Исследуемый материал – мокрота, гной, моча, спиномозговая жидкость, промывные воды желудка, плевральная жидкость, кусочки органов.
1. Бактериоскопический метод – окраска по Цилю-Нильсену, Граму, люминесцентными красителями по Бою, фазово-контрастная микроскопия
2. Бактериологический метод – выделение, идентификация возбудителя, обнаруженик корд-фактора.
3. Обнаружение L-форм:
Ø Культуральный метод – посев в полужидкий агар – рост в виде легкого облачка с мелкими включениями;
Ø Биологический способ – пассаж на морских свинках;
Ø Иммунофлюоресцентный метод – применение сывороток меченных флюорохромом.
4. Биологический метод – заражение морских свинок, вскрытие, мазки-отпечатки, посев на питательные среды.
5. Серологический метод – РСК, РПГА, РДП в геле, ИФА, РИА, Иммуноблотинг, реакция агрегат-гемааглютинации (обнаружение циркулирующих комплексов).
6. Аллергологический метод – реакция Манту.
7. Биохимический и молекулярно-биологический метод – ПЦР, ДНК-гибридизация, ГЖХ.
Профилактика
Специфическая – плановая вакцинация в соответствии с национальным календарем прививок. Вакцинация в 3-7 дней; ревакцинация первая в 7 лет туберкулиноотрицательным детям; ревакцинация вторая в 14 лет, туберкулиноотрицательным детям, не получившим прививку в 7 лет. Используют живую туберкулезную вакцину БЦЖ (BCG – Bacille Calmette Geren) авирулентный штамм туберкулезной палочки бычьего типа (штамм Лейт – Нокар –Альфор).
Неспецифическая – изоляция больных, флюорографическое обследование, учет и диспансеризация контактных, сан – просвет работа, ежегодная постановка пробы Манту.
Лечение
Специфическое – не разработано.
Неспецифическое – антибиотики, химиотерапевтические препараты, иммунокоррекция, лазеро - и ультразвукотерапия.
Лепра
Лепра (проказа, болезнь Хансена) – хроническое генерализованное заболевание, характеризующееся специфическим поражением производных эктодермы (кожи, слизистых оболочек, периферической нервной системы) и патологическими изменениями во внутренних органах.
История
Проказа - одна из древнейших болезней, известная человечеству задолго до нашей эры, подробные описания встречаются в египетских папирусах, индийских писаниях, относящихся к периоду 1500 до нашей эры. Известно, что она была распространена в Китае, Японии, Персии. В Европе максимальное распространение относится к 11-13 столетиям (войны, крестовые походы, стихийные бедствия, эпидемии других заболеваний). Распространению заболевания способствовали развитие мореплавания и торговли, а так же завоевательнве походы; в античном море это были финикияне (morbus phoenicicus) и греки (elephantiasis graecorum); в Европу проказу принесли легионы Рима, где заболеваемость достигла пика в 11-13 вв., откуда заболевание проникло в Новый Свет (15-16 вв.), Австралию и Океанию (начало 19 в.). В большинстве стран заболевание приравнивалось к гражданской смерти с исключением из общества и лишением наследства; больных либо убивали, либо изгоняли в пустынные места. Само библейское zaraath (проказа) было собирательным термином, обозначающим моральную и физическую нечистоту. Для изоляции больных еще в Византии были организованы ксенодохии, в средневековье их заменили лепрозории, порядки которых напоминали тюрьмы, а побег всегда карался смертью. Однако драконовские методы дали свои плоды. Начиная с 14 в. заболеваемость в Европе резко снизилась, и сейчас проказа встречается в виде отдельных очагов. В настоящее время в мире насчитывается около 10 млн. больных, преимущественно в странах Третьего мира. Наибольшее количество больных находится в Азии (Индия, Китай, Бирма), Африке, Южной и Центральной Америке. На территории бывшего СССР районами эпидемии по лепре были Прибалтика, устья Волги, Дуная, Кавказ и Закавказье, Средняя Азия. На этих территориях располагаются лепрозории.
Возбудитель открыт норвежским врачом Хансеном (1873г.) и Нейссером (1874 г.) в соскобе с поверхности лепромы. Позже его обнаружили в носовой слизи больного лепроматозной формой.
Морфология
Mycobacterium leprae – имеет форму палочек, прямых или слегка изогнутых с закругленными концами, размер 0,2-0,4*1-8 мкм. В мазках из пораженных тканей располагаются внутриклеточно, реже внеклеточно, в виде «пачек сигарет», окруженные полупрозрачной неокрашиваемой капсулой. Скопления этих групп образуют, так называемые «лепрозные шары». Иногда в теле бактерий отмечается мелкая зернистость. Описаны ветвящиеся, сегментированные, кокковидные, нитевидные и булавовидные формы. Делящиеся особи имеют поперечную, не окрашивающуюся по методу Циля - Нильсена полосу. Жгутиков не имеют, спор и капсул не образуют. По химическому составу сходны с M. tuberculosis. Клеточная стенка 3-х слойная, содержит много жироподобных веществ, миколовую и лепрозиновую кислоты. Кислото- и спиртоустойчивы. Грамположительные. По методу Циля - Нильсена окрашиваются в красный цвет. Является строгим внутриклеточным паразитом тканевых макрофагов (гистиоцитов), мононуклеарных фагоцитов.
Культуральные свойства
Возбудитель проказы не растет на искусственных питательных средах, однако по некоторым литературным данным, Mycobacterium leprae выращивают на глицериново-картофельном и кровяном агарах, яичных средах, среде Вассермана. Рост наблюдается через 6-8 недель в виде сухого морщинистого налета.
В 1960 году удалось получить экспериментальную модель лепры, заразив белых мышей в подушечки лап с последующим развитием гранулем. В 1967 году заразили тимусэктомированных мышей. В 1971 году воспроизвели заболевание у броненосцев, у которых в месте введения образовались типичные гранулемы (лепромы), а при внутривенном заражении – типичный генерализованный процесс. К настоящему времени установлена возможность естественного инфицирования броненосцев и обезьян мангобеев.
Антигены
Известно 2 антигена возбудителя:
1. Термостабильный (полисахарид), групповой для микобактерий;
2. Термолабильный (белок), специфичный для Mycobacterium leprae.
Факторы патогенности
1. Высокое содержание липидов;
2. Цитохромоксидаза;
3. Щелочная фосфатаза;
4. Фенолоксидаза;
5. Облигатное внутриклеточное паразитирование.