В нормальной моче содержится минимальное количество желчных кислот. При механической желтухе оно постоянно повышено; часто отмечается увеличение его и при паренхиматозной желтухе. При гемолитической желтухе количество желчных кислот не увеличено.
Проба № 18 Проба Петтенкофера
Необходимые реактивы
1.Раствор сахара.
2.Концентрированная серная кислота
Ход исследования
К 10 мл мочи прибавляют небольшое количество раствора сахара и взбалтывают до образования пены. После этого добавляют по каплям концентрированную серную кислоту.
При наличии желчных кислот пена становится пурпурно- красной.
Задания для контроля
1.Пигментный обмен в организме?
2.Какой билирубин выделяется из организма с мочой?
3.Перечислите основные формы желтух?
4.На чем основаны качественные реакции на обнаружение билирубина?
5.Какое клинико-диагностическое значение имеет определение желчных пигментов в моче?
Обнаружение гемоглобинурии и гематурии в моче
Клинические аспекты
Кровь в моче может быть представлена эритроцитами (синдром гематурии) или продуктами их распада (гемоглобинурия, гемосидеринурия). Кроме того, в моче могут присутствовать такие дериваты гемоглобина, как гематоидин, гемоси-дерин, метгемоглобин и сульфогемоглобин.
Моча на наличие эритроцитов и гемоглобина исследуется при макроскопическом и микроскопическом (цитологическом) анализе.
В моче здоровых людей обнаруживаются единичные эритроциты. При применении камерных методов при исследовании осадков мочи было установлено, что у практически здоровых люден в сутки выделяется до 1 миллиона эритроцитов (метод Каковского-Аддиса). При исследовании мочи по методу Нечипоренко в 1 мл осадка моче обнаруживают до 1000 эритроцитов, что соответствует 10 эритроцитам в камере Горяева (или 1 эритроциту в 1 мкл нецентрифугированной мочи). Это норма для детей и взрослых. Но при использовании в работе нецентрифугированной мочи в 1 мкл обнаружить 1 эритроцит не удается, реакция нормальной мочи на кровь на тест-полосках отрицательная.
Синдром гематурии
Микрогематурия. Цвет мочи не изменен, эритроциты обнаруживаются при микроскопии осадка мочи ориентировочным методом (1 и более эритроцитов в поле зрения). При исследовании мочи камерными методами обнаруживают более 1000 эритроцитов в 1 мл мочи или более 1 000 000 эритроцитов в сутки.
Макрогематурия проявляется специфической окраской мочи. Цвет мочи, в зависимости от количества эритроцитов, может быть розовым, красным, цветом «мясных помоев».
Гематурии делятся на почечные и внепочечные. Почечные гематурии делятся на функциональные и органические.
Функциональные гематурии
В раннем детском возрасте эритроциты в осадке мочи встречаются чаще и в большом количестве, что объясняется несостоятельностью почечного фильтра, его увеличенной проницаемостью. Это функциональные микрогематурии. Почки грудного ребенка реагируют на малейшее раздражение: удар, неосторожную пальпацию поясничной или брюшной области. При переохлаждении и перегревании микрогематурия обнаруживается и у взрослых. Функциональная микрогематурия отмечается при ортостатизме и гиперлордотизме в пубертатном периоде жизни ребенка.
Органические гематурии
При остром диффузном гломерулонефрите гематурия- основной симптом. Моча цвета «мясных помоев» (макрогематурия) появляется в первые дни заболевания. Эритроциты через пораженную воспалительным процессом стенку гломерулярных капилляров, базальную мембрану и подоциты проникают в первичную мочу.
При очаговом гломерулонефрите цвет мочи не изменен, а единичные в поле зрения эритроциты обнаруживаются только при микроскопическом исследовании осадка мочи. При прогрессировании у больных развивается протеинурия и гипертония диастолического типа. В осадке мочи цилиндры и клетки почечного эпителия. В период выздоровления эритроциты обычно исчезают из осадка мочи быстрее, чем нормализуются остальные симптомы заболевания, такие, как протеинурия. Исчезновение гематурии считается первым признаком наступающего выздоровления. Если в период выздоровления при микроскопическом исследовании осадка мочи обнаруживатся эритроциты, это прямой признак нестихающего гломерулита, симптом обозначается как «остаточная гематурия».
Хронические гломерулонефриты и нефрозы сопровождаются умеренной гематурией (микрогематурией). Появление при нефрозе более выраженной гематурии свидетельствует о присоединении воспаления клубочков - гломерулонефрита. При наблюдении за этими больными особое внимание надо обращать на изменение артериального давления и периодически определять количество мочевины и креатинина в крови и моче.
