Вездесущий штамм RH тип напрягает, и инфекция лишь несколько тахизоитов достаточно, чтобы убить мышь. Этот штамм, однако, значительно меньше, патогенные у других животных, таких как свиньи. Кроме того, засеянные тахизоиты не вызывают хроническую инфекцию у этих животных, что делает этот штамм полезен в качестве вакцинного штамма. Свиньи, которые могут питать огромную кисту нагрузку, считается основным источником инфекции для человека. Вакцинация свиней с использованием штамма RH защитой от заражения с постоянным напряжением, и сократить присутствие кист ткани в мясе. Когда вызов произошел в 220 дней после вакцинации, все vacci-свиньи NAT, отрицательным для кист ткани в мышиной био-анализа, тогда как все контрольные животные, вызов были положительными (Dubey и др., 1994).'нитро-N-нитрозогуанидин. Температурно-чувствительные мутанты были изолированы, из которых ТС-4 штамм демон-strated самых благоприятного фенотипа задержки роста при 37°С при поддержании иммуногенных-иого у млекопитающих (Pfefferkorn и Pfefferkorn, 1976). Мыши, вакцинированные тахизоитами TS-4 были защищены от летальной инфекции RH. В то время как вакцинация может также уменьшить врожденную передачу в модели беременности, формирование ткани кисты не было предотвращено после вакцинации с TS-4 и вызовом с авирулентным штаммом (McLeod и др., 1988).
Френкель и др. (1991) использовал аналогичную методику мутации и выбрал штамм, дефицитный в кокцидиях цикла паразита (половая реплика-ции в кишечнике кошки). В отличии от RH и TS-4, этот Т-263 штамм был производить кисты ткани в промежуточном хозяине. Тем не менее, он потерял
способность образовывать ооцист у кошек, которые поглощенные кисты ткани. Дефицит был связан с бесплодием микрогамет. Вакцинация молодых кошек с Т-263 bradyzoites может предотвратить ооцист пролил-динь в 80 процентов получателей, когда вызов с ооцист образующего штамма T. гондий. Такие эффекты не могут быть вызваны с помощью вакцинации только с живыми тахизоитов (Фрейр и др., 1993). Эти данные подтверждают, что bradyzoites и тахизоиты нести различные антигены, и иммунитет отличается между промежуточными и окончательными хостами, относящимся к интерфейсам, где инфекция происходит. Хотя коммерциализация штамма Т-263 в качестве вакцины для кошек считается, продукт никогда не был выпущен.
Затухание, сохраняя при этом иммуногенность, также может быть достигнута с помощью гамма-облучения, как было показано для многих различных организмов, ВКЛЮЧАЕТ-ки паразитов (например, в коммерческой вакциной легкого-червя; McKeand, 2000). Дозы менее 1000 Гр приводили к тахизоитам, которые могут вторгнуться в клетки, и, хотя они не могли повторить они еще способны индуцировать клеточный иммунный ответ и некоторую защиту (SEAH и HuCAL, 1975). Тем не менее, эффективность различаются-Ent дозах облучения отличались от исследования к исследованию (суммированы в Dubey, 1996). Ооцист штамма VEG не удалось вызвать хронические инфекции при облучении дозами выше 200 Гр (Dubey, 1996). Ооцисты, облученные 200 Гр могут вызвать частичную защиту у мышей против орального заражения, как измерены с помощью расширенного выживания и меньшего количества кист головного мозга. Это было еще раз подтверждено в более позднем эксперименте (Hiramoto и др., 2002). Тахизоиты (107) Облучают 200 Гр продлил время выживания мышей примерно на 4 дней, когда вызов с 1000 RH тахизоитов. Более важ-того, только уменьшить развитие кист ткани в головном мозге более чем в 10 раз, когда мышей заражали орально с 25 цистами ME49 ткани. Так как облученные тахизоиты не сохраняются и способны уменьшить количество цистой ткани, такой подход может иметь значение в разработке терапевтической вакцины.
В дополнение к индукции ослабленный Pheno типа путем химической мутации или облучением, последовательный проход штамма типа II также было показано,
730 ВАКЦИНАЦИЯ ПРОТИВ ТОКСОПЛАЗМОЗ: СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ
вызывают изменения, которые приводят к ослабленной Pheno типа. Эта методика была использована для разработки штамма S48, который теперь коммерчески применяется в качестве эффективной вакцины против абортов у овец (Buxton, 1993). Этот штамм был первоначально выделен из семядолей прерванного ягненка и пассированные два раза в неделю после этого через мышей в течение более чем 30 лет. Штамм, следовательно, утратил свою способность к образованию кист ткани любого животного чал-lenged, но сохранили свои иммуногенные характеристики (S48 описано более подробно ниже).
