Работа № 24 Определение числа форменных элементов в суточном объеме мочи по методу Каковскому – Аддису.
Принцип: Подсчет числа форменных элементов эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров) в суточном объеме мочи с помощью счетной камеры.
Специальное оборудование. 1. Микроскоп. 2. Счетная камера.
Собирание мочи. Классический вариант исследования требует строго соблюдать правила хранения мочи на протяжении длительного срока. Мочу собирают в течение суток: утром болььной освобождает мочевой пузырь, а затем в учение 24 ч собирает мочу в сосуд с несколькими мелями (4—5) формалина или 2—3 кристаллами тимола, желательно хранить мочу в холодильнике.
Во избежание получения заниженных данных обусловленных распадом форменных элементов в нейтральной (щелочной) моче или низкой ее плотности, надо назначать больному в течение суток, предшествовавших исследованию, мясную пищу с ограничением жидкое -чтобы получить мочу кислой и более высокой концентрации. Если нет «сложности собрать мочу с учетом описанных причин, то можно собирать мочу 10—12 ч. В случае точность результата страдает, но брать мочу легче. Собирают мочу за ночное время и организуют это; следующим образом: в 10 ч вечера больной освобождает мочевой пузырь, мочу выливают, и до 8 ч утра мочеиспускания не должно быть (интервал времени 10.ч); всю мочу, полученную в 8 ч утра, посылают в лабораторию для исследования. При никтурии такой вариант сбора мочи не подходит.
Ход исследования. Собранную мочу тщательно перемешивают и измеряют ее объем. Для исследования получают осадок из количества мочи, выделенной за 12 мин (1/5 ч), которое рассчитывают по формуле:
Q=V/ t х 5
где Q — объем мочи, выделенной за 12 мин (мл); V — объем мочи, собранной за время исследования (мл); t — время сбора мочи (часы); 5— коэффициент пересчета за Д ч.
Рассчитанное количество мочи центрифугируют в мерной центрифужной пробирке при 3500 об/мин в течение 3 мин или при 2000 об/мин в течение 5 мин, отделяют верхний слой, оставляя 0,5 мл мочи с осадком. Если осадок превышает 0,5 мл, то оставляют 1 мл мочи. Осадок тщательно перемешивают и заполняют счетную камеру: Подсчитывают раздельно количество лейкоцитов, эритроцитов, цилиндров (эпителиальные клетки не считают) и рассчитывают содержание форменных элементов в 1 мкл осадка мочи.
Расчет. Если подсчет проводят в камере Горяева, объем которой равен 0,9 мкл, то количество форменных элементов в 1 мкл определяют по формуле:
Х= А/0,9,
где X — число форменных элементов в 1 мкл; А — число форменных элементов, подсчитанных во всей камере; 0,9 — объем камеры (мкл).
Количество форменных элементов, выделенных с мочой за сутки, рассчитывают по формуле:
В = Х-500-5-24 = Х-60 000,
если для исследования взять 0,5 мл (500 мкл) из 12-минутной порции мочи, или:
В= Х х 1000х5х24=Х х12000
Нормативные величины: суточной экскреции форменных элементов с мочой: до 2 млн лейкоцитов в сутки, до 1 млн эритроцитов в сутки и 20 тыс цилиндров в сутки.
Работа № 25О пределение количества форменных элементов в 1 мл мочи методом Нечипоренко
Принцип
Производится подсчет форменных элементов в 1 мл (1000 мкл) мочи, взятой в середине акта мочеиспускания из утренней порции (средняя порция)
Ход исследования. Берут сначала 10 мл мочи, центрифугируют 5 минут при 2500 об/ мин, отсасывают пипеткой 9 мл надосадочной жидкости, оставшуюся мочу с осадком в количестве 1 мл (1000 мкл) тщательно перемешивают и заполняют счетную камеру Горяева. Считают отдельно лейкоциты, эритроциты и цилиндры. Подсчет производят в 100 больших квадратах.
Расчет по формуле:
Х эр = Ух 4000x1000= Yx250,
1600x10
где X — число форменных элементов в 1 мл мочи; Y — число клеток в больших квадратах, 1600 — число малых квадратов в 100 больших, 1000 — количество мкл в 1 мл, 1/4000 мкл — объем малого квадрата. 10 — отношение объема центрифугированной мочи к объему надосадочной жидкости с осадком.
Показатели пробы Нечипоренко у здорового человека: в 1 мл мочи содержится лейкоцитов до 2000, эритроцитов до 1000, цилиндров до 20.
Преимущество метода Нечипоренко состоит в том, что берется малое количество свежевыпущенной мочи, время не регламентировано.
КДЗ: С помощью количественного метода исследования мочи можно с большой точностью определить характер мочевого осадка, что позволяет выявить скрытые формы заболевания почек и дифференцировать различные почечные поражения. Обнаружение по вышеуказанным пробам преобладания количества эритроцитов (больше 1 000 000 по пробе Каковского—Аддиса) характерно для гломерулонефрита, значительное увеличение лейкоцитов (больше 2 000 000 по пробе Каковского—Аддиса) наблюдается при пиелонефрите. Выраженная цилиндрурия (сотни тысяч по пробе Каковского—Аддиса) отмечается при нефротическом синдроме.
Работа № 26 Определение количества форменных элементов по методу Амбюрже
Принцип метода
Определение количества форменных элементов, выделенных с мочой за 1 мин, с помощью счетной камеры.