Краткий обзор.
Цель: изучить фармакогнестические свойства корневища Костуса Прекрасного с помощью фитохимического, физикохимического, флюоросценцического анализами и HPTLC исследованием.
Метод: свежий корень и высушенный порошковый образцы корневища были изучены макро-морфологическим и микроскопическим путями. Предварительно проведя фитохимические исследования материала данного растения ВОЗ (всемирная организация здравохранения) выдвинула свои характеристики для стандартизации. Исследования методом HPTLC (высокоэффективная тонкослойная хроматография) для определения количества диосгенина в этанольном экстракте корневища Костуса Прекрасного были также проведены.
Результаты: Корневище данного растения имеет особый вид перидермы, называемый "Storied cork" (если переводить дословно-легендарная пробка). Он состоит из нескольких продолговатых, тангенционально растянутых, тонкостенных клеток фелломы. Имеет множество сосудистых пучков, расположенных по всей кортикальной зоне. Каждый пучок имеет скопление, состоящее из 4-5 узких угловых элементов ксилемы и малую часть элемента флоэмы. Стелар имеет меньше эндодермических и перициклических слоёв и центрально расположенных сосудистых пучков. Кристаллы оксалата кальция ромбондальной, кубовидной и цилиндрической формы являются схожими в основании клеток паренхимы. Призматические кристаллы 10 мм в ширину, а друзы 20-30 мм. Предварительное фитохимическое исследование корневища показало наличие стероидов, сапониновых гликозидов и сахаров. В HPTLC исследованиях количество диосгенина rf было равно 0,61, также было
установлено, что линейность находится в диапазоне концентрации от 600 до 1800, а значение коэффициента кореляции равно 0,9934. Результаты анализов были подтверждены с точностью. Соответственно было установлено, что LOD и LOQ составляют 5,69 и 17,25.
Заключение: Корневище Костуса Прекрасного будет использоваться в стандартизации качества, чистоты и индификации образцов.
Вступление
Усложненные современные исследовательские инструменты уже сейчас доступны для изучения лекарственных растений, однако микроскопический метод является одним из самых простых и дешёвых методов исследования для установления подлинности основных материалов.
Костус Прекрасный- прямое растение, примерно с 2,7 метров в высоту, корень клубнеплодный, ближе к основанию стебель деревянистый, листья бесчеренковые, [15-30]×[5,7-7,5]см., продолговатые, расположены в форме спирали. Растение чаще всего встречается в Малайском полуострове, на юго-западе Азии, а также это растение было привито и в некоторых тропических землях, к примеру Гаваи. Оно было внесено как агрессивное растение в Федеративных Штатах Микронезии, Гуаме, Республике Палау, и в Французской Полинезии. Костус прекрасный известен как Кеуканд, Кыст (хинди), Пакармула, Пенва, Пашкармула, кустха(санскрит) и Костали(тамил).
Согласно Аюверде, корневище Костуса Прекрасного-горькое, вяжущее, острое на вкус, охлаждающее, является слабительным, глистогонным, очищающим,жаропонижающим, отхаркивающим, тонизирующим средствами, также полезен в успокоении ожогов, помогает при запорах, проказах, глистах, кожных заболеваниях, температуре, астме, бронхите, воспалениях и при анемии. Растение также используется в качестве анти- диабетического средства. Эреманиин, выделяемый из корневища Костуса обладает гипогликемическими антигиперлипедимическими свойствами. Также является антиоксидантом, противогрипковым, противотуберкулезным, гипатепротекторным, остеогенным средствами. Недавно наша исследовательская группа установила и доложила о влиянии заспиртованного корневища Костуса Прекрасного на вызванные стрессом изменения в нейротрансмиттерах мозга и уровнях фермента
моноаминоксидиоза у крыс-альбиносов.Полученные результаты обеспечивают данные о антистрессовой активности тестируемых экстрактов. Костунолин, выделяемый Костусом Прекрасным, препятствует противовоспалительным цитонинам и INOS в живой ткани мышиной микрофлии.