Острая почечная недостаточность, коллагенозы, тромбоз почечных вен сопровождаются гематурией (макрогематурией).
Застойная гематурия развивается при заболеваниях сердца, инфаркте почек (веностаз), она обусловлена циркуляторными нарушениями, приводящими к вторичной почечной недостаточности. Застойные микрогематурии быстро стихают при улучшении состояния сердца.
Гематурия при туберкулезе почек относится к микрогематурии, которая очень упорна и продолжается долгие годы, сочетаясь с кислой реакцией мочи (рН 5,0-6,0).
Гематурия при токсикоинфекциях (сепсис, грипп, скарлатина, инфекционный мононуклеоз, свинка, краснуха, бронхопневмония, ангина, дизентерия и др.) свидетельствует о вовлечении в процесс почек и является ранним признаком осложнения, особенно у детей. Это первый признак нефрозонефрита.
Работа № 19 Амидопириновая проба
Принцип:
Каталитическое свойство гемоглобина и окисление веществ в присутствии окислителей
(перекись водорода) с образованием цветной реакции.
Необходимые реактивы:
1.5% спиртовой раствор амидопирина
2.30% -ный р-р уксусной кислоты
3.Перекись водорода
Ход исследования:
Берут равные количества мочи и р-ра амидопирина (2-3 мл), прибавляют по 10-12 капель уксусной кислоты и перекиси водорода.
В присутствии крови появляется сине-фиолетовое окрашивание.
Работа № 20 Бензидиновая проба
Принцип:
Каталитическое свойство гемоглобина и окисление веществ в присутствии окислителей
(перекись водорода) с образованием цветной реакции.
Необходимые реактивы
1.Основной бензидин.
2.Раствор уксусной кислоты 50%-ный, перед употреблением немного бензидина (на кончике ножа) растворяют в 5 мл уксусной кислоты.
3.Раствор перекиси водорода 3%-ный или (лучше) пергидроль, разведенный в 10 раз.
Ход исследования
К 3—5 мл мочи добавляют 2—3 капли раствора бензидина в уксусной кислоте и столько же перекиси водорода, перемешивают. Положительная реакция на кровь дает зеленое или сине-зеленое окрашивание в течение первых 2 мин. Окрашивание, наступившее после 2 мин, не учитывается. Вместо перекиси водорода зжно пользоваться перекисью бария. 0,025 г основного бензидина и 0,1 г перекиси бария растворяют в 5 мл 50% -ной уксусной кислоты. Реактив готовят непосредственно перед употреблением.
Работа № 21 Определение крови в моче индикаторными экспресс- полосками
Современный уровень развития медицинской науки привел к значительному совершенствованию лабораторных исследований. Вместе с этим эффективность работы лабораторно-диагностическрй службы зависит от того, Как быстро сделано то или иное определение. В этой связи экспресс-тесты обладают рядом качеств, определивших их широкое применение в последние годы. Среди этих положительных качеств необходимо отметить следующие:
— быстрота выполнения анализов в неотложных слу-
чаях, когда результат анализа необходимо получить сроч-
но у постели больного при диагностике угрожающих
жизни состояний; ',
— отсутствие дополнительных реактивов;
— простота проведения анализа (проведение исследования в услових отделения врачом-клиницистом или обученной медицинской сестрой);
— достаточная точность;
— большая устойчивость сухих реактивов по сравнению с жидкими и удобство при транспортировке.
В практике лабораторной службы применяются экспресс-тесты отечественного производства и других производителей.
Они представляют собой сухие пробы, позволяющие проводить быстрые качественные и полуколичественные определения компонентов биологических жидкостей (мочи, крови и др.).
Принцип действия тестов основан на тех же или на аналогичных химических реакциях, что и классических методов анализа. Ход исследования обычно сводится к нанесению на таблетку или на полоску индикаторной бумаги исследуемой жидкости (чаще полоску бумаги погружают в исследуемую жидкость).
Результат исследования оценивается по времени появления окраски, по величине окрашенной зоны или по интенсивности окраски. При этом можно судить не только о наличии определяемого вещества, но и о примерном количественном содержании его.
Экспресс-тесты выпускаются для определения как одного компонента (монотесты), так и нескольких компонентов (политесты).
Задания для контроля
1.Каковы клинические аспекты появления крови в моче?
2.Что такое синдром гематурии?
3. Каким образом разделяют почечные гематурии?
4. Что такое функциональные гематурии?
5. Что такое органические гематурии?
6. Какие существуют методы для определения крови в моче?
7. В чем принцип методов по определению крови в моче?