Под агглютинацией сперматозоидов понимают такое явление, как склеивание сперматозоидов между собой.
Выделяют истинную и ложную (неспецифическую) агглютинацию. Под вторым типом понимают слипание сперматозоидов с эпителиальными клетками, макрофагами, с фрагментами разрушенных клеток или комками слизи.
При истинной же агглютинации происходит прилипание сперматозоидов друг к другу, причем это слипание может быть разным – некоторые сперматозоиды соединяются головками, некоторые хвостами, а некоторые в виде головка-хвост. Причины процесса точно не ясны. Однако, если имеется большое значение, то это может говорить о наличии иммунологических причин бесплодия. Также это встречается при аутоиммунных процессах и хронических воспалениях. Иногда умеренное слипание наблюдается в сперме здоровых, фертильных мужчин.
Существует некие условные критерии для оценки агглютинации сперматозоидов. Результат выдается в количестве плюсов «+»:
"-" - отсутствие агглютинации;
"+" - слабо выраженная - в нативном препарате до 10 кучек сперматозоидов по 4-6 в каждой;
"++" - значительная агглютинация - в препарате более 20 кучек сперматозоидов по 4-8 в каждой;
"+++" - резко выраженная - в препарате более 20 кучек, в каждой более 20 сперматозоидов;
"++++" - тяжелая степень - все подвижные сперматозоиды находятся в состоянии агглютинации.
Агрегация сперматозоидов (псевдоагглютинация) - хаотическое скопление неподвижных, сперматозоидов, нагромождение их на комочки или тяжи слизи, клеточные элементы и детрит.
К круглые клетки эякулятаотносят лейкоциты, эпителиальные клетки, макрофаги, незрелые половые клетки.
Лейкоциты
Эякулят здорового мужчины содержит лейкоциты. Это нейтрофилы, количество которых не должно превышать 1-106/мл (2-4 в стандартном поле зрения).Повышенное количество лейкоцитов носит название лейкоспермии. Если содержание лейкоцитов изменяет белый цвет спермы на желтовато-зеленоватый, можно говорить о пиоспермии. Обнаружение лейко- или пиоспермии является сигналом для проведения бактериологического исследования эякулята
Макрофаги
В сперме здорового мужчины макрофагов нет. Макрофаги появляются в сперме больных, страдающих хроническими специфическими и неспецифическими воспалительными процессами простаты, эпидидимиса и др.
Спермиофаги - это макрофаги, фагирующие сперматозоиды.Иногда можно видеть спермиофаги, заполненные головками сперматозоидов, а из цитоплазмы по окружности, как лучи, видны хвосты частично заглоченных сперматозоидов. Появление в сперме спермиофагов обусловлено длительным застоем спермы в эпидидимисе и выходом из эпидидимиса неполноценных или старых сперматозоидов при редких эякуляция.
Эритроциты
В сперме здоровых мужчин эритроцитов нет. Появление эритроцитов в эякуляте носит название гемоспермия. Гемоспермия может быть истинной и ложной. Ложная гемоспермия - это появление эритроцитов в сперме в результате острой микротравмы (грубая мастурбация), получение спермы на следующий день после инструментального исследования мочевого пузыря или после взятия материала из уретры для бактериологического исследования.Истинная гемоспермия наблюдается при воспалении добавочных желез и новообразованиях в яичках и простате.
Эпителиальные клетки
В сперме здорового мужчины можно обнаружить единичные клетки ороговевшего поверхностного слоя многослойного эпителия, которые при эякуляции смываются с головки полового члена и крайней плоти. Поверхностные клетки неороговевающего многослойного плоского эпителия, выстилающие дистальный отдел ладьевидной ямки, также могут присоединиться к эякуляту. Цилиндрический эпителий выстилает губчатую, перепончатую и дистальную, простатическую часть уретры. Поверхностно расположенные клетки также могут отторгаться во время семяизвержения и выявляться в сперме.
