Вопрос 4. методы определения кетоновых тел и билирубина в моче(реакций)




(методы Ланге, лестраде, Регаля, Ротера, Розина и Фуше)

У зд человека с мочой выводится 20-50 мг кетонов в сцутки. Обычные качественные (пробы-Легаля Ланге, Лестраде) такое количество не обнаруживают. Выведение большого количества кетонов-кетонурия Кетонурия, ацетонурия - состояние, когда кетоновые тела появляются в моче.

 

Определение кетоновых тел в моче Качественные реакции на кетоновые тела основаны на свойстве последних в щелочной среде давать соединение с нитропруссидом натрия, имеющее красную или фиолетовую окраску. При этом надо учитывать, что некоторые нормальные составные части мочи, в частности креатинин, также реагируют с нитропруссидом натрия; чтобы отличить кетоновую окраску от окраски, которую дает креатинин, используют химически чистую ледяную уксусную кислоту. Уксусная кислота разрушает окраску, связанную с креатинином, при этом сохраняет и даже усиливает окраску, обусловленную кетоновыми телами.   Кетоновые тела (ацетон, оксимасляная и ацетоуксусная кислота) определяют, как правило, в тех порциях мочи, в которых была обнаружена глюкоза. В более редких случаях определение кетоновых тел производят по специальному требованию врача.   Кетоновые тела определяют реакцией Легаля или реакцией Ланге. Для этих реакций необходим свежеприготовленный насыщенный раствор нитропруссида натрия: к щепотке реактива (кристаллы рубиново-красного цвета) приливают 3-4 мл воды и взбалтывают смесь до получения розовато-красного окрашивания жидкости; при этом на дне пробирки должна остаться часть кристаллов реактива.   Реакция Легаля К 4-6 мл мочи прибавляют несколько капель свежеприготовленного насыщенного раствора нитропруссида натрия и несколько капель 10% водного раствора едкого натра. Получают рубиново-красное окрашивание. Эта окраска возникает всегда в любой моче от присутствия креатинина. Затем прибавляют 8-10 капель ледяной уксусной кислоты (до резко кислой реакции). При наличии кетоновых тел рубиново-красный цвет исчезает и появляется пурпурно-красный или фиолетово- красный (малиновый). При исчезновении красного цвета смеси и переходе его в зеленовато-желтый цвет реакцию считают отрицательной Виды реакций на кетоновые тела Реакция Ланге К 4-6 мл мочи прибавляют 8-10 капель ледяной уксусной кислоты и несколько капель свежеприготовленного насыщенного раствора нитропруссида натрия. На смесь с помощью пипетки осторожно наслаивают 1-2 мл аммиака. Пробу считают положительной, если в течение 3 минут на границе между аммиаком и остальным содержимым пробирки образуется фиолетово-красное кольцо В бланке анализа мочи обычно отмечают: «кетоновые тела обнаружены» или «кетоновые тела не обнаружены».   Проба Лестраде реактив для которой готовят так: 1 г нитропруссида натрия, 20 г сернокислого аммония и 20 г безводного карбоната натрия помещают в ступку и тщательно растирают до получения мелкого однородного порошка. Реактив стоек. Его хранят в тщательно закрытой стеклянной банке.   Постановка реакции. На предметное стекло, помещенное на белый лист бумаги, наносят щепотку реактива Лестраде, к которому добавляют 2-3 капли исследуемой мочи. При наличии кетоновых тел наиболее интенсивное вишневое окрашивание наступает в течение 1-3 минут. В зависимости от степени окраски проба бывает: а) слабо положительной (+)—слабо розовое окрашивание, появляющееся через 2-3 минуты; б) положительной (+ +) — отчетливая фиолетовая окраска, появляющаяся через 1-2 минуты; в) резко положительной (+ + +) — фиолетовая (вишневая) окраска, появляющаяся сразу же после нанесения мочи, которая через 1-2 минуты становится более интенсивной; г) отрицательной (—) — цвет смеси не изменяется.
Билирубин определяют одной из следующих проб:   Большинство качественных проб на билирубин основано на его окислении йодом, кислотой и т.д. в биливердин зеленого цвета. Йодная проба Розина.В качестве окислителя используют раствор Люголя (1 г йода, 2 г йода калия, 300 мл дистиллированной воды) или 1 %-ный раствор йода. На 4-5 мл мочи наслаивают один из указанных реактивов. При наличии билирубина на границе двух жидкостей появляется зеленое окно биливердина. Проба Фуше Реактивы: а) 15%-ный раствор хлорида бария; б) 100 мл 25 %-ного раствора ТХУК; в) 10 мл 10 %-ного раствора хлорного железа (раствор Фуше). Ход определения: к 10-12 мл мочи прибавляют объема хлорида бария, смешивают, фильтруют. Хлорид бария осаждает билирубин. На вынутый из воронки фильтр наносят 2-3 капли раствора Фуше. При положительной реакции на фильтровальной бумаге появляются зелено-синие или голубоватые пятна. Сухая проба на билирубин В последнее время находит распространение так называемая сухая проба на билирубин. На специальную индикаторную бумагу наносят каплю исследуемой мочи. При наличии билирубина образуется зеленое окрашивание.

Вопрос 5. Организованные осадки мочи (эритроциты и лейкоциты)
Практика - найти клетки крови



Поделиться:




Поиск по сайту

©2015-2024 poisk-ru.ru
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2022-09-06 Нарушение авторских прав и Нарушение персональных данных


Поиск по сайту: