i i) RBOK
� a) Стерильность и чистота
Испытания биологического материала на стерильность и отсутствие контаминации описаны в Главе 1.1.9.
Серия готового продукта состоит из флаконов с лиофилизированным препаратом, произведенным из вирусного материала, полученного в результате одного сбора; одна серия может включать несколько расфасованных партий. Содержимое одного контейнера из каждой расфасованной партии нейтрализуют с использованием кроличьей антисыворотки против чумы КРС путем смешивания разных разведений вируса с неразведенной противовирусной сывороткой, а затем вносят в культуры клеток почек теленка. Подлинность препарата считается подтвержденной при отсутствии ЦПЭ, специфичного для вируса чумы КРС.
� b) Безопасность и эффективность
Животных, которых используют в данных испытаниях, следует содержать отдельно от других животных, восприимчивых к чуме КРС. По завершении испытания животных умерщвляют, а туши уничтожают с соблюдением мер безопасности. В случае использования КРС, восприимчивого к чуме КРС, содержимое пяти произвольно выбранных флаконов объединяют и вводят одной голове КРС в объеме, эквивалентном 100 полевым дозам для КРС (при этом полевой дозой считают дозу 300 ТЦД50 и более), и трем головам КРС в объеме, эквивалентном однократной полевой дозе для КРС. В течение следующих 3 недель, животных содержат в тесном контакте с контактировавшими контрольными животными. В течение этого периода животным ежедневно проводят термометрию и регулярное клиническое обследование. В конце трехнедельного периода пробы от животных исследуют на присутствие нейтрализующих антител к чуме КРС в тесте на микропланшетах. Вакцина считается безопасной и эффективной, если она не индуцирует патологической клинической реакции, если у всех вакцинированных животных титр вирус-нейтрализующих антител составляет 1/10 или выше и если отсутствуют признаки передачи вакцинного вируса. Каждую партию вакцины также тестируют на безвредность на мелких животных.
В целом, безопасность вакцины RBOK подтверждена как у европейских, так и у индийских пород КРС, а также у карликовых западно-африканских пород скота. Вакцину не испытывали на японских или китайских породах скота, и ее безопасность у таких животных не подтверждена.
� c) Иммуногенность серии
Тесная взаимосвязь между иммунизирующей активностью и инфекционностью позволяет использовать последнюю в качестве основы для оценки иммуногенности. Титр инфекционной активности определяют с использованием клеток утвержденной перевиваемой линии или клеток, выращенных из каждой из трех почек от разных телят или эмбрионов КРС. Для первой титрации можно использовать пул из пяти флаконов, использованных в тесте на безопасность. Вторую и третью оценки производят на дополнительных пулах, каждый из которых состоит из трех флаконов с готовым продуктом. Чувствительность клеток, используемых на каждом этапе работы, определяют с помощью стандартного лабораторного препарата вируса чумы КРС. Конечный титр представляет собой геометрическое среднее значение трех оценок, каждая из которых произведена с использованием десятикратных разведений и десяти наблюдений на одно разведение. Иммуногенная вакцина должна содержать 100 полевых доз на один флакон.
i ii) LA-AKO
� a) Стерильность и чистота
Испытания биологического материала на стерильность и отсутствие контаминации описаны в Главе 1.1.9.
Серия готового продукта состоит из флаконов с лиофилизированным препаратом, произведенным из вирусного материала, полученного в результате одного сбора. Содержимое одного контейнера нейтрализуют с использованием кроличьей антисыворотки против чумы КРС путем смешивания разных разведений вируса с неразведенной противовирусной сывороткой, а затем вносят в культуры клеток почек и семенников теленка. В зараженных культурах клеток ЦПЭ должен отсутствовать.
� b) Безопасность и эффективность
Содержимое произвольно выбранного флакона вводят каждой из двух восприимчивых к чуме КРС коров породы японская черная в объеме, равном одной полевой дозе для КРС (полевая доза содержит 1000 и более ТЦД50). В течение следующих 2 недель животных содержат в виварии с обеспечением всех мер биозащиты. Во время этого периода термометрию животных проводят ежедневно, а клинический осмотр – регулярно. Пробы сыворотки от животных, отобранные спустя достаточное количество времени после вакцинации, исследуют на присутствие нейтрализующих антител к вирусу чумы КРС в культурах клеток Vero. Вакцина считается безопасной и эффективной, если она не вызывает развития патологической клинической реакции за исключением небольшого повышения температуры тела, и если титр нейтрализующих антител в пробах сыворотки от обоих вакцинированных животных в десять раз выше.
� c) Иммуногенность серии
Тесная взаимосвязь между иммунизирующей активностью и инфекционностью позволяет использовать последнюю в качестве основы для оценки иммуногенности. Титр инфекционной активности определяют с использованием того же метода, что и для готовой серии.