Обширный МИК репертуар Т. гондий может быть Corre-веден с широкой специфичностью хост-клеток в пробирке и распространение инфекции во всех органах в toxoplas-MOSIS, контрастирующий с высокой клетки и органа
Специфичность найти в плазмодии. Apicomplexa переменно специфичность клеток, особенно на различных стадиях инфекции: специфика может быть связана с MIC репертуаром, совершенно отличному от одного рода к другому, и зависимости от стадии жизненного цикла.
микрофон гена делеция в T.gondii, показала, что по крайней мере некоторые из ССДА не являются существенными для Inva-Сьона в пробирке (M2AP, MIC1, MIC3, MIC4, MIC5, MIC6) (Reiss и др., 2001; Хюиньте и др. 2003;.. Cerede и др, 2005), тогда как полная отмена MIC2 и AMA1 не может быть получено (Huynh и соавт, 2004; Митал и др 2005), демонстрируя тем самым их существенный характер.. разрушение гена MIC3 не изменяет вторжение фибробластов, но вызывает задержку смерти у мышей (Cerede и др., 2005). В соответствии с этим, MIC3 может иметь важное значение для вторжения в другие, чем те, которые были протестированы до сих пор в пробирке специфических типов клеток. Эта гипотеза подтверждается демонстрацией того, что связывание способность MIC3 к клеткам-хозяевам имеет решающее значение для паразита вирулентность в естественных условиях (Cerede и др., 2005). Это также показывает, что значение МИК лучше оценивать в естественных условиях, чем в пробирке. Действительно, подвижность, адгезия и инвазия, которые являются функциями постулируемых для MIC белков, являются многофакторными явлениями, экспрессия которых, скорее всего, отличаются от естественных условий, что, которое происходит в статической среде, найденной в культуральной чашке.
Удаление результатов гена MIC1 в дефектном нацеливании как MIC4 и MIC6 в micronemes (Reiss и др., 2001), и mic1KO паразиты 50 процентов подрываются в инвазии (Cerede и др., 2005). Этот дефект в инвазии, таким образом, может быть назначен на отсутствие MIC1 / 4/6 комплекса, без дополнительной точности. Как упоминалось ранее, только MIC1 связывает клетки-хозяина в пробирке (Saouros и др., 2005). Таким образом, MIC6 может закрепить две других белки и взаимодействовать с нижележащим двигателем, тогда как MIC1 бы установить конкретные Interac-ции с рецепторами клеток-хозяина, необходимыми для вторжения хоста-клеток.
Нарушение M2AP дает также частичный фенотип. M2AP выколотки паразиты
> 80 процентов подрывается в записи хост-клеток (Huynh и др., 2003), и показал задержка смерти у мышей (Harper и коллег, который был представлен). В этих пара-сайтов, MIC2 частично накапливается в паразитарной эндоплазматического ретикулума и аппарата Гольджи, и
288 Toxoplasma Секреторные БЕЛКИ И ИХ РОЛИ В инвазии клеток и внутриклеточное ВЫЖИВАНИЕ
плохо секретируются. Это вторжение дефект, вероятно, из-за дефектную экспрессию MIC2 / M2AP комплекса.
Важность МИК разнообразия белков было дополнительно подчеркнуто одновременным нарушением ССД (Cerede и др., 2005). Действительно, захватывающее уменьшение вирулентности в естественных условиях наблюдали за счет одновременного срыва MIC1 и генов MIC3 (что соответствует в действительности к MIC1 / 3/4/6 функционального KO). Этот результат показывает, что ССД имеет синергетический эффект на инфекции в естественных условиях.