Было сообщено, что корень Костуса Прекрасного содержит в себе диосгенин, октакасановую кислоту, диосгенин-циклоартанол, спирастанол-гликозид. Также было выявлено наличие метилового эфира пара-кумаровой кислоты и противогрипкового эффекта в корневище Костуса Прекрасного. Также были обнаружены хиноны, такие как 6-метил дигидрофитилплатохинон и дигидрофитилпластохинон.
Недавно Костус Прекрасный приобрёл большое значение в коммерческом источнике диосгенина, что является подходящим материалом для синтеза кортикостероидов и оральных контрацептивов. Учёные провели исследование Костуса из разных частей Индии и пришли к выводу, что количество диосгенина в корневище составляет 3,37%. Panda Adele al. указывает на четкую взаимосвязь между возникновением диосгенина и биомассы с высотой, возрастом и стадиями развития растения. Проводимое исследование, чтобы сравнить микроскопические характеристики корневищ с их физикохимическими параметрами для установления различия от их возможных аналогов и примесей - как попытка в этом направлении.
Фитохимическая оценка качества, которая включает в себя фитохимический скрининг, химическое профилирование и анализ структуры соединений с помощью современных аналитических технологий. За последние 2 десятилетия HPTLC стала важным инструментом для качественного, полукачественного и количественного фитохимического анализов лекарственных препаратов. Она (HPTLC) включает в себя разработку профилей отпечатков TLC и оценку химических соединений и биосоединений. Для совершенствования параметров стандартизации, также для количественной оценки HPTLC был взят диосгенин в качестве стандартного соединения, затем его концентрация была оценена в этанольном экстракте корневища.
Материалы и методы
Сбор, идентификацияи аутентификация образца.
Образец для предлагаемого исследования был собран в Джахаварлала, Неру, Криши, Вишва, Видьялая. Он был идентифицирован и аутентифицирован с помощью таксономического разделения Национального Бюро генетических и растительных ресурсов растений, Нью-Дели, письменное свидетельство об образеце, номер NHCP/NBPGR/2007/98/2225, 22/08/2007 было доставлено в департамен. Необходимый образец вырезали из корневища и зафиксировали в FAA (формалин 5мл +уксусная кислота=5мл+70% этиловый спирт =90 мл.) После 24-х часовой фиксации, образец дегратировали градуированной серией третичного бутилового спирта. Инфильтрацию образцов проводили путём постепенного добавления парафина (точка плавления 58-60°) до тех пор, пока раствор не переполнился. Затем образцы были перелиты в парафиновые блоки.
Разделение.
Образцы были разделены с помощью Ротационного Микротома. Депарафинирование проводили самым обычным способом. Секции были окрашены в толуидиновый синий, в соответствии с методом О`Брайена. Поскольку толуидиновый синий является полихромным, результаты окрашивания были отчетливо видны. Также были получены некоторые цитохимические реакции. Краситель придавал бледно-розовый цвет целлюлозным стенкам, синий - лигнированным клеткам, темно-зеленый - суберину, фиолетовый- слизи, синий-белкам и тд.
Микрофотография.
Фотомикрографические описания тканей дополняются микрофотографиями там, где оно требуется. Фотографии с различными размерами были сделаны на микроскопический блок Nikon LabPhot2. Для хорошей видимости было использовано яркое поле. Для исследования кристаллов, крахмальных зерен и лигнитированных клеток использовался поляризированный свет. Также эти структуры обладают свойством двунаправленности, под поляризированным светом они кажутся яркими на тёмном фоне. Увеличения фигур показано шкалами. Описанные термины приведены в стал дартной книге в атомии.
Характеристика порошка.
Предварительно были проведены исследования поведения порошка с различными химическими реагентамии. Также были проведены микроскопические исследования.
Флюоресцентный анализ.
Флюоресцентные характеристики порошкового материала были подвергнуты ультрафиолетовому излучению, согласно методу, описанному Чейсом, Праттом и Какаски.