Метод экстракционной фотометрии. Около 0,1 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в делительную воронку емкостью 50 мл и встряхивают с 2,5 мл воды. Затем прибавляют 0,4 мл 1 % раствора тропеолина 000-II, 3 капли 0,5 моль/л раствора соляной кислоты, 20 мл хлороформа и встряхивают содержимое воронки в течение 1 минуты. Отстоявшийся хлороформный слой переносят в мерную колбу емкостью 200 мл. Извлечение повторяют еще 4 раза, употребляя каждый раз по 20 мл хлороформа и встряхивая в течение 1 минуты. Хлороформные извлечения переносят в ту же мерную колбу, объем раствора доводят хлороформом до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на фотоэлектроколориметре, с синим светофильтром в кювете с толщиной слоя 5 мм. Контрольным раствором служит хлороформ.
Параллельно проводят контрольный опыт с 2,5 мл раствора стандартного образца платифиллина гидротартрата.
Содержание платифиллина гидротартрата в граммах (Х) вычисляют по формуле:
А1. б. 0,002. 2,5
Х = ------------------------,
А0. а
где А1– оптическая плотность испытуемого раствора
А0- оптическая плотность стандартного образца;
0,002 – содержание платифиллина гидратартрата в граммах в 1 мл раствора стандартного образца;
а – навеска препарата в граммах;
б – средняя масса таблетки в граммах.
Содержание С18H27NO5 . С4Н6О6 в должно быть 0,0045-0,0055 г, считая на среднею массу одной таблетки.
Цианокобаламин
Спектрофотометрический метод. Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в воде в мерной колбе емкостью 500 мл и доводят объем раствора до метки. 25 мл этого раствора переносят в мерную колбу емкостью 250 мл и доводят объем раствора водой до метки. Определяют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 361 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.
|
|
Содержание цианокобаламина в процентах (Х) вычисляют по формуле:
А. 500. 10
Х = ------------------------,
207. а
где А – оптическая плотность испытуемого раствора;
207- удельный показатель поглощения А1см1% чистого цианокобаламина (безводного) при длине волны 361 нм;
а – навеска препарата в граммах.
Содержание С63H88СоN14Р в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 95,0 %.
Линкомицин гидрохлорид и клиндамицин
Количественное определение проводится методом газо-жидкостной хроматографии.
Прозерин
Метод ионообменной хроматографии. Около 0,03 г (точная навеска) препарата растворяют в 10 мл воды, пропускают через колонку с катионитом КУ-2 в Н-форме (RH) со скоростью вытекания 20-25 капель в минуту. Далее колонку промывают водой (30-50 мл) до нейтральной реакции по метиловому оранжевому. Промывную жидкость присоединяют к основному фильтрату и титруют из полумикропипетки 0,1 моль/л раствором натрия гидроксида (индикатор – метиловый оранжевый).
1 мл 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида соответствует 0,03344 г прозерина.
Задание 3. Проведите количественное определение лекарственных веществ спектрофотометричесим методом, согласно данных приведенных в таблице:
| Препарат | Растворитель | Длина волны, нм | А1%/1см |
| Никотинамид Никотиновая кислота Пиридоксальфосфат Пиридоксина гидрохлорида Изониазид Фтивазид Пиридинолкарбамат (пармидин) | 0,1 моль/л раствор хлороводородной кислоты Вода 0,1 моль/л раствор хлороводородной кислоты Фосфатный буферный раствор, рН ≈ 7,0 Вода 0,01 моль/л раствор хлороводородной кислоты 0,1 моль/л раствор хлороводородной кислоты Кислота хлороводородная | 309,7 246,9 – 312,93 – – – | |
| Хинина сульфата Хинина гидрохлорида | Этиловый спирт Этиловый спирт Этиловый спирт 0,1 моль/л HCl 0,1 моль/л HCl 0,1 моль/л HCl Этиловый спирт Этиловый спирт Этиловый спирт | 860,0 98,7 125,1 140,3 880,03 98,00 127,98 | |
| Апоморфина гидрохлорид Кодеин Кодеин фосфат Морфина гидрохлорид Тримеперидин гидрохлорид (промедол) | Вода Вода 0,1 моль/л НС1 Этиловый спирт 0,1 моль/л НС1 Буферный раствор с рН 2,0-4,0 Этиловый спирт Вода Вода 0,1 моль/л НС1 Вода | 530,6 512,3 531,75 50,11 55,62 53,04 40,56 37,01 39,9 39,7 6,30 | |
| Тиамина - хлорид | Вода То же 0,1моль/ л раствор хлороводородной кислоты. | 282,5 197,5 246,9 | |
| Тиамина - хлорид | Вода | 212,3 | |
| Фосфатиамин | Фосфатный буферный – раствор рН»7,0 |
Методика. На основании данных таблицы рассчитать навеску лекарственного вещества для проведения количественного определения с учетом необходимого разведения (А » 0,4).
|
|
Приготовить раствор, для анализа исходя из полученных выше данных, и рассчитать содержание вещества в анализируемом образце.
|
|
Нифедипин
Спектрофотометрический метод. 0,125 г препарата растворяют в 50 мл метанола и доводят тем же растворителем до 100 мл в мерной колбе. 1 мл раствора разводят метанолом до 50 мл в мерной колбе и определяют оптическую плотность при 350 нм.