Эфирный МИК Повторные попытки нарушить ген, кодирующий Mic2 оказались безуспешными (ЛД Сибли, личное сообщение;. Хюинь и др, 2004), предполагая, что, как и для TRAP в плазмодий СПОРО-zoites, MIC2 является одним из важнейших белков. Кроме того, хотя паразиты, несущие целевой исключить MIC2 C-домен может быть первоначально обнаружено с помощью проточной цитометрии в трансфицированной популяции, они быстро потеряли при дальнейшем росте (Jewett и Сиб, 2004). Условный нокдаун MIC2 (mic2KO) был недавно достигнут (Huỳnh и Каррутерс, 2006). Эти паразиты выражают Mic2 при приблизительно 5 процентов от нормального уровня, и были>80 процентов подрывается в инвазии из-за дефекта в приложении. Интересно, что они также показывают почти исключительно один тип движения - круговое скольжение.
mic2KO паразиты массово ослаблены у мышей, требуя>600 раз выше для инокуляции летальной инфекции. Нет дефектов в внутриклеточной репликации или выхода не было видно. Если MIC2 участвует в формировании MJ не установлено, хотя, как было показано, чтобы занять интерфейс между паразитом и хозяином мембранами во время вторжения (Каррузерс и др., 1999b). В плазмодии, две клеевые мотивы TRAP было предложено принять участие в формировании МДж. В самом деле, независимо или одновременно мутация в Plasmodium TRAP А-домене и ТСП не изменяет спорозоиты Мотыль-ность, а конкретно уменьшается (или ликвидирует в случае одновременных мутаций) хоста-клетки вторжения в пробирке и в естественных условиях (Matuschewski и др., 2002). Поэтому, скользя моторики и вторжение принимающей клетки, вероятно, связаны различные внеклеточные ассоциации,
AMA1 является интегральным мембранным белком, впервые описанный в Plasmodium 15 лет назад (Маршалл и др., 1989). Как ловушка, это широко законсервировано apicomplexan MIC белок. Точная функция AMA1 не известна, но немало свидетельств указывает на роль в инвазии. Демонстрация такой роли пришла от ингибирующих эффектов анти-Plasmodium AMA1 антител (Thomas и др, 1984;. Gaffar и др., 2004;. Silvie и др, 2004) или анти-Toxoplasma AMA1 антитела (Hehl и др., 2000) о вторжении. Было предложено AMA1 принимать участие в формировании плотного связывания интерфейса между мерозоитами и эритроцитарными поверхностями (Mitchell и др., 2004). Действительно, начальное случайное вложение поверхности мерозоитов в красные кровяные клетки не зависит от присутствия ингибиторных антител,
В соответствии с этим, Mital и его коллеги генерируется условный нокдаун Т. гондий AMA1 и показал, что AMA1 не участвует в скользя моторику, или в начальной стадии присоединения, или в освобождении microneme, но не в состоянии приложить Инти-счете к клеткам-хозяевам (Митал и др., 2005). Роль для Т. гондий AMA1 в строительстве МДж была подтверждена Александром и коллегами, которые показали, что секретируемый AMA1 связан на поверхности паразита с комплексом секретируемых rhop-нах шеей белков, которые релокализуют в MJ (Александр и др., 2005). Во время вторжения, AMA1 показывает локализацию поверхности с высоким уровнем стационарного (Howell и др., 2005). AMA1 присутствует в МДж, но большинство AMA1 явно на обеих сторонах этой зоны адгезии (Александр и др., 2005). Однако в нокдаун паразитов, экспрессирующих низкий уровень AMA1,
AMA1-дефицитные паразиты придают, но не вторгаться (МИТАЛ и др., 2005); они выделяют RON4 апикальны, но кольцо окрашивание RON4 заменяются на пузырек, как маркировка (Александр и др., 2005). Эти исследования показывают модель, в которой AMA1, в сотрудничестве РОНС, участвует в формировании МДж, будучи основным игроком в инвазии. Интересно, однако, AMA1 не требуется для выхода или для организации RON кольца во время этого перехода (Александр и др., 2005), что подчеркивает
| RHOPTRIES |
возникающие различия между вторжением и выхода, которые ранее были недооцененными (Hoff и Каррутерсом, 2002). Вместе выводы из условного выражения MIC2 и AMA1 позволяет предположить, что эти белки выполняют существенную роль в различных этапах в адгезии Toxoplasma, с MIC2 функционирования в креплении и AMA1 время, необходимые для формирования сильных связи меж-лиц в МДже.
RHOPTRIES
