Скарлатиноподобная форма наблюдается у 20-25% больных. Для нее характерны лихорадка, описанный выше сыпь, симптомы отвороты, носков, перчаток, гиперемия зева, малиновый язык, боль в горле, как правило, без налетов на миндалинах. Обострения и рецидивы возникают редко.
Артральгичная (суставная) форма
У больных этой формой псевдотуберкулеза на фоне других симптомов болезни (лихорадка, сыпь, возможны признаки поражения ЖКТ, печени) преобладают симптомы поражения суставов в виде артральгии, реже - полиартрита с припухлостью, болезненностью.
Желтушная форма
Желтушная форма характеризуется синдромом паренхиматозного гепатита. Наблюдается иктеричность кожи и слизистых оболочек, увеличение печени, гипербилирубинемия, умеренное повышение уровня аминотрансфераз в сыворотке крови. У некоторых больных гепатитом протекает со значительным нарушением функций печени, изредка может проявляться даже подострый гепатонекроз. В большинстве случаев наблюдаются лихорадка, сыпь и другие симптомы псевдотуберкулеза.
Процесс может охватывать желчевыделительную систему, что проявляется соответствующей клиникой, симптомами Мерфи, Ортнера и др.
Катаральная форма
Катаральная форма характеризуется кашлем, насморком, гиперемию зева. Интоксикация умеренная, температура обычно субфебрильная. Признаков поражения внутренних органов, сыпи почти не наблюдается. Выздоровление наступает в течение 2-6 дней. В связи с отсутствием характерных симптомов эту форму выявляют редко, диагноз устанавливают на основании данных серологического и бактериологического исследований.
Генерализованная форма
Генерализованная форма - это наиболее тяжелая форма болезни; характеризуется высокой температурой тела, выраженной интоксикацией, поражением различных органов и систем, иногда менингеальными и очаговыми симптомами поражения ЦНС, длительным рецидивирующим течением. При этой форме псевдотуберкулеза трудно выделить основной синдром, так как имеют место симптомы основных клинических форм болезни, прежде всего сыпь, желтуха, поражения ЖКТ, суставов. Летальность от псевдотуберкулеза обусловлена именно этой формой болезни. Наблюдается генерализованная форма редко (2-3%)
26. Микробиологическая диагностика псевдотуберкулёза.
Материалом для исследования служит кровь, пунктат с лимфатических узлов, смывы из носоглотки, мокрота, рвотные массы, кал, моча, желчь.
Бактериологическое исследование
Первичную бактериоскопию можно использовать только при исследовании пунктатов лимфоузлов или органов от трупа. Мазки-отпечатки лучше окрашивать по Граму и Романовскому-Гимзе. Этот метод самостоятельного диагностического значения не имеет и является вспомогательным. Он ориентирует бактериолога на выбор питательных сред. Посевы исследуемых материалов делают на среду Эндо и Серова (100 мл 1% ПВ, 1 мл индикатора фенолрот, 0,75 г глюкозы, рН 7,4-7,6) инкубируют при 37 ° С 48-72 час. Посевы на среду Серова выдерживают 15-20 суток в холодильнике с последующим посевом на дифференциальные среды. Подозрительные колонии мелкие, круглые, выпуклые, бесцветные исследуют микроскопически и пересевают на среду Олькеницького. Колонии Y. pseudotuberculosis в R-форме почти такие же, как у возбудителя чумы, но в своем развитии не имеют стадии "битого стекла". Идентифицируют культуры по обычной схеме (посев на среду Гисса, фаголизис, определения серотипов с помощью диагностических аглютину действующих сывороток). Дифференциацию с другими иерсинии проводят по дополнительным тестам.
Серологическая диагностика
Для серологической диагностики псевдотуберкулеза ставят развернутую объемную реакцию агглютинации (подобно реакции Видаля) с соответствующими диагностикумами. Антитела в крови больных накапливаются на второй неделе болезни. Диагностический титр 1:200 и выше. Еще лучшие результаты дает постановка РНГА с антигенным эритроцитарным диагностикумом. Положительной эту реакцию считают при титре антител 1:400 и выше. Разработана также схема постановки реакции ензиммичених антител с использованием полистирилових планшет с адсорбированным на твердой фазе антигеном.
