СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ………………………………………………………4
ВВЕДЕНИЕ ……………………………………………………………………….6
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………….…….10
1.1. Этиология, патогенез, клиника ОПГ-гестозов…….………………………10
1.2. Гормоны фетоплацентарного комплекса при физиологической и патологической беременности……………………………………….….……...12
1.3. Протеолитические ферменты плаценты при физиологической и патологической беременности ……………………………………….…….…..16
1.4. Пептидгидролазы плаценты……………………………..…………..….….20
1.4.1. Основные карбоксипептидазы …………………………..……..………..20
1.4.1.1. Карбоксипептидаза Н …………………………………………..………20
1.4.1.2 ФМСФ-ингибируемая карбоксипептидаза ….…………………….......22
1.5. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная система в плацентарной ткани при гестозах легкой степени тяжести…………..………24
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫИ МЕТОДЫИССЛЕДОВАНИЯ ………..…..........27
2.1. Материалы исследования ………………………………………………….28
2.1.1. Клинические группы…………………………………………………...…28
2.2. Методы исследования………………………………………….………..….28
2.2.1. Методы определения активности основных карбоксипептидаз...……..28
2.2.2. Метод определения активности каталазы……………………………….29
2.3. Метод определения активности церулоплазмина………………………...30
2.2.4. Метод определения уровня диеновых и триеновых конъюгатов…...…30
2.2.5.Метод определения уровня гидроперекисей…………………………….31
2.2.6. Статистическая обработка результатов исследования ………………...31
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫИССЛЕДОВАНИЯ ………………………………..33
3.1. Активность КПН и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы плацентарной ткани в норме и при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести…………………………………………………………………………...33
3.2. Исследование активности антиоксидантной системы и показателей перекисного окисления липидов в плацентарной ткани в норме и при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести………………………………………….…….35
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ …………………………….……39
ВЫВОДЫ………………………………………………………………………..43
ЛИТЕРАТУРА …………………………………………………………………..44
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АОА – антиоксидантная активность
АОС – антиоксидантная система
АП – аминопептидаза
АПМЯК – аминопропилмеркаптоянтарная кислота
ГПЯК – гуанидинопропилянтарная кислота
Гт-Рг – гонадотропин-релизинг гормон
ГЭМЯК – гуанидиноэтилмеркаптоянтарная кислота
КП – карбоксипептидаза
ККС – калликреин-кининовая система
Кр – кортизол
КТРФ – кортикотропин-релизинг фактор
ЛАП - лейцинаминопептидаза
ЛГ – лютеинизирующий гормон
НЭП – нейтральная эндопептидаза
ОПГ – отеки, протеинурия, гипертензия
ОФБ – острофазовые белки
Пг – прогестерон
ПЛ – плацентарный лактоген
ПН – плацентарная недостаточность
ПОЛ – перекисное окисление липидов
Прл – пролактин
ПХМБ – п-хлормеркурийбензоат
ПХМФС - п-хлормеркурийфенилсульфонат
РАС – ренин-ангиотензиновая система
СДГ – сукцинатдегидрогеназа
СЭИ – синдром эндогенной интоксикации
ТЩФ – термостабильная щелочная фосфатаза
ФМСФ – фенилметилсульфонилфторид
ФПК – фетоплацентарный комплекс
ФПН – фетоплацентарная недостаточность
ХАКТГ – хорионический адренокортикотропный гормон
ХГЧ – хорионический гонадотропин человека
ВВЕДЕНИЕ
Несмотря на многочисленные исследования, проблема ОПГ(отек, протеинурия, гипертензия)-гестозов остается актуальной. Среди причин материнской смертности 20-25% случаев приходится на долю позднего гестоза, а перинатальная смертность при этом заболевании в 3-4 раза превышает среднюю.
Высокая частота гестоза, тяжесть его клинических проявлений, большая вероятность неблагоприятного исхода беременности при этом осложнении для матери и плода обусловливают повышенный интерес к исследованию патогенетических механизмов данной патологии. Изменения, происходящие в организме женщины при гестозе, изучены намного лучше, чем их причина. Их основу составляет спазм всех кровеносных сосудов, уменьшение объема циркулирующей крови, изменение свертываемости и текучести крови, нарушение микроциркуляции. Всё это приводит к значительному снижению кровоснабжения тканей с развитием в них дистрофических изменений вплоть до гибели ткани. Органами, наиболее чувствительными к недостатку кровоснабжения, являются почки, печень и головной мозг. Плацента, большей частью, состоящая из сосудов, претерпевших характерные для гестоза изменения, не справляется со своей основной функцией обеспечения обмена кислородом и питательными веществами между матерью и плодом, что становится причиной формирования фетоплацентарной недостаточности, которая ведет к хронической внутриутробной гипоксии плода и задержки его развития [40, 45, 53].