Клетки сперматогенеза - это сперматогонии, сперматоциты и сперматиды. В сперме чаще всего встречаются сперматоциты и сперматиды на разных стадиях созревания. Сперматогонии встречаются редко. Клетки сперматогенеза хорошо различимы в нативном препарате. Это клетки правильной круглой формы, разных размеров (размером с нейтрофил или в 2-3 раза больше), с плотной, гомогенной консистенции цитоплазмой, с одним или несколькими ядрами также плотной структуры и круглой форм.
При микроскопии эякулята нередко определяются неклеточные структуры. К ним относятся:
- лецитиновые зерна
- кристаллы спермина(Беттхера)
- амилоидные тельца
- слизь
Лецитиновые зерна представляют собой мелкие образования округлой формы. Имеют белесоватый цвет. В норме их достаточно много. Уменьшение числа лецитиновых зерен свидетельствует о наличии хронического воспалительного процесса в предстательной железе.
Кристаллы спермина (Беттхера) - бесцветные, удлиненной формы с заостренными или прямоугольными концами. При этом заостренные формы напоминают кристаллы Шарко-Лейдена, прямоугольные - кристаллы трипельфосфатов. Кристаллы спермина образуются при охлаждении спермы из спермина и фосфорнокислых солей. При азооспермии и резко выраженной олигозооспермии кристаллы Беттхера образуются быстро и в большем количестве.
Амилоидные тельца являются аналогами конкрементов округлой формы. Центр образований может быть мелкозернистым, желтого цвета. Эти образования образуются в случаях длительного отсутствия семяизвержений. Иногда могут быть и при простатите.
В норме в эякуляте отсутствует слизь. При наличии большого числа слизи стоит заподозрить хронический воспалительный процесс в семенных пузырьках и в предстательной железе. Возможно, что наличие слизи может приводить к нарушениям подвижности сперматозоидов из-за того, что вязкая слизь окружает сперматозоиды и затрудняет их движение.
Трихомонады ( Trichomonas urogenitalis) - простейшее из класса жгутиковых.Крупные формы трихомонад достаточно легко распознаются в нативном препарате спермы, несмотря на активное движение сперматозоидов. Их диаметр в 1,5-3 раза больше диаметра нейтрофила.Более четко строение трихомонад можно определить в препаратах, окрашенных азур-эозином
Дифференциация нормальных и патологических сперматозоидов проводятся в фиксированных и окрашенных препаратах.
Окраска по Блюму. Суправиталъная окраска по Блюму проводится для решения вопроса о наличии живых и мертвых сперматозоидов.
1-й вариант окраски
Реактивы: 3 или 5% раствор эозина на дистиллированной воде.
• I способ. На предметном стекле смешать каплю хорошо размешанного эякулята с такой же по размеру каплей раствора эозина и покрыть препарат покровным стеклом. Исследовать препарат через 30 с при увеличении х400. Оценку полученных результатов провести немедленно. Живые сперматозоиды бесцветные (белые), мертвые сперматозоиды окрашиваются в цвет красителя (оранжевые).
• II способ. Смешать капли спермы и раствора эозина на предметном стекле. Через 1 мин сделать мазки и высушить на воздухе. Микроскопировать под иммерсионным объективом (х90 или х100) с окуляром х10 или бинокуляром.
2-й вариант окраски
Реактивы: эозин Y - 3% водный раствор, нигрозин - 10% раствор.
Ход исследования:
– на предметное стекло нанести каплю хорошо размешанного эякулята; рядом поместить 2 капли 3 или 5% водного раствора эозина;
– каплю спермы тщательно перемешать стеклянной палочкой с каплями эозина и выдержать 30 с;
– добавить 3 капли 10% водного раствора нигрозина, выдержать 30 с;
– сделать пластиковым шпателем или покровным стеклом тонкие мазки, высушить и исследовать под иммерсией (х900 или х1000);
– сосчитать 100 окрашенных и неокрашенных сперматозоидов и определить процентное соотношение живых и мертвых.