Биологическа проба
Биологическую пробу лучше проводить на гвинейских свинках, так иерсинии, выделенные от человека, мало патогенные для мышей. Зараженные свинки погибают через 4-12 дней. У животных исследуют мазки - отпечатки из органов и делают посевы на питательные среды с последующей идентификацией выделенных культур.
Аллергическая проба
Аллергическую пробу ставят, начиная со второй недели заболевания. Состояние сенсибилизации развивается с 7-20-го дня и сохраняется в течение 2-5 лет. Аллерген вводят внутрикожно в объеме 0,1 мл. Учет реакции проводят через 48 часов. При положительной пробе возникает покраснение и инфильтрат, которые порой чешутся и болезненны.
27. Микробиологическая диагностика кишечного иерсиниоза.
(1) основной - бактериологический, посев на среды Эндо, Левина при 25-28о С,
(2) экспрессный - ИФА,
(3) серологический - РА и РНГА (на парных сыворотках).
Материалом для исследования служат испражнения, моча,кровь, спинномозговая жидкость.
С целью выделения антигенов возбудителя, что обеспечивает раннюю диагностику иерсиниоза, используют метод флюоресцирующий антитела, реакцию торможения непрямой гемагглютинации (РГНГА), реакцию коаглютинации и реакцию агглютинации латекса.
РГНГА по чувствительности близка к ИФА, превосходит по этому показателю РСК и вероятно по воссозданию результатов. Считают, что диагностическим является разведение сыворотки крови 1: 200, но диагностическая ценность метода возрастает при увеличении титра в динамике. Диагностическая ценность метода приближается к 100%.
Для реакции агглютинации используют живые культуры или формализацию препаратов как антигенов, реакция становится положительной с 10-14-х суток болезни. Возможны неспецифические результаты исследования.
Внедрение ИФА позволяет с высокой специфичностью и чувствительностью распознавать иерсиниоз. Специфичность теста составляет 95%, чувствительность — 82%. Наиболее информативными современными методами являются ПЦР и иммуноблоттинг, однако их воспроизводимость возможна только в специализированных лабораториях.
28. Морфобиологические св-ва возбудителей кампилобактериоза и хеликобактериоза. Микробиологическая диагностика заболеваний.
Род Campylobacter (Campyla - изогнутые) относится к группе аэробных или микроаэрофильных подвижных спирально изогнутых грамотрицательных бактерий. Наибольшее значение в патологии человека имеет С. jejunii. Реже встречаются С. fetus и С. coli. Ранее отнесенный к данному роду С. pylori выделен в род Helicobacter.
Тонкие вибриоидные клетки, имеющие один или более витков спирали. Споры не образуют. Подвижные, совершают характерное винтовое движение с помощью одиночных жгутиков, расположенных на одном или обоих частях клетки. Хемоорганотрофы не требовательны к питательному субстрату, не сбраживают углеводы. Для получения энергии используют аминокислоты, а не углеводы. Оксидазоположительные и уреазоотрицательные. Пигментов не образуют.
Кампилобактеры содержат О-, К- и Н-антигены. В настоящее время выделено свыше 50 О-серогрупп кампилобактеров.
К факторам вирулентности относят жгутики и муциназу, способствующие проникновению в слизистую оболочку тонкой кишки. Обладают умеренной пенетрационной активностью. Их токсичность связана с секрецией энтеротоксинов (функциональные блокаторы), нарушающими водно-солевой обмен через образование цАМФ, аналогично энтеротоксинам Е. coli и V. cholerae. При разрушении кампилобактеров освобождается эндотоксин. Описаны цитотоксины, вызывающие гибель чувствительных клеток. После колонизации участка тонкой кишки они могут проникнуть в кровяное русло, вызывая генерализованную инфекцию, чаще у иммунодефицитных лиц. В патогенезе кампилобактериозных энтеритов преобладают явления диареи или дизентериеподобных состояний. При этом С. jejunii и С. fetus вызывают энтериты у людей. С. jejunii встречается также при абортах овец. С.fetus чаще встречается у пожилых людей с иммунодефицитами, а также при некишечных формах кампилобактериоза, вызывая поражение паренхиматозных органов и даже сепсис.
При кампилобактериозе наблюдается гуморальный иммунный ответ. Однако образующиеся антитела не обладают выраженными протективными свойствами.
Источником инфекции являются больные животные и люди, от которых кампилобактеры попадают в пищевые продукты (мясо, молоко) и воду. Передача инфекции происходит алиментарным путем. Возможен и контактно-бытовой путь. В окружающей среде при 4°-10°С сохраняются около недели. Зарегистрированы пищевые, молочные и водные вспышки кампи-лобактериоза, чаще у детей.
Род Helicobacter
H.pylori представляют собой мелкие грамотрицательные палочки, лофотрихи, микроаэрофилы. Растут на сложных питательных средах. Продуцируют каталазу и оксидазу, которые используют для идентификации этих бактерий.
К факторам вирулентности хеликобактеров относят их способность к движению и участие в проникновении в слизистую оболочку. Фермент уреаза при разрушении мочевины до аммиака и СO2 приводит к образованию газовой оболочки, защищающей от кишечного сока. Хеликобактеры продуцируют фосфолипазы, разрушающие фосфолипиды. Их токсичность связана с цитотоксином, действующим на эпителиальные клетки, токсином, нарушающим межклеточные контакты, и с ЛПС. Кроме того, на поверхности клеток образуются белки теплового шока, которые рассматривают как реакцию на стресс. Это приводит к аутоиммунному воспалению и образованию язв в желудке и двенадцатиперстной кишке. Н. pylori выделяются в 80% случаев язвенных гастритов.
Является представителем нормальной микрофлоры животных. Пути передачи человеку окончательно не выяснены. По-видимому, люди заражаются алиментарным путем.
Инфекционные заболевания, которые вызывают бактерии рода Campylobacter, получили общее название кампилобактериозы. Они имеют острое течение, сопровождающиеся лихорадкой, поражением желудка и кишечника и с каждым годом встречаются все чаще. Среди 13 видов кампилобактерий главнейшими являются: Campylobacter jejuni, C.coli.
В 1991 p. выделен отдельный вид Helicobacter pylori. Его стабильно обнаруживают у больных язвой желудка, гастрит и дуоденит. Этим заболеванием дали общее название геликобактериоза. Кроме энтеритов и энтероколитов, этих частых кампилобактериоз, значительно реже встречаются септицемии, эндокардиты, перикардиты, менингиты, поражения мочеполовой системы. У беременных женщин возможны аборты, преждевременные роды, инфицирование новорожденных во время родов. В связи с тем, что клиническая картина этих заболеваний не имеет характерных симптомов и подобная вызванных другими бактериями, лабораторные исследования приобретают важное значение.
Для диагностики широко используют микроскопический, бактериологический и несколько меньше серологический методы.Материал ом для исследования служит кровь, ликвор, стул или содержимое прямой кишки, взятый с помощью ректальных тампонов, плацентарная и околоплодной жидкости, содержимое абсцессов, биоптаты слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки. Исследуют также воду, молоко, другие продукты питания, смывы с предметов и т.п..
Бактериоскопический метод используется для быстрой идентификации кампило-и геликобактерий. Тонкие мазки из фекалий и других клинических материалов фиксируют на огне, окрашивают фуксином Пфейфера течение 10-20 с и промывают водой. Поскольку для окраски других бактерий требуется 3-5 мин, то в течение 10-20 сек успевают зафарбуватись только кампилобактерии. Особенно четко их типовые формы обнаруживают при окраске кристаллическим фиолетовым. Под обычным световым микроскопом они выглядят как тонкие, спирально изогнутые бактерии, имеющие один полный завиток, С-и S-образную форму или напоминают крылья чайки. Helicobacter pylori имеет несколько большие размеры. Можно также использовать фазово-контрастную микроскопию суспензии стула в бульоне для культивирования бруцелл или жидкой среде Мюллера-Хинтон (МПБ с крахмалом и казеином). При этом выявляют не только типичные особенности морфологии кампилобактерий, но и очень характерную их подвижность.