В условиях патологии уровень пептидов фетоплацентарного комплекса (ФПК) существенно меняется, при этом они вовлекаются в патогенез ОПГ-гестоза.
Изменение уровня биологически активных пептидов в ФПК при физиологическом и патологическом течении беременности во многом определяется ферментами их обмена, к которым, в частности, относится карбоксипептидаза Н (КПН). Данный фермент участвует в процессинге, следовательно, представляет интерес изучение его активности в плаценте в норме и при ОПГ-гестозе. Недавно в лаборатории ПГПУ в головном мозге была открыта фенилметилсульфонилфторид-ингибируемая карбоксипептидаза (ФМСФ-КП), физико-химические свойства, субстратная специфичность и тканевая локализация, которой позволяют предположить ее участие в процессинге пептидов [11, 12, 13, 14].
В патогенезе ОПГ-гестозов одно из ведущих мест занимает усиление перекисного окисления липидов (ПОЛ) и белков клеточных мембран на фоне снижения антиоксидантной активности (АОА), в частности угнетением активности системы церулоплазмин-трансферрин, которые в норме обезвреживают токсичные продукты метаболизма, образующиеся при ПОЛ [].
Известно, что КПН и ФМСФ-КП представлена во всех органах и тканях как в растворимой, так и в мембраносвязанной формах [дисс-34, 131, 148, 198, 265-ж]. Вероятно, продукты перекисного окисления липидов и белков могут влиять на активность данных ферментов в плацентарной ткани.
Таким образом, исследование активности карбоксипептидазы Н, фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы в плацентарной ткани при физиологическом и патологическом течении беременности может способствовать уточнению биологической роли этих ферментов в фетоплацентарном комплексе, а также выяснению механизмов функционирования пептидэргических систем в норме и при осложнениях гестационного процесса. Результаты исследований могут быть использованы при разработке методов коррекции метаболических нарушений в фетоплацентарной системе.
В литературе мало уделяется внимание исследованию патогенетических механизмов при гестозах легкой степени тяжести.
Целью настоящей работы было изучение роли основных карбоксипептидаз (карбоксипептидазы Н, фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы) в патогенезе ОПГ-гестозов легкой степени тяжести, а также оценить взаимосвязи активности ферментов с антиоксидантным статусом и показателями перекисного окисления липидов в плаценте при данной патологии.
При выполнении работы были поставлены следующие задачи:
1. Изучить активность основных карбоксипептидаз (карбоксипептидазы Н, фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы) в плацентарной ткани при физиологическом течении беременности.
2. Изучить активность основных карбоксипептидаз (карбоксипептидазы Н, фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы) в плацентарной ткани при ОПГ-гестозах легкой степени тяжести.
3. Исследовать антиоксидантный статус – активность каталазы и церулоплазмина – в плацентарной ткани при ОПГ-гестозах легкой степени тяжести.
4. Изучить показатели перекисного окисления липидов – уровня диеновых и триеновых конъюгатов, гидроперекисей липидов в плацентарной ткани при ОПГ-гестозах легкой степени тяжести.
5. Исследовать корреляционные взаимосвязи между активностью ферментов в плацентарной ткани в норме и при патологии.
6. Исследовать корреляционные взаимосвязи активности основных карбоксипептидаз с показателями перекисного окисления липидов и антиоксидантного статуса в плацентарной ткани.
Научная новизна и практическая ценность работы. Изучена активность основных карбоксипептидаз (карбоксипептидазы Н, фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы) в плацентарной ткани при ОПГ-гестозах легкой степени тяжести. Установлены корреляционные взаимосвязи между активностью ферментов в норме и при патологии, а также выявлены корреляционные взаимосвязи между активностью карбоксипептидаз и показателями антиоксидантного статуса и перекисного окисления липидов плаценты.
Полученные результаты представляют интерес для понимания роли карбоксипептидаз плаценты в норме, а также при ОПГ-гестозах легкой степени тяжести и могут быть использованы для разработки эффективных методов профилактики и коррекции нарушений метаболизма в фетоплацентарной системе в условиях патологии.
Апробация работы. Материалы данной работы представлены на научно-практической конференции студентов ПГПУ.
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