Рассмотрение полученных экспериментальных данных проводилось по 2 критериям оценки способности биопрепаратов к деструкции углеводородов нефти:
критерий 1 - по времени, в течение которого достигается 50% эффективность, т.е. по скорости расщепления углеводородов нефти;
критерий 2 - по максимальному снижению содержания углеводородов нефти в образцах торфа за 11 недель.
В таблице 1 представлены результаты анализов остаточного содержания нефтепродуктов в образцах торфа, которые показывают, что через 2 недели при одностадийной обработке почвы в сосудах 50%-го уровня эффективности снижения нефтепродуктов в торфе достигли: деворойл - 61,49%, инипол - 58,94%, фер-займ - 58,32%, ремедиаст - 65,32%. № 999 - 67,37%, № 670 - 63,36.
Эффективность действия псевдомина и нафтокса для сосудов с "низким" уровнем загрязнения (порядка 200 г/кг) превысила 50% уровень после 5-ти недель с момента обработки (табл. 2). Следует особо подчеркнуть способность нафтокса к интенсивному разложению нефтепродуктов на "высоком" уровне загрязнения (584 г/кг). Пятидесятипроцентный барьер здесь был преодолен через 2 недели после обработки, значение эффективности составило 60,1%. Кроме того, произошло разрыхление обработанного торфа, он приобрел способность поглощать и удерживать воду. Остальные испытуемые препараты достигли 50% уровня эффективности по истечении 4-х недель с проведением дополнительной обработки.
Таблица 1
Содержание нефтеуглеродов в образцах торфа (г/кг) и эффективность их разрушения биопрепаратами
Препарат | Исходное содержание | Через 2 недели | Через 7 недели | Через 11 недели | |||
Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | ||
Деворойл 1 | 138,9 | 36,5 | 56,7 | 64,9 | |||
215,5 | |||||||
Деворойл 2 | 108,6 | 61,5 | 84.5 | 69.6 | 75,5 | 72,5 | |
106,5 | 85.5 | 77.0 | |||||
Леворойл паста | 149,5 | 40,5 | 117,0 | 64,8 | |||
191,5 | 134,0 | 112,5 | |||||
Биоприн | 228,5 | 31,2 | 55,8 | 111,7 | 62,3 | ||
182,5 | 134,5 | 118,8 | |||||
Инипол | 58,9 | 69,8 | 78,5 | ||||
126,9 | |||||||
Фаерзайм | 58,3 | 68,6 | 74,7 | ||||
103.8 | |||||||
Деградойлас 81 | 167,7 | 39,9 | 115,5 | 57,3 | * | 57,3 | |
197,1 | * | ||||||
Деградойлас Nj9 | 199,5 | 29,7 | 93.5 | 66,6 | * | 66,6 | |
193,5 | 94.0 | * | |||||
Ремедиаст | 65,3 | 70,5 | 74,5 | * | 74,5 | ||
100,5 | * | ||||||
Препарат №670 | 63,3 | 88,5 | 76,1 | * | 76,1 | ||
99,5 | * | ||||||
Препарат №999 | 126,9 | 67,4 | 89,5 | 75,6 | * | 75,6 | |
92,4 | * | ||||||
Контроль | 244,5 | 224,5 | |||||
188,5 | |||||||
Примечание: * - испытание препаратов прекращено из-за полученной высокой эффективности |
Таблица 2
|
Содержание нефтеуглеродов в образцах торфа (г/кг) и эффективность их разрушения биопрепаратами псевдомин, нафтокс, нафтокс жидкий
Препарат | Исходное содержание | Через 1 недели | Через 2 недели | Через 3 недели | |||
Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | ||
Псевдоним | 11,2 | 41.6 | |||||
16,8 | 25,4 | ||||||
Нафтокс | 32,2 | 41.4 | 44,1 | ||||
12,5 | 60,1 | 61,1 | |||||
Нафтокс жидкий | неопр. | не опр. | 2.0 | 24,6 | |||
10,5 | 15,9 | 21,2 |
Препарат | Через 4 недели | Через 8 недели | Через 11 недели | |||
Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | Содержание | эфф., % | |
Псевдомин | 42.4 | 70,8 | 75,6 | |||
43,1 | ||||||
Нафтокс | 46.3 | 73,4 | ||||
64,2 | 70,4 | 72,4 | ||||
Нафтокс жидкий | 41,8 | 59,4 | 70,9 | |||