А1%1см при 350 нм = 140.
Содержание нифедипина в препарате должно быть не менее 99,5 %.
Кислота фолиевая
Условия спектрофотометрического определения. Спектрофотометрическое определение фолиевой кислоты в 5 моль/л растворе серной кислоты.при 320 нм может быть использовано для анализа ее в лекарственных смесях.(А1%1см – 209,8).
Рибофлавин
Спектрофотометрический метод. Около 0,06 г препарата (точная навеска) растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 мл в смеси 2 мл ледяной уксусной кислоты и 500 мл воды при нагревании на водяной бане. Раствор охлаждают и доводят объем раствора водой до метки. 10 мл этого раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 3,5 мл 0.1 моль/л раствора натрия ацетата и доводят объем раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 267 нм.
Содержание рибофлавина в процентах (Х) вычисляют по формуле:
А. 10000
Х = ------------------,
а. 850
где А – оптическая плотность испытуемого раствора;
а – навеска в граммах;
850 – удельный показатель поглощения А1%1см чистого рибофлавина при длине волны 267 нм
Содержание С17Р20N4O6 в препарате должно быть 98,0-102,0 % в пересчете на сухое вещество.
Рибофлавин-мононуклеотид
Спектрофотометрический метод в видимой области спектра. Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 250 мл, добавляют 0,5 мл ледяной уксусной кислоты и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл переносят 1 мл полученного раствора, добавляют 1 мл 0,1 моль/л раствора натрия ацетата и доводят объем раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 445 нм.
Содержание (%) рибофлавина мононуклеотида вычисляют по формуле:
А. 250. 25. 1,2709
Х = -----------------------------,
а. 323
где А – оптическая плотность испытуемого раствора;
а – навеска в граммах;
323 – удельный показатель поглощения А1%1см при длине волны 445 нм
1,2709 – коэффициент пересчета рибофлавина в рибофлавине мононуклеотиде, полученный путем деления молекулярной массы безводного рибофлавина-мононуклеотида на молярную массу рибофлавина (478,33: 376,37 = 1,2709).
Итоговый контроль
1. Проверка теоретических знаний по вопросам самоподготовки и итоговым заданиям.
2. Проверка студентов о выполнении практической работы.
Итоговые задания
1. При количественном определении фурадонина по АНД (см. задание 2) установлено, что А = 0,466; А1см1% = 750; а= 0,1017 г. Соответствует ли содержание (%) фурадонина требованиям АНД?
2. Рассчитайте содержание нифедипина в препарате, если известно, что на анализ взята навеска 0,1288 г, оптическая плотность раствора в метаноле при длине волны 350 нм равна 0,418; величина специфической абсорбции равна 140,0; разведение 5000.
Сделайте заключение о качестве препарата, если содержание нифедипина в препарате должно быть не менее 99,5 %.
3. Рассчитайте удельное вращение водного раствора кокаина гидрохлорида, если угол вращения =1,75º. Проверьте и обоснуйте ответ в соответствии с требованиями АНД.
4. Рассчитайте удельный показатель поглощения трихомонацида при длине волны 357 нм, если оптическая плотность 0,001% раствора вещества равна 0,52.
5. Напишите структурную формулу, латинское, румынское и химическое названия тримеперидина гидрохлорида.
Рассчитайте содержание (%) тримеперидина гидрохлорида в анализируемом спиртовом растворе, если при длине волны 255 нм и величине специфической абсорбции 6,3, оптическая плотность – 0,409. Рассчитайте коэффициент разведения.
6. Напишите структурную формулу, латинское, румынское и химическое названия кодеина.
Рассчитайте необходимое разведение для определения содержания (%) кодеина в анализируемом образце (спиртовой раствор), если при длине волны 284 нм и величине специфической абсорбции 50,11 оптическая плотность должна быть около 0,400. Масса навески – 0,4005 г.
7. Рассчитайте концентрацию раствора тиамина бромида для спектрофотометрического количественного определения, при длине волны 262 нм, А 1%1см = 197,5 и А = 0,400.
Литература
1. Конспект лекций.
2. Farmacopea română. Ediţia X-a –Bucureşti: Editura medicală, 1993.-1315 p.
3. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1, ХI изд., – М.: Медицина, 1987. – 336 с.
4. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2, ХI изд., – М.: Медицина, 1989. – 400 с.
5. Bojiţă M., Roman L., Săndulescu R., Oprean R. Analiza şi Controlul medicamentelor.Vol. I. - Cluj-Napoca: Editura Intelcredo, 2003. – 495 p.
6. Bojiţă M., Roman L., Săndulescu R., Oprean R. Analiza şi Controlul medicamentelor.Vol. II. - Cluj-Napoca: Editura Intelcredo, 2003. –768 p.
7. Вabilev F.V. Chimie farmaceutică, Chişinău: Universitas, 1994.- 675 р.
8. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия.- М.: Медицина, 1985. – 768 с.