ВАЛИДАЦИЯ некоторых потенциальных APICOMPLEXAN МИШЕНЯМИ

Нуклеотидная метаболизм

Большая часть прогресса в понимании пиримидиновых и пуриновых метаболизм в Toxoplasma является attribut-состоянии пионерской работы Elmer Pfefferkorn (Дартмут колледж). Он разработал стратегии генетического Selec-вания для Toxoplasma мутантов дефектные в пиримидиновых и пуриновых гаражах путей с использованием нуклеозидов или свободных аналогов оснований, включая фторурацил, аденозин арабинозид и 6-thioxanthine. Противопаразитарная активность этих аналогов зависят от их активаций спасательного-ферментами пути метаболизма. Биохимический и генетический анализ устойчивых мутантов эффективно разгадал механизмы, посредством которых паразит продувает пиримидиновые и пуриновые предшественник от хоста (Pfefferkorn, 1978; Pfefferkorn и Pfefferkorn, 1978; Пфефферкорн и др, 1983, 2001;. Пфефферкорн и Borotz, 1994; Schwab и др., 1995). В итоге, Toxoplasma продувает пиримидинового основание урацил, но и делает пиримидинов De Novo. Как и все п-SITIC простейших, токсоплазмы являются пурин ауксотрофом и утилизируют пуриновые нуклеотидные предшественник (в данном случае) через параллельные избыточные пути. После подтверждающей работы других групп привела к клонированию и подробного characteriza-ции ферментов, участвующим. Они включают в себя урацил фосфорибозилтрансферазы (УПРТ) (Donald и Roos, 1995;. Картер и соавт, 1997; Шумахера и др., 2002), гипоксантин-ксантин-гуанин phosphori-bosyl трансферазы (HXGPRT) (Donald и др, 1996;. Шумахера. и др, 1996), аденозин-киназа (АК) (Дарлинг и соавт, 1999;. Салливан и др, 1999;. Кук и др., 2000; Recacha и др., 2000;. Шумахер и др, 2000), ИМП дегидрогеназы (IMPDH) (Sullivan и др., 2005), и аденозин транспортер (Чанг и др., 1999). но и делает пиримидинов De Novo. Как и все п-SITIC простейших, токсоплазмы являются пурин ауксотрофом и утилизируют пуриновые нуклеотидные предшественник (в данном случае) через параллельные избыточные пути. После подтверждающей работы других групп привела к клонированию и подробного characteriza-ции ферментов, участвующим. Они включают в себя урацил фосфорибозилтрансферазы (УПРТ) (Donald и Roos, 1995;. Картер и соавт, 1997; Шумахера и др., 2002), гипоксантин-ксантин-гуанин phosphori-bosyl трансферазы (HXGPRT) (Donald и др, 1996;. Шумахера. и др, 1996), аденозин-киназа (АК) (Дарлинг и соавт, 1999;. Салливан и др, 1999;. Кук и др., 2000; Recacha и др., 2000;. Шумахер и др, 2000), ИМП дегидрогеназы (IMPDH) (Sullivan и др., 2005), и аденозин транспортер (Чанг и др., 1999). но и делает пиримидинов De Novo. Как и все п-SITIC простейших, токсоплазмы являются пурин ауксотрофом и утилизируют пуриновые нуклеотидные предшественник (в данном случае) через параллельные избыточные пути. После подтверждающей работы других групп привела к клонированию и подробного characteriza-ции ферментов, участвующим. Они включают в себя урацил фосфорибозилтрансферазы (УПРТ) (Donald и Roos, 1995;. Картер и соавт, 1997; Шумахера и др., 2002), гипоксантин-ксантин-гуанин phosphori-bosyl трансферазы (HXGPRT) (Donald и др, 1996;. Шумахера. и др, 1996), аденозин-киназа (АК) (Дарлинг и соавт, 1999;. Салливан и др, 1999;. Кук и др., 2000; Recacha и др., 2000;. Шумахер и др, 2000), ИМП дегидрогеназы (IMPDH) (Sullivan и др., 2005), и аденозин транспортер (Чанг и др., 1999). Как и все п-SITIC простейших, токсоплазмы являются пурин ауксотрофом и утилизируют пуриновые нуклеотидные предшественник (в данном случае) через параллельные избыточные пути. После подтверждающей работы других групп привела к клонированию и подробного characteriza-ции ферментов, участвующим. Они включают в себя урацил фосфорибозилтрансферазы (УПРТ) (Donald и Roos, 1995;. Картер и соавт, 1997; Шумахера и др., 2002), гипоксантин-ксантин-гуанин phosphori-bosyl трансферазы (HXGPRT) (Donald и др, 1996;. Шумахера. и др, 1996), аденозин-киназа (АК) (Дарлинг и соавт, 1999;. Салливан и др, 1999;. Кук и др., 2000; Recacha и др., 2000;. Шумахер и др, 2000), ИМП дегидрогеназы (IMPDH) (Sullivan и др., 2005), и аденозин транспортер (Чанг и др., 1999). Как и все п-SITIC простейших, токсоплазмы являются пурин ауксотрофом и утилизируют пуриновые нуклеотидные предшественник (в данном случае) через параллельные избыточные пути. После подтверждающей работы других групп привела к клонированию и подробного characteriza-ции ферментов, участвующим. Они включают в себя урацил фосфорибозилтрансферазы (УПРТ) (Donald и Roos, 1995;. Картер и соавт, 1997; Шумахера и др., 2002), гипоксантин-ксантин-гуанин phosphori-bosyl трансферазы (HXGPRT) (Donald и др, 1996;. Шумахера. и др, 1996), аденозин-киназа (АК) (Дарлинг и соавт, 1999;. Салливан и др, 1999;. Кук и др., 2000; Recacha и др., 2000;. Шумахер и др, 2000), ИМП дегидрогеназы (IMPDH) (Sullivan и др., 2005), и аденозин транспортер (Чанг и др., 1999). и утилизирует нуклеотидные предшественник пурина (в данном случае) через параллельные избыточные пути. После подтверждающей работы других групп привела к клонированию и подробного characteriza-ции ферментов, участвующим. Они включают в себя урацил фосфорибозилтрансферазы (УПРТ) (Donald и Roos, 1995;. Картер и соавт, 1997; Шумахера и др., 2002), гипоксантин-ксантин-гуанин phosphori-bosyl трансферазы (HXGPRT) (Donald и др, 1996;. Шумахера. и др, 1996), аденозин-киназа (АК) (Дарлинг и соавт, 1999;. Салливан и др, 1999;. Кук и др., 2000; Recacha и др., 2000;. Шумахер и др, 2000), ИМП дегидрогеназы (IMPDH) (Sullivan и др., 2005), и аденозин транспортер (Чанг и др., 1999). и утилизирует нуклеотидные предшественник пурина (в данном случае) через параллельные избыточные пути. После подтверждающей работы других групп привела к клонированию и подