Пурина спасательного путь биосинтеза

Как и все паразитических простейших и многих внутриклеточных патогенов, Т. гондий неспособна де Novo нуклеотидов биосинтеза пуринов. Он опирается на гаражи пути-пути для пуриновых нуклеотидов, которые необходимы для роста паразита и выживаемости (Perrotto и др, 1971;. Шварцман и Pfefferkorn, 1982;. Krug и др, 1989; Ульман и Картер, 1995). Иллюстрация

T. гондий тахизоит пурин-спасательный путь показан на рисунке 8.6. Т. гондий, как полагают, имеют шесть активность ферментов, которые участвуют в спасении пуриновых нуклеозидов и нуклеотидов: аденин Аденозиндеминазный (EC 3.5.4.2), АДЕНОЗИНДЕЗАМИНАЗЫ(EC 3.5.4.4), инозин фосфорилаз (EC 2.4.2.1), гуано -sine фосфорилазы (ЕС 2.4.2.15), аденозин-киназы (АК, КФ 2.7.1.20) и гипоксантин-ксантин-гуанин фосфорибозилтрансферазы (HXGPRTase, КФ 2.4.2.8) (Chaudhary и др., 2004). Нет детальные исследования для свойств пуриновых нуклеозидов Аденозиндеминазного, пуриновое основание Аденозиндеминазного не поступали. Ген аденина Аденозиндеминазного, но не для аденозиндезаминазы был идентифицирован в гондий генома T. (Chaudhary и др., 2004). Пуриннуклеозидфосфорилазу был охарактеризован как обладающий активностью в отношении инозина и гуанозина,

198 БИОХИМИЯ И ОБМЕН токсоплазма

Рисунок 8.6 Т. гондий пурин спасти биосинтетические пути. Сплошные линии представляют собой действие или ферментные геном, которые были обнаружены у Т. гондия; короткая пунктирная линия представляет собой деятельность адено-синус Аденозиндеминазный, существование которых сильно подозревала. Сокращения, используемые в следующем: Ade, аденин; Адо, аденозин; Ино, инозин; Го, гуанозин; Гуа, гуанин; Hyp, гипоксантин; Xan, ксантин. Активность ферментов пронумерованы следующим образом; (1) аденин деаминаза, (2) аденозиндезаминаза, (3) инозин фосфорилаза, (4) гуано-синусоидальной фосфорилаза, (5) аденозин-киназа (АК),

(6) гипоксантин-ксантин-гуанин-phosphoribo syltransferase (HXGPRTase).

АК и HXGPRTase широко шпилька СВА на молекулярном уровне, в том числе кристаллических анализов струк-турных (Donald и др, 1996;. Шумахер и др, 1996, 2000;. Дарлинг и др, 1999;.. Heroux и др, 1999a, 1999b;. Уайт и др, 2000). Ни АК, ни HXGPRTase не имеет важное значение для Т. Gondii выживания, поскольку тахизоиты может выжить ликвидации либо только Activ-Ity (Donald и др, 1996;.. Sullivan и др, 1999;. Чаудхари и др, 2004). Поколение двойной нокаут-мутанта как АК и HXGPRTase невозможно, предполагая, что Т. гондий вмещает только эти два маршрута пуриновых спасения (Chaudhary и др., 2004). Эта ситуация не является общим для всех apicomplexan паразитов, как это описано в главе 19. Например, Криптоспоридия имеет АК, но не хватает HXGPRTase (Striepen и др., 2004), и плазмодий имеет HXGPRTase (Vasanthakumar и др.,

Т. гондий АК представляет собой мономерный белок с молекулярной массой 39,3 кДа, и долями менее чем на 30 процентов идентичности последовательности с AKs других организмов (Sullivan и др., 1999). Т. гондий А.К.

показывает строгую специфичность в отношении аденозина среди встречающихся в природе нуклеозидов, таких как инозин и гуанозин (Дарлинг и др., 1999).

Два изоферментов Т. гондий HXGPRTase были идентифицированы как предсказанный перевод продукты дифференциально сплайсинга мРНКа транскрибируется с одного гена (Donald и соавт., 1996). Кристалла струк-р из изоферментов-I являются тетрамерами, состоящий из четырех идентичных субъединиц (26,4 кДа) (Schumacher и др, 1996; Heroux. Др, 1999a.). Субъединица изофермента

II обладает дополнительными 49 аминокислотами, которые вставляются 7 аминокислот ниже по потоку от N-конца, а другая последовательность изофермента II является идентичным изоферментом I (Donald и др., 1996). Изофермент я преимущественно в цитозоле, в то время как изофермент II, локализуется в тахизоит внутренней мембраны комплекса, а также дополнительные 49 аминокислот последовательность изофермента II содержит сигнал мембранного таргетинга (Chaudhary и др., 2005). Эти два изофермента образуют heterotetramers при совместной экспрессии в E.coli (Уайт и др., 2000) или в тахизоит в естественных условиях (Chaudhary и др., 2005). Для мембранной ассоциации фермента, по меньшей мере, две субъединицы изофермент-II в тетрамера являются необхо-сары (Chaudhary и др., 2005). Там нет никакой разницы сущеста-косяка в кинетических свойствах между изоферментами, и не поняло, почему Т. гондий обладает два изоферментами HXGPRTase.

Аденозина транспортером в T.gondii, был идентифицирован, и наличие дополнительных путей perme-Ation для других пуриновых нуклеозидов, пуриновых оснований Т. гондий было предложено (Schwab и соавт., 1995;. Де-Конг и др, 2003), Ген Т. гондий аденозин переносчика клонировали и экспрессировали в Xenopus ооцитах Laevis (Чанг и др., 1999). Аденозин поглощение выраженной адено-синусоидальной переносчика ингибируется различными нуклеозидов, аналогов нуклеозидов, гипоксантин, гуанин и дипиридамола (Чанга и др., 1999), предполагая, что один транспортер может играть определенную роль во всех перевозках нуклеозидов и нуклеотидных оснований в тахизоит. Недавние исследования с использованием nitrobenzylth-ioinosine (ингибитор нуклеозида переносчика в клетках млекопитающих) и различных не-физиологические бета-L-энантиомеры пуриновых нуклеозидов демона-Strate, что Т.

субстратная специфичность в транспортировке пуриновых нуклеозидов (Al Safarialani и др., 2003). Там до сих пор нет единого мнения относительно того, как много транспортных систем для пуриновых нуклеозидов / нуклеотидные присутствуют в тахизоите.