Приготовление разведений для построения калибровочного графика

Из каждого полученного раствора берут 1,25 мл и обрабатыва­ют так, как опытные пробы.

Прямолинейная зависимость при построении калибровочного графика сохраняется до 1 г/л. При более высоких концентрациях пробу следует разводить и учитывать разведение при расчете.

Ложноположительные результаты могут быть получены при наличии в моче контрастных веществ, содержащих органический' йод. Поэтому тест нельзя использовать у лиц, принимающих пре­параты йода; ложноположительный результат может быть также обусловлен приемом сульфаниламидных препаратов, больших доз пенициллина и высокими концентрациями в моче мочевой кислоты.

Задания для контроля

1.Что такое протеинурия?

2.Что такое ложная и истинная протеинурия, в каком случае они наступают?

3.Какими методами определяется качественно белок?

4.При каких патологиях обнаруживают белок?

5.В чем заключается принцип количественного метода определения белка в моче на ФЭКе?

6. Какой принцип заложен в метод Бранберга- Робертса- Стольникова?

Определение глюкозы в моче

Глюкозурии

В моче здорового человека глюкоза находится в столь незначительном количестве, что обычными качественны­ми пробами не обнаруживается. Появление глюкозы в моче называется глюкозурией.

Глюкоза относится к веществам с высоким почечным порогом выделения. Почечный порог — это определенная концентрация вещества в' крови, превышение которой ведет к прекращению его реабсорбции в почечных каналь­цах. В этих случаях процесс фильтрации преобладает над процессом реабсорбции. Эпителий канальцев почки обла­дает способностью к избирательному обратному всасыва­нию. В зависимости от степени обратного всасывания различают пороговые и непороговые вещества. Пороговы­ми называются такие вещества, которые в норме в конечной моче не содержатся, а появляются в ней только при превышении порога. К таким веществам относятся глюкоза, аминокислоты, калий, фосфаты. Обычно, при нормальном содержании их в плазме крови, они реабсорбируются в канальцах полностью.

Глюкоза появляется в моче при превышении порога, т. е. при гипергликемии, которая может быть связана с различными физиологическими и патологическими процессами.. Так, гипергликемия, а следовательно и глюкозурия, возникает при употреблении с пищей большого количества углеводов (алиментарная), эмоциональных напряжениях (эмоциональная). Эти глюкозурии принято называть физи­ологическими, быстропроходящими, в отличие от патоло­гических. Патологические глюкозурии возникают при нарушении функции эндокринных желез, регулирующих уровень глюкозы крови, заболеваниях печени, нервной системы.

Наиболее стойкая патологическая глюкозурия наблю­дается при недостатке в организме инсулина — гормона поджелудочной железы, понижающего уровень глюкозы в крови. Недостаточная секреция инсулина отмечается при сахарном диабете, остром панкреатите. Глюкозурии, воз­никающие при этих заболеваниях, называют инсулярными в отличие от экстраинсулярных, которые наблюдаются при повышении деятельности щитовидной железы, коры и мозгового слоя надпочечников, передней доли гипофиза, травмах и опухолях мозга.

Иногда глюкозурия наблюдается и без гипергликемии, т. е. при нормальном уровне глюкозы в крови, что связано с нарушением реабсорбции глюкозы в канальцах почки (почечный диабет).

Наряду с определением глюкозы в моче определяют лактозу, фруктозу, галактозу ти т.д. Повышенная концентрация в моче этих видов сахаров называется соответ­ственно лактозурией, фруктозурией, галактозурией и т. д.

Работа № 9 Качественное определение глюкозы пробой Гайнеса

Принцип:

Метод основан на способности глюкозы восстанавливать в щелочной среде при нагревании гидрат окиси меди (синего цвета) в гидрат закиси меди (желтого цвета) и закись меди (красного цвета)

Ход исследования

К 6-8 мл мочи прибавляют 20 капель реактива Гайнеса, смешивают и нагревают пробирку до начала кипения. При наличии глюкозы появляется: желтая окраска

Работа № 10 Качественное определение глюкозы индикаторными экспресс- полосками

Принцип

Метод основан на специфическом окислении глюкозы с помощью фермента глюкозооксидазы. Изменение окраски красителя свидетельствует о присутствии глюкозы в моче.

Ход исследования

Индикаторную бумагу погружают в исследуемую мочу, так чтобы желтая полоса с реактивами оказалась смоченной, после этого ее немедленно извлекают из мочи и на 2-3 мин оставляют на пластмассовой пластинке. По истечении времени сразу же сравнивают изменившуюся окраску цветной полосы на бумаге со шкалой, имеющейся в комплекте.

Работа № 11 Количественное определение глюкозы колориметрическим методом Альтгаузена

Принцип метода

Используется цветная реакция, получаемая при нагревании раствора глюкозы со щелочью.

Ход исследования

К 4 мл мочи приливают 1 мл 10% щелочи. Кипятят в течение 1 мин. Через 10 мин после кипячения цвет жидкости сравнивают с цветной шкалой. На шкале соответственно каждой окрашенной полоске обозначено процентное содержание сахара. Можно приготовить цветную шкалу в пробирках (стандарт). Приготавливают следующие растворы: 0,5 %, 1%, 1,5 %, 2 %, 3 % и 4% и обрабатывают их также, как исследуемую мочу. Пробирки закрывают пробками. Таким стандартом можно пользоваться примерно 7-10 дней, что удобнее, чем бумажная шкала.

Задания для контроля

1.Что такое глюкозурия?

2.Какую роль играют пороговые и непороговые вещества?

3.Какова роль инсулина при появление глюкозы в моче?

4.Что такое колориметрическим метод при определении глюкозы?

5.При каких лабораторных показателях следует определять сахар в моче?