Оценка иммунного статуса предполагает двухэтапное (или двухуровневое) обследование.
I уровень - иммунологический скрининг (мониторинг) - включает в себя определние общего количества лейкоцитов, относительного и абсолютного количества лимфоцитов и других форменных элементов крови, общего количества (относительного и абсолютного) Т- и В-лимфоцитов, концентрации IgM, IgG, IgA и проведение теста на фагоцитоз (например, НСТ-тест с нейтрофилами или оценку поглотительной активности нейтрофилов).
II уровень - аналитический, включает определение мембраных маркеров тех или иных субпопуляций лимфоцитов и лейкоцитов, оценку функциональной активности иммунокомпетентных клеток в связи с воздействием митогенов, антигенов; исследование продукции цитокинов в культуре клеток; оценку рецепторного аппарата клеток; субклассов иммуноглобулинов; анализ общего и антигенспецифического IgE; анализ на наличие тех или иных антител; проведение кожных проб с антигенами и др.
Тесты I уровня просты, экономичны, не требуют сложного лабораторного оборудования, отражают неспецифические закономерности реакций иммунной системы, позволяют выявлять достаточно грубые дефекты иммунной системы и судить о типичных иммунопатологических процессах. Тесты II уровня - это более детальное и углубленное исследование параметров иммунной системы. II уровень иммунологических исследований требует развертывания специальной лаборатории, предполагает высокую квалификацию врача-лаборанта и наличие материальной базы. Аналитические тесты II уровня назначаются избирательно в зависимости от клинических симптомов конкретного пациента.
Двухуровненвое исследование иммунного статуса предполагает оценку следующих параметров -
I уровень:
- абсолютное и относительное количество лейкоцитов;
· абсолютное и относительное количество лимфоцитов;
· абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов (CD3+, проточная цитометрия);
· абсолютное и относительное количество В-лимфоцитов (СD19+, CD22+-, проточная цитометрия);
· концентрация IgG, IgM, IgA (радиальная иммунодиффузия);
· фагоцитоз частиц латекса (фагоцитарный показатель, поглотительная активность);
· микробицидная активность кислородозависимых систем нейтрофилов (НСТ -тест);
· уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК, преципитация с ПЭГ-6000);
· общая активность комплемента (по 50% гемолизу сенсибилизированных БЭР).
II уровень:
· Т-лимфоциты (CD3+, проточная цитометрия);
· Т-хелперы (CD4+, проточная цитометрия);
· Т-цитотоксические (СD8+, проточная цитометрия);
· В-лимфоциты (СD19+, CD22+-, СD72+, проточная цитометрия);
· NK- лимфоциты (СD16+, CD56+, проточная цитометрия);
· моноциты (CD14+, проточная цитометрия);
· Ig E (ИФА);
· антитела к тиреоглобулину (ИФА);
· ревматоидный фактор (ИФА);
· пролиферативный ответ Т- и В- лимфоцитов на митогены
· компоненты комплемента (С1, С3 и др., ИФА)
· цитокины (IL1,IL4, IL5 и др., ИФА).
2.2. Методы оценки параметров иммунного статуса.
Т-лимфоциты (CD3+-клетки).
Современными методами оценки содержания Т-лимфоцитов и других субпопуляций иммунокомпетентных клеток являются методы, основанные на использовании моноклональных антител к CD-маркерам (лимфоцитотоксический тест, иммунофлуоресцентный тест, проточная цитометрия). Общим Т-клеточным маркером является CD3-антиген, популяцию хелперных клеток определяют с использованием CD4-моноклональных антител, цитотоксические Т-клетки маркируют CD8-моноклональными антителами.
Норма:
- относительное содержание CD3+- (65-79) %,
- абсолютное содержание (1100 – 1700) кл/мкл или (1,1 – 1,7) × 10 9/л
Причины повышения содержания Т-лимфоцитов:
1. Лимфопролиферативные заболевания.
2. Реакции гиперчувствительности замедленного типа - ГЗТ.
3. Реконвалесценция (выздоровление).
Причины снижения содержанияТ-лимфоцитов :
1. Вирусные, грибковые, паразитарные хронические инфекции
2.Опухоли
3. Стресс
4. Травма
5. Ожоги
6. Кровоизлияния
7. Некоторые формы аллергии.
Норма CD4+-клеток (Т-хелперы):
- относительное содержание 39 - 50 %,
- абсолютное содержание 600 - 1000 кл/мкл или 0,6 - 1,0 ∙ 10 9/л
Причины повышения содержания Т-хелперов:
1. Инфекция.
2. Аллергия.
3. Аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, ревматоидный артрит, васкулиты, гемолитическая анемия, аутоиммунные гломерулонефриты и др.).
Причины снижения содержания Т-хелперов:
1. Иммунодефицитные состояния.
2. СПИД.
3. Цитомегаловирусная инфекция.
В-лимфоциты ( CD19+-клетки).
Для выделения В-лимфоцитов из общей популяции лимфоцитов используют моноклональные антитела CD19, 21, 22, 23, 72, 79.
Норма:
- относительное содержание 3 - 15 %;
- абсолютное содержание 40 - 400 кл/мкл или 0,04 - 0,4 ∙ 10 9/л.
Причины повышения содержания В-лимфоцитов:
1. Бактериальные инфекции.
2. Аутоиммунные заболевания.
3. Аллергические заболевания.
4. Лимфолейкозы.
5. Миеломная болезнь.
Причины снижения содержания В-лимфоцитов:
1.Недостаточность гуморального иммунитета.
2. Опухоли.