Репл лучше изуч на прим киш палочки. Днк полимеразы 1,2,3. 1 -связ с 1цепоч днкэкзонуклеазн активность 3'-5'контроль за присоед нуклеотид,удаление ошибок, 5'-3'- удален рнкзатравки-праймера/в целомответств за созревание реплицир днк(застраивание брешей) днкполимераза2 -лучше работ с биспиральн днк. Функц-репарация днк-достраиваниеповрежд нуклеотид, днкпол3-сост из 10 субъединиц -глав роль в репликацсинтез лидир и отстающ цепей днк,субъединицы явл регуляторами у усиливают действие каталитич ядра днкполимераз3. Инициация репликац:единств обл нач репликац oriC, сложн комплекс белков осущ инициацию репл назван — прайсомой, она явл элементом ещё более слож комплекса реплисомы,осуществл пр-с полной репликации.при обр реплисомы происх АТФзависимое формир димерного комплекса хлорфермента днкполимераз3, связанного с 3'концом праймера. Элонгация репликац - расплетает атр-зависимая еликаза,одноцепочечн участки покрывает SSBбелок,днкполимераз3 движется по одной из матричных цепей в направлен раскрывающ вилки и синтезир ведущ днкцепь.по другой матрич цепи движется праймосомаи синтезир рнк затравки для отстающ цепи. 2 молек днкполимераз3 синтезир фрагметы Оказаки,днк полимераз1 катализир заполнен брешей межд фрагмент оказаки.одноцепочечные разрывы межд фрагм.Оказаки ззашивает днклигаза.-образ нов цепь из фрОказаки.ведущ и отстающ цепи мог реплиц одноврем,преодалевая антипараллельность за счёт образования петли.необычность синтеза на репликативн вилке в том что 1 белков компанет осущ непрерывный синт ведущ цепи и прерывистый синт фр Оказаки отст цепи,периоически диссоциируясь от матрицы для инициац синтеза с кажд нового праймера.+репликатив комплекс распозн поврежд днк,останавливать репликац, продолжать после устранения. Терминация реп. -происх когда встр 2 репликатив вилки при удвоен кольцевой мол днк,либо в точке нач репликации(при однонаправленной), в середине кольца(двунаправленная),в месте встречи кольца соедн днклигазой,обычн попарносцеплены и образ катенан..расцепить мож днкгираза. Регуляция репл. 1 клет делен=1 акт инициац на точк oriC. Инициир синт мож белокDnaA, так же активир репликац транскрипцией в котор перед транскрибирующ рнкполимераз есть положительн сверхспирализация днк,а за ней отрицат. Стабильн поддержан любого репликона требсогласов его репликац с клеточн делением,упорядоч распредел днк по дочерним клетк,правильн сегрегация у бактер за счёт прикрепл днк к мембране,потом растаскивается 2 копии прореплицир днк по разн дочерн клетк.
|
|
13. Генетическая рекомбинация. Виды.
-прсы привод к перераспредел нуклеотидн последоват в геномах.-основа генетич изменчив,для приспособл к окруж среде и обеспеч длит сущесств видов.впервые на возможн ГР обратил вним как обмен участ гомологичн хромос-1903 Т.Бовери,док ва обмена генами меж хромос вперв получ 1919 ТХМорганом. ГР делят на 2 класса: 1)Общая рекомб -обмен генет материал происх меж гомологичн нуклеотидн послед днк,чаще между 2копиями одной хромосомы(пр-обмен участк гомологич хромос в пр-се мейоза.(в профазе мейоза1),в пр се рекомбин у E.Coli-приним участ белки,обесп поиск и рекомбин гомологич послед днк: белок RecBCD присоед к 2 спирали днк и движ вдоль молек осуществл ее расплетание в поиске сайта рекомбинац,действ как хеликаза-расплет 2спираль, затем действ как нуклеаза разрывает 1 цепь днк -высвобождая небольш 1цепочечн участ днк,котор мож взаимод с косплиментарн участк другой молек днк,для обеспеч комплиментар взаимодейств высвободивш учсток 1из цепей днк-«Ус» поддержив в вытянутом положении с помощью SSBбелка(участв в репликац и рекомбинац бактериальн днк,взаимод с сахарофосфатным оставом всех1цепочн участков днк и созавая услов для комплиментарн взаимод азотист основан)SSBбел действ в комплексе с RecA(удерж вместе одноцепочеч цепь и 2спираль.имеет 2 различ участка для связи взаимод в ходе рекомбин епей днк)б.RecA, RecBCD-облад днкзависим АТРазной активностью.SSВбелки+RecA в виде кластеров присоед к взимодейств цепднк исозд услов для эффектив рекомбинац.вточк рекомб возник ступенчатое соедин молек днк,включающ взаимод несколь тысяч пароснований. Потом разрыв др цепи днк,рекомбин с перекрещиванием цепей,возник характерн крестообразн структураразрыв и сшивание которой заверш общ рекомбинац. В отсутств кроссинговера.при кроссингов в крестообр могут происх вращения составл её элеметнов относит др друга, приводящ к изомеризации цепей и созд условия для крупномаштабн обмен участк меж молек днк.=в рез те генетич р-и с кросинговер осущ перемещ из хромос в хормос больших гомологичн последовательност,но общая послед располож генов в хромосоме не наруш. 2)Сайт-спецефическая рекомбинация - не треб гомологии днк,в обмен вступаюткороткие спецефичн нуклеотидн последоват днк изменяется распределение нуклеотидных поседовательностей в геноме.особ фермент узнаётспецефическ последовательности в 1или2 рекомбинир молек днк а комплиментарн спаривания протяжённых участк не происход.(пример включение бактериофага лямбда в днкE.Coli -осущ пр-с лямбда интегразасвязыв участок днк бактерии и днк бактериофага, разрывая цепи обеих молек,и сшивая после взаимодействия.-днк фага интегрировано в днк бактерии. Интеграза(«обратимая нуклеаза»как нуклеаза разрывает как лигаза сшивает) мож осуществл обратн выход днкФага из лнкбактер.) (=ССР лежит в основе перемещения генов в предел 1 молекул, объясняет феномен прыгающих генов)
|
|