Hydroxynaphthoquinones образуют класс соединений, обладающих широким спектром активности против различных простейшими паразитами (Baggish и Hill, 2002). Они включают в себя parvaquone и bupar-vaquone, которые являются весьма эффективными при лечении крупного рогатого скота, инфицированный Theileria (McHardy и соавт, 1985;. Хашое Fesharki, 1991). Атоваквон, производное хлорфенил из parvaquone, используют в различных комбинациях для лечения малярии (с прогванил как Маларон) и токсоплазмозом (с пириметамин), а также имеет клиническую эффективность против пневмоцистных и бабезиоза (с азитромицином). Эти высоко липофильные соединения близко напоминают структуру убихинона, митохондриального электронного носителя, что указывает на Mech-ханизм, затрагивающей митохондриальной мембраны POTEN-TiAl на уровне цитохрома г. до н.э.1сложный. Биоэнергетические исследования митохондрий в месте с использованием проницаемых тахизоитов Toxoplasma при условии, что первые прямых биохимических доказательства того, что Respi-ratory цепь и окислительное фосфорилирование является функциональными в apicomplexan паразитов (Vercesi и др., 1998). Эти исследования также показали, что основной сайт ингибирования Atovaquone между цитохромами Ь и с1, И что паразит дыхания, по крайней мере в 20 раз более чувствительным, чем дыхание млекопитающих к препарату. Как уменьшить убихиноном является существенным кофактором дигидрооротата dehydroge-Nase, также возможно, что Atovaquone косвенно блокирует пиримидин биосинтез.
Точные молекулярные взаимодействия атовакона и его предполагаемого целевой цитохром пришли в результате анализа резистентных мутантов. Мутагенез исследование с культивируемыми тахизоитами Toxoplasma замешан общим механизм для атовакуона и decoquinate (Пфефферкорн и др.,
|
|
1993), ингибитор транспортного аминохинолин электронов и аналоговый убихинола используется для лечения Eimeria и Toxoplasma инфекции в животноводстве (Wang, 1975;. Фрай и др, 1984). Токсоплазмы мутант выбран для устойчивости к атовахон в культуре клеток после химического мутагенеза был частично поперечно-устойчивым к decoquinate (ATOр-1), и мутантный выбран для устойчивости к decoquinate был гиперчувствительностью к атовахон (Deqр-1). Оба мутанты были устойчивы к воздействию ингибирующего лекарственных средств на respira-ции, как измерено от скоростей кислорода потреб-ции по свежеприготовленным внеклеточным тахизоитам. Анализ цитохрома как потенциальный сайт лекарственной устойчивости, придающих мутаций стало возможным с реконструкцией гена Т. гондий с помощью RT-PCR клонирования (McFadden и др., 2000), необходимой стратегией в связи с наличием в Т. гондий ядерный геном многочисленных высоко фрагментированных копий гена цитохрома Ь (Оссорио и др., 1991). Два независимых мутаций (M129L и I254L) отображение на цитохром Ь Qодомена были идентифицированы в атоваконе устойчивого клонального изола тов, полученном из мутагенизированного тахи- zoites. При введении в геном дрожжей цитохрома Ь, аналогичные аллели (M139L и I269L) также придают устойчивость к атовахон в S.cerevisiae, (Kessl и др., 2006). Молекулярное моделирование, на основе кристаллической структуры дрожжей и курица цитохрома ферментов, предполагает, что мутированные остатки вступать в контакт с атовахон в кармане, который может вместить гидрофобную боковую цепь лекарственного средства, которая простирается от ядра хинона (Макфэдден и др., 2000;. Kessl и др, 2003). Аналогичная Qомутации домена обнаружены associ-ованные с Atovaquone устойчивостью Plasmodium (Шривастава и соавт, 1999;.. Syafruddin и др, 1999;. Korsinczky и др., 2000; Kuhn и др, 2005). Однако ген цитохрома Ь из Toxoplasma атовахон устойчивостью мутант Атор-1 мутант появляется не влияет, предполагая, что сопротивление может возникнуть с помощью других механизмов. Тем не менее, QоДомен также, вероятно, определяющим фактором для decoquinate сопротивления в токсоплазмы. Атовакон-гиперчувствительной, decoquinate устойчивостью Deqр-1 мутант (Пфефферкорн и др., 1993) таит в себе замену F260L, которая отображает на связывающем карман убихинола в соответствии с курицей
|
|
510 Toxoplasma В качестве модельной системы ДЛЯ APICOMPLEXAN открытия новых лекарств
цитохрома модель б подобие (Макфэддно и Boothroyd, 1999), в соответствии с ролью в Моде-лирующее взаимодействие с обеими препаратами.