28.4 | 38,2 | 44,7 | ||||
Примечание: Внесение минеральных удобрений, мела и оструктуривателя произведено через 7 недель от начала опыта |
Таблица 3
|
Ранжировка препаратов по скорости деструкции нефтеуглеводородов
Наименование препарата | Ранг в соответствии с критерием 1 |
№999 | |
Ремедиаст | |
№670 | |
Деворойл2 | |
Инипол | |
Фаерзайм | |
Деградойлас Nj9 | 7 (дополнительная обработка 1) |
Деворойл | 8 (дополнительная обработка 1) |
Деградойлас 81 | 9 (дополнительная обработка 1) |
Псевдомин | |
Нафтокс | |
Деворойл паста | 12 (дополнительная обработка 1) |
Биоприн | 13 (дополнительная обработка 1) |
Нафтокс жидкий |
В таблице 3 представлена ранжировка способности биопрепаратов к деструкции нефтяных загрязнений в соответствии с критерием 1.
Для достижения максимальной степени очистки были проведены две дополнительные обработки биопрепаратом нефтезаг-рязненного грунта. Первая была проведена через 3 недели после основной. По прошествии 4-х недель после первой дополнительной обработки эффективность воздействия биопрепаратов достигла 55-78% (табл. 1, 2). Максимальное повышение эффективности после обработки отмечается для деворойла 1 (порошок), биоприна, деградойласа Nj9, деворойла (паста).
Максимальная степеныдеструкции углеводородов нефти отмечается для сосудов с почвой, обработанных деворойлом 2, инипо-лом, фаерзаймом, деградойлосом Nj9, ремедиастом, № 670, № 999.
Через 7 недель после начала эксперимента проведена вторая дополнительная обработка торфа следующими препаратами: деворойлом 1 (порошок), деворойлом 2 (порошок), деворойлом (паста), иниполом, фаерзаймом, биоприном. В сосуды с почвой, обработанные псевдомином и нафтоксом, были внесены минеральные удобрения в дозе NeoPwKso, мел - до рН 6,8-7,2 и песок - 5% от массы торфа. Через 4 недели после второй обработки максимальную эффективность показали инипол, фаерзайм, деворойл (порошок). Псевдомин и нафтокс были эффективны как на низком уровне загрязнения, так и на высоком (табл. 2).
|
В соответствии с критерием 2 оценки работоспособности биопрепараты ранжировались в следующем порядке (табл. 4).
Таблица 4
Оценка эффективности биопрепаратов при достижении максимального снижения уровня загрязнения
Наименование препарата | Ранг в соответствии с критерием 2 |
Инипол | |
Псевдомнн | |
Фаерзайм | |
Нафтокс | |
Деворойл2 | |
Нафтокс жидкий | |
Деворойл 1 | |
Деворойл паста | |
Биоприн |
Сравнительная оценка эффективности испытанных препаратов позволила выделить препараты, обладающие наибольшей способностью к окислению нефтепродуктов, по 2-м критериям (табл.5).
Таблица 5
Препараты, обладающие наибольшей активностью к деструкции нефтеуглеводородов
Наименование препарата | Ранг |
Инипол | |
Фаерзайм | |
Деворойл 2 | |
Псевдомнн | |
Нафтокс | |
Деворойл 1 | |
Нафтокс жидкий | |
Деворойл паста | |
Биоприн | |
Примечание: ранг определен как среднее арифметическое по критериям 1 и 2. |
Внесение в почву различных биопрепаратов способствовало увеличению числа бактерий в испытуемых вариантах загрязнения торфа в среднем с 4,2 o 106 (деворойл 1 порошок) до 8,7 o 108 (нафтокс жидкий) по отношению к контрольным образцам. Контрольные образцы показали стабильное количество микроорганизмов, в среднем 3,0- 105. Наибольшее количество микроорганизмов обнаружено на вариантах с применением препаратов псевдомин, нафтокс и нафтокс жидкий (табл. 6).