В заключении следует отметить, Т. гондии инфекция, как правило, способна индуцировать статус пожизненной защиты, который был бы идеальным, если первичная инфекция не имеет потенциала, чтобы повредить нервные ткани или помешать исходу беременности. Ослабленные вакцины могут иметь потенциал, чтобы вызвать аналогичную защиту природного первичной Infec-ции при отсутствии такой патологии. Предпочтительное затухание должно быть стабильным, и, таким образом, облучение не является особенно хорошим вариантом. Выбор достаточно ослабленные штаммы после мутагенного действия могут иметь потенциал для обеспечения стабильных вакцинных штаммов. Тем не менее, использование таких штаммов в ослабленным иммунитетом животных или людей должно быть ограничено. Новые обратные-генетические методы позволят специфическим гены должны быть удалены таким образом, что возврат к вирулентности может быть исключен (обсуждается ниже).
24.3.2.1 коммерческой вакцины против токсоплазмоза у овец и коз
Т. гондий обычно вызывает заболевание, когда заражение происходит в первый раз, в то время как животное находится в беременности, позволяя паразиту проникать в Неимунном плод. Однако животное, которое уже Иммунная до беременности, как правило, достаточно защищены, чтобы предотвратить инфекцию плода (McColgan и соавт, 1988;. Я.И., 1990). Действительно, в то время как естественная инфекция с Т. гондий у овец индуцированной ProTec-TIVE иммунитет (. McColgan и др, 1988), вакцинация инактивированными тахизоитов Toxoplasma не могли защитить беременных овец от инфекции (Беверли, 1971;. Wilkins и соавт, 1987), Это показано, что вакцинация с живыми Т. гондиями, но, возможно, не убили препарат, до беременности может предотвратить
Последующая гибель плода. Соответственно, «Инк-plete» S48 штамм был разработан в безопасную живую вакцину (Уилкинс и др., 1988). S48 был выделен в 1956 году из прерванного ягненка в Новой Зеландии. Так как на этот раз заранее датирует эпоху криоконсервации и культивировании тканей, она поддерживалась пассирования тахизоиты через мышей, два раза в неделю в течение 30 лет. В течение этого времени S48 утратил свою патогенность для овец, а также его способность образовывать цисты ткани (Wilkins и О'Коннелл, 1992). Мало того, что S48 утратил свою способность образовывать цисты ткани, она также не вызывает ооцист у кошек (Intervet, неопубликованные наблюдения). Безопасность штамма была доказана его отсутствие у любого животного из 4-х недель после вакцинации (Buxton, 1993). В 1988 году он был введен в качестве Toxovax, живой вакцины, в Новой Зеландии. Впоследствии,
Ovilis ™ Toxovax культура живой ткани выращивают вакцина, которая поставляется в виде замороженного продукта и распространяется конечным пользователям в 4°С. Вакцина применяется либо внутримышечно или подкожно, не позднее, чем за 3 недели до спаривания. Для того, чтобы демон-Strate эффективности вакцины, тем Moredun научно-исследовательский институт вместе с Интервут выполняется
a Серия вакцинации-вызов экспериментов (Buxton и соавт, 1991;. Бакстон и Иннес, 1995). Используя 2000 спорулированных ооцист штамма М3, они вызывали сильную инфекцию у беременной S48-вакцинированных и контрольных овец. В то время как менее 18 процентов ягнят от контрольных овец родились живыми и жизнеспособными, 80 процентов ягнят выжили в группе вакцинированных и их веса были сопоставимы с ягнятами из не оспаривается овцематок. Toxovax индуцировали ответ IgG антител, хотя эта реакция ослабла на 20 месяцев после вакцинации, в отличии от стойких инфекций, которые поддерживают высокие титры антител в крови
на протяжении всей жизни. Вакцинация S48 также индуцирует специфический CD4+ и CD8+ Т-клетки, которые продуцировали ИФНγкак описано для обычных живых тахизоят инфекции у овец (Бакстон и Innes, 1995). Дальнейшие исследования показали, что животные были еще Иммунными 18 месяцев после вакцинации, несмотря на их уровни антитела с ослабло, выделяя
| СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ Вакцины для промежуточных хозяевах |
способность S48, чтобы вызвать мощную адаптивную тип-1 клетки, опосредованную реакцию (Buxton, 1993). Полевые испытания в Великобритании показали экономическую рентабельность вакцинации против Т. гондий-индуцированного аборта у овец (Bos и Smith, 1993). Вакцинация S48 также показали умеренную эффективность в коз (Шартье и Mallereau, 2001).