Отчет
О РАБОТЕ ФЕЛЬДШЕРА ЛАБОРАНТА
ЛАБОРАТОРИИ HLA-ТИПИРОВАНИЯ
ГБУЗ «Станция переливания крови имени О.К. Гаврилова» ДЗМ
Жеребьевой Ольги Александровны
Москва 2018 г.
Рецензия
На работу – отчет фельдшера-лаборанта лаборатории
HLA-типирования ГБУЗ «Станция переливания крови имени О.К. Гаврилова» ДЗМ г. Москвы
Жеребьевой Ольги Александровны
В рецензируемом отчете фельдшера-лаборанта Жеребьевой О.А. достаточно полно освещены структура и характеристика лаборатории HLA-типирования, состав, задачи. Отражены вопросы взаимодействия с подразделениями Станции Переливания Крови. Подробно изложены функции и описан алгоритм работы среднего медицинского персонала.
В отчете отражены вопросы ведения документации, уделено внимание температурному режиму и хранению реагентов, вопросам санитарно-гигиенического и противоэпидемического режимов.
Отчет имеет раздел, отражающий личную работу фельдшера -лаборанта по работе на различных участках лаборатории, регистрации поступившего биологического материала, выделение ДНК, постановка амплификации методом SSP, проведение электрофореза в агарозном геле, интерпретация результатов и утилизации отработанного материала.
Заведующая лабораторией HLA-типирования
/Чумак А.А. /
Характеристика станции
Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Станция переливания крови имени О.К. Гаврилова» Департамента здравоохранения города Москвы является крупнейшим учреждением Службы крови Российской Федерации. Впервые в стране на Станции были освоены технология фракционирования белков донорской плазмы и производственный выпуск высокоэффективных лечебных препаратов.
Станция переливания крови с начала 40-х годов 20 века входила в состав ГКБ им.С.П. Боткина в качестве отделения переливания крови.
С 1952 года стало самостоятельным учреждением, подчиненным Горздравотделу – Станцией переливания крови города Москвы.
Главная задача Станции переливания крови Департамента Здравоохранения города Москвы – заготовка, переработка и выпуск в лечебную сеть города основного количества консервированной крови и препаратов крови для здравоохранения столицы (более 60%).
Важнейшие направления:
ü организация трансфузиологической помощи в лечебных учреждениях
ü систематическая работа по повышению квалификации сотрудников
ü организация занятий по вопросам изосерологии, серологии и клинической трансфузиологии для медицинского персонала
ü проведение семинаров и конференций.
ü пропаганда донорства
ü большое внимание уделяется профилактике посттрансфузионных осложнений.
Характеристика лаборатории HLA-типирования
Лаборатория HLA-типирования является структурным подразделением Станции переливания крови имени О.К. Гаврилова Департамента здравоохранения г. Москвы с 2013 года. С 2004 по 2013 год являлась подразделением Банка Стволовых Клеток.
Гистосовместимость важна в первую очередь для пересадки органов и тканей другому человеку. Чтобы избежать отторжения пересаженной ткани была разработана система генетического сходства у позвоночных животных и человека – главный комплекс гистосовместимости (MHC). У человека главный комплекс совместимости называется – человеческим лейкоцитарным антигеном (HLA).
Система HLA представляет собой индивидуальный набор различного типа белковых молекул, находящихся на поверхности клеток. Набор антигенов (HLA-статус) уникален для каждого человека.
Синтез белков HLA – системы определяется генами главного комплекса гистосовместимости, которые расположены на коротком плече 6-й хромосомы. Выделяют два основных класса генов главного комплекса гистосовместимости:
· I класс включает гены локусов А, В, С
· II класс представляет собой D-область (сублокусы DR, DP, DQ).
Антигены первого класса находятся на поверхности любых клеток
Антигены второго класса находятся на поверхности некоторых клеток иммунной системы (лимфоциты и макрофаги).
Для трансплантации ключевое значение имеет полная совместимость по HLA-DR.
HLA-типирование – это выявление разновидностей HLA у обследуемого. На сегодняшний момент используют два способа определения антигенов HLA:
1) Серологический метод - с помощью стандартных антител по их реакции «антиген-антитело» на клетках B и T-лимфоцитах.
2) Молекулярно-генетический метод – с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР).
В моей лаборатории используют молекулярно – генетический метод технологии генотипирования SSP и SSO.
Ø Технология SSP (Sequence Specific Primers) базируется на ПЦР с использованием аллель-специфических праймеров, «улавливающих» искомые HLA участки ДНК с последующей детекцией методом гель-электрофореза.
Ø Технология SSO (Sequence Specific Oligonucleotide) включает этапы ПЦР с последующей детекцией путем гибридизации ампликонов с олигонуклеотидными зондами.
Области применения HLA-диагностики:
w Трансплантация костного мозга
w Трансплантация органов
w Диагностика HLA-ассоциированных заболевании
w ЭКО диагностика совместимости родителей
w Фармакогенетика, выбор оптимальной химиотерапии
w Мониторинг предсуществующих HLA-антител
Основной задачей лаборатории является определение антигенов по системе HLA у пациентов с последующей интерпретацией результатов и передачей их лечащему врачу обследуемого.
Все реагенты для HLA-типирования хранятся в специальных холодильниках на -20 C0. Температура холодильников ежедневно отслеживается, а наблюдения вписываются в журнал контроля температур холодильных установок.
Лаборатория HLA-типирования оснащена необходимыми приборами для определения антигенов HLA:
§ Станция NorDiag Arrow – для выделения ДНК
§ Термоциклеры S1000 Thermal Cycler и DNAEngine Peltier Thermal Cycler (для технологии SSP)
§ Мультиплексный проточный анализатор Luminex 200 (для технологии SSO)
§ Ячейки для электрофореза в агарозном геле (для технологии SSP)
§ Трансиллюминатор гельдокументирующая система DigiDoc-It (для технологии SSP)
§ Компьютерные программы и бумажные носители таблиц интерпретации
.
В лаборатории HLA-типирования работают: заведующая лабораторией, биолог, врачи КЛД, фельдшера-лаборанты, сестра-хозяйка, санитарки. Все сотрудники работают по принципу взаимозаменяемости в рамках своих профессиональных возможностей.
Я, Жеребьева Ольга Александровна, закончила в 2010 году закончила московский медицинский колледж №1 Департамента здравоохранения города Москвы по специальности «лабораторная диагностика». С сентября 2010 года работала в Банке Стволовых клеток, с 2013 года после слияния организаций работаю по настоящее время на Станции Переливания Крови. В ноябре 2014 года получила сертификат специалиста по специальности «лабораторная диагностика».
В мои обязанности входит:
1) Исследование крови иммуногематологическими и иммуногенетическими методами в соответствии с нормативной документацией по лабораторной диагностике и службе крови в соответствии с квалификационными требованиями и установленными нормами нагрузки.
2) Регистрация поступающего в лабораторию биологического материала
3) Проведение контроля качества поступивших реагентов методом SSP
4) Приготовление дезинфицирующего раствора
5) Проводить обслуживание приборов согласно установленному графику
6) Ведение документации, формирование архива