Это, очевидно, связано с особенностями применяемой технологии, способствующей созданию наиболее благополучной экологической ниши для внесенных в почву микроорганизмов.
Таблица 6
Влияние различных биопрепаратов на общую биологическую активность почвы
№ | Наименование препарата | Общее число микроорганизмов на МПА (кл/гр) | |
Контроль | Опыт | ||
Деворойл 1 порошок | 3,8*105 | 4,2*106 | |
Деворойл 2 порошок | 3*105 | 5,8*106 | |
Деворойл паста | 2,8*105 | 6*106 | |
Биоприн | 3,1*105 | 6,8*107 | |
Инипол | 3*105 | 7,2*107 | |
Фаерзайм | 3,1*105 | 7*106 | |
Деградойлс 81 | 2,8*105 | 5,6*105 | |
Деградойлс Nj9 | 2,9*105 | 5,4*105 | |
Ремедиаст | 3,1*105 | 6,1*106 | |
№670 | 3,0*105 | 7,2*105 | |
№999 | 3,2*105 | 6,8*105 | |
Псевдомин' | 3,1*105 | 7,2*107 | |
Псевдомин'' | 3,1*105 | 7,8*107 | |
Нафтокс' | 3,0*105 | 7,9*107 | |
Нафтокс'' | 3,0*105 | 8,5*107 | |
Нафтокс жидкий' | 3,1*105 | 8,7*107 | |
Нафтокс жидкий'' | 3,1*105 | 8,1*107 | |
Примечание: ' - образцы из сосудов с низким содержанием нефти; '' - образцы из сосудов с высоким содержанием нефти. |
Таблица 7
Количество микроорганизмов (кл/г) на среде Придхема-Готтлиба с разной концентрацией нефтеуглеводородов
№ | Наименование препарата | Крнцентрация нефти в среде | |||||
0% | 1% | 2% | 3% | 4% | 5% | ||
Деворойл 1 порошок | 5,6*102 | 6,3*105 | 5,4*105 | 4,9*104 | 7,8*102 | 1,1*102 | |
Деворойл 2 порошок | 3,2*102 | 7,8*105 | 6,2*105 | 4,2*104 | 2,0*102 | 1,2*102 | |
Деворойл паста | 1,8*102 | 5,6*105 | 6*105 | 4,8*104 | 1,9*102 | 1,0*102 | |
Биоприн | 2,8*103 | 7,3*106 | 5,6*104 | 1,8*102 | - | - | |
Инипол | 3,9*103 | 8,9*107 | 7,1*106 | 6,6*104 | 5,6*105 | 3,2*104 | |
Фаерзайм | 2,7*102 | 7,4*106 | 5,6*105 | 5,6*103 | 1,7*103 | 1,1*102 | |
Деградойлс 81 | 1,1*102 | 8,9*104 | 7,8*104 | 2,8*102 | - | - | |
Деградойлс Nj9 | 1,4*103 | 7,6*105 | 5,1*102 | 1,1*102 | - | - | |
Ремедиаст | 4,1*102 | 8,1*104 | 8,1*103 | 5,7*102 | - | - | |
№670 | 1,7*103 | 4,9*105 | 3,8*104 | 2,8*102 | 1,1*102 | - | |
№999 | 2,1*103 | 1,8*105 | 2,8*103 | 1,7*102 | - | - | |
Псевдомин' | 3,8*103 | 7,2*105 | 6,4*105 | 5,8*104 | 2,1*104 | 1,8*104 | |
Псевдомин'' | 4,9*104 | 8,1*108 | 7,8*106 | 6,4*106 | 4,8*104 | 2,1*104 | |
Нафтокс' | 3,8*104 | 8,3*107 | 7,4*106 | 6,1*105 | 4,8*105 | 3,8*104 | |
Нафтокс'' | 3,1*104 | 8,2*107 | 6,8*106 | 5,9*105 | 3,9*105 | 3,1*104 | |
Нафтокс жидкий' | 1,8*103 | 6,1*106 | 5,0*104 | 3,8*104 | 2,7*102 | 1,1*102 | |
Нафтокс жидкий'' | 1,9*103 | 5,9*107 | 4,1*106 | 2,8*104 | 1,8*103 | 1,7*102 | |
Примечание: ' - образцы из сосудов с низким содержанием нефти; '' - образцы из сосудов с высоким содержанием нефти |
