Для диагностики вирусных болезней в ветеринарной практике применяются различные серологические реакции: РСК, РЗГА, РН (реакция нейтрализации вируса), РДП (реакция диффузной преципитации) и другие. В основе их лежит способность антител, находящихся в сыворотке крови, реагировать со специфическими антигенами вирусов. Следовательно, для постановки любой серологической реакции обязательными компонентами являются антиген и антитело.
Антитела образуются в организме животных клетками лимфоидной ткани (В-лимфоцитами) на введение (при иммунизации) или попадание (при заражении) какого-либо антигена и накапливаются, как в депо, в сыворотке крови. Антитела выполняют защитную роль, как фактор специфической защиты организма.
По химической природе антитела являются белками, специфическими иммунными глобулинами (иммуноглобулины пяти классов) и содержатся преимущественно в гамма-глобулиновой фракции крови.
В зависимости от вида серологических реакций антитела, участвующие в них, называют по разному: в РСК - комплементсвязывающие; в РДП - преципитирующие (преципитины); в РН - вируснейтрализующие антитела; в РЗГА - антигемагглютицины и т.д.
Такое разнообразие антител объясняется различием антигенной структуры вирусов. В составе вирусов содержатся различные антигены, которые стимулируют выработку различных по действию антител.
Антигены - это вещества белковой природы, которые при попадании (или введении) в организм парэнтеральным путем (т. е. минуя желудочно-кишечный тракт) вызывают образование антител. С образовавшимися антителами антигены могут вступать в реакцию (специфическое взаимодействие) как в организме животного, так и вне организма (ин витро, в пробирке), что и используется при постановке реакций. В результате такого взаимодействия происходит обезвреживание свойств антигена (вируса). Так, обезвреживание инфекционных свойств антигена (вируса) мы устанавливаем в реакции нейтрализации вируса, гемагглю- тинирующие свойства - в реакции задержки (торможения) гемагглютинации и т. д.
Вирусы содержат различные белки, отличающиеся друг от друга не только по строению, физико-биохимическим свойствам, но и по антигенности. По белковому составу, а, следовательно, и по антигеннос- ти вирусы не одинаковы, что и используется при их серологической дифференциации и идентификации. Так, вирус гриппа имеет 5 разных антигенов: нейраминидазу, гемагглютинин, S-антиген и два малоизученных антигена. Вирус ящура содержит ^антигена, вирус чумы КРС имеет преципитирующий и комплементсвязывающий антигены.
В зависимости от применяемых серологических реакций антигены, участвующие в них, называются, так же как и антитела, по разному: в РСК - комплементсвязывающий антиген, в РН - антиген, вызывающий образование вируснейтрализующих антител, в РДП - преципитирующий антиген (преципитиноген), в РЗГА и РГА - гемагглютини- рующий антиген (гемагглютинин) и т.д.
Антигены у различных групп вирусов строго специфичны и могут реагировать только с соответствующими антителами. У вирусов, входящих в одну группу, некоторые антигены могут быть общими для всей группы (группоспецифические), другие антигены являются специфичными только для одного какого-либо штамма данной группы (штам- мо-специфические).
При постановке серологических реакций выявление антител или антигена основано на принципе специфичности их взаимодействия, т. е. антигены взаимодействуют только со специфическими антителами и наоборот. Поэтому в серологических реакциях один из этих компонентов (антиген-вирус, или антитело) должен быть заранее известным и по нему определяют второй (неизвестный в реакции) компонент. В связи с этим серологические реакции могут быть поставлены в двух вариантах:
а) с известными иммунными или гипериммунными сыворотками (диагностические сыворотки) для определения (идентификации и типизации) вирусов, выделенных из исследуемого патологического материала;
б) с известными антигенами (диагностикумами) для обнаружения антител и определения их количества в присылаемых для исследования сыворотках крови, взятых от больных и переболевших животных. С помощью серологических реакций можно установить сроки появления в крови антител у вакцинированных животных и выявить динамику антителообразования.
В качестве антигенов при постановке серологических реакций применяют:
а) надосадочную жидкость из суспензий органов, содержащих вирусы, после многократных замораживаний и размораживаний с последующим центрифугированием;
б) культуральную жидкость из зараженных культур тканей;
в) материал (суспензия оболочек или куриного эмбриона, жидкости из полостей) из зараженных куриных эмбрионов;
г) содержимое афт, пустул, истечения и смывы из носа и других полостей, жидкости из полостей организма и т. д.
Антигеном может быть живой (нативный) вирус или обезвреженный (инактивированный, убитый) вирус. Иногда для повышения качества и специфичности серологических реакций предварительно проводят очистку и концентрацию антигена (вируса).