порядок работы с ним.
3) освоить методики изготовления препаратов.
Теоретические сведения
Микроскоп представляет собой оптико-механический прибор, позволяющий получать сильно увеличенное изображение рассматриваемого пред- мета, размеры которого лежат за пределами разрешающей способности невооруженного глаза. У микроскопа можно выделить следующие части: оптическую систему (главную часть), осветительное устройство и механическую систему.
Механическая система состоит из подставки, тубусодержателя, тубуса, предметного столика, револьвера, макро- и микрометренных винтов, служащих для наведения на резкость (рис.1).
К осветительному устройству, предназначенному для направления света на препарат, установки оптимального освещения объекта и регулировки силы освещения, относятся трансформатор (характерен не для всех микро- скопов), встроенная лампа, конденсор, диафрагма и матовые стекла. У некоторых микроскопов вместо встроенного осветителя имеется зеркало, а осветитель ставится отдельно.
К оптической системе микроскопа принадлежат объективы и окуляр. Объектив дает сильно увеличенное, действительное, обратное изображение изучаемого объекта.
|
1. Окуляр
2. Насадка
3. Штатив
4. Основание
5. Револьверная головка
6. Объективы
7. Координатный столик
8. Предметный столик
9. Конденсор с ирисовой диафрагмой
10. Осветитель
11. Переключатель (вкл./выкл.)
12. Винт макрометрической (грубой)
фокусировки
13. Винт микрометрической (точной)
фокусировки
Объектив состоит из системы линз, заключенных в металлическую оправу. Самая главная – наружная (фронтальная) линза, от фокусного расстояния которой зависит увеличение объектива. Обычно на револьвере находятся несколько объективов с различным увеличением (8х, 20х, 40х, 90х). От увеличения объектива зависят еще две его характеристики: рабочее расстояние, т.е. расстояние от фронтальной линзы до плоскости препарата, и площадь поля зрения.
Чем больше увеличение объектива, тем меньше его рабочее расстояние и уже поле зрения.
Окуляр служит для рассмотрения изображения объекта, даваемого объективом, т.е. выполняет роль лупы. Он состоит из 2–3 линз и дает дополнительное увеличение объекта, значение которого указано на его оправе. Общее увеличение складывается из произведения увеличения объектива и окуляра.
Отчетливость получаемого изображения определяется разрешающей способностью микроскопа, которая зависит от длины волны используемого света и числовой апертуры оптической системы микроскопа (ее значение указано на оправе объектива). Чем больше значение числовой апертуры, тем выше разрешающая способность. Повысить разрешающую способность микроскопа можно, увеличив показатель преломления среды, граничащей с линзой. Для этого между фронтальной линзой объектива и исследуемым объектом помещают каплю жидкости с высоким значением показателя преломления, например каплю воды (n = 1,3), глицерина (n = 1,4) или кедрового масла (n = 1,5). Для каждой указанной жидкости существуют специальные объективы, которые называются иммерсионными.
|
Порядок работы с микроскопом
(настройка микроскопа со встроенным осветителем)
1. Расчехлите микроскоп и поставьте его в удобное для работы положение. С правой стороны должны находиться необходимые предметы (предметные и покровные стекла, реактивы, препаровальные иглы, альбом для зарисовок).
2. Работать с микроскопом следует сидя;
3. Микроскоп осмотреть, вытереть от пыли мягкой салфеткой объективы, окуляр, зеркало или электроосветитель;
4. Микроскоп установить перед собой, немного слева на 2-3 см от края стола. Во время работы его не сдвигать;
5. Открыть полностью диафрагму, поднять конденсор в крайнее верхнее положение;
6. Работу с микроскопом всегда начинать с малого увеличения. Установите объектив малого увеличения (4х с красной полосой).
7. Поместите препарат на предметный столик микроскопа, закрепив его рычагом объектодержателя. Положение препарата относительно объектива отрегулируйте с помощью ручек перемещения предметного столика.
8. Движением макровинта, глядя сбоку на препарат, осторожно опустите объектив. Глядя в окуляр и вращая макровинт на себя, постепенно поднимите тубусодержатель до тех пор, пока изучаемый объект не попадет в фокус. Неясное изображение сфокусировать микровинтом.
9. Вращением поворотной ручки на штативе микроскопа установите оптимальное освещение поля зрения.
10. Для работы с большим увеличением (10х, 40х, 100х) необходимо: установить объект или его интересующую часть в центр поля зрения, так как при большом увеличении площадь поля зрения сильно сокращается; поворотом револьвера до щелчка осторожно сменить объектив; неясное изображение сфокусировать сначала макро-, а потом микро- винтами; резкость изображения отрегулировать с помощью диафрагмы.
11. По окончании работы микроскоп снова перевести на малое увеличение и только после этого снять препарат с предметного столика; выключить осветитель, надеть чехол на микроскоп.