Данные микробиологического анализа по определению активности жизнедеятельности нефтеокисляющих микроорганизмов подтверждают результаты, полученные в ходе химических анализов. Обращает на себя внимание тот факт, что наивысшая активность микроорганизмов всех испытанных препаратов была отмечена при низких концентрациях нефти в среде (1%). По мере увеличения концентрации нефти количество микроорганизмов в среде снижалось. Активно развивались на высоких концентрациях (до 5%) нефти в среде лишь микроорганизмы в сосудах, в которые вносились препараты инипол, псевдомин и нафтокс (табл. 7).
Таким образом, отмеченная выше способность нафтокса усваивать и быстро разрушать нефтепродукты в условиях предельно высоких концентраций связана с физиологическими и биохимическими особенностями микроорганизмов, составляющих основу этого препарата и разработанной технологии их применения.
Выводы
1. Испытанные биопрепараты для деструкции нефтеуглеводо-родов показали достаточно высокую эффективность в условиях лабораторного опыта. Наивысшей активностью разрушения нефти при уровне загрязнения торфа от 265 до 365 г/кг обладали препараты инипол, фаерзайм, деворойл 2 (порошок), псевдомин и нафтокс.
2. Показано, что наиболее полной деструкции нефтепродуктов можно добиться при повторной обработке загрязненной среды самим препаратом или внесением минеральных удобрений, рас-кислителя и оструктуривателя.
3. Наивысшей активностью деструкции нефти при высоком (до 584 г/кг) уровне загрязнения обладал препарат нафтокс, способность которого к интенсивному разрушению высоких концентраций нефти связана с физиологическими и биохимическими особенностями слагающих его микроорганизмов.
4. Для подтверждения полученных результатов необходимо провести исследования по изучению способности биопрепаратов к деструкции углеводородов нефти на различных нефтяных загрязнениях в реальных условиях короткого северного лета, с определением воздействия биопрепаратов на различные фракции нефти.
Список литературы
1. Международный региональный семинар "Охрана окружающей среды: Современные исследования по экологии и микробиологии" // Физиология и биохимия культурных растений. Ужгород, 1997. № 5.
2. Ермоленко З.М., Чугунов В.А., Герасименко В.Н. Влияние некоторых факторов окружающей среды на выживаемость внесенных бактерий, разрушающих нефтяные углеводороды // Биотехнология. 1997. № 5.
3. Ботоер М. Микробные сообщества в мерзлотных почвах Сибири // Вторая Междунар. конф. Сыктывкар, август, 1997: Тезисы. докл. Сыктывкар, 1997.
4. Stewart R.S. Distribution of multiple oil tolerant and oil degrading bacteria around a site ofnutural crude oil seepage // Тех. J.Sci. 1997. 49. №4.
5. Киреева Н.А., Новоселова Е.И., Хазиев Ф.Х. Ферменты азотного обмена в нефтезагрязненньгх почвах // Изв. РАН. Сер. биол. 1997. № 6.
6. Алехин В.Г., Емцев В.Т, Рогозина Е.А, Фахрутдинов А.И. Биологическая активность и микробиологическая рекультивация почв, загрязненных нефтепродуктами // Биологические ресурсы и природопользование. Нижневартовск, 1998. Вып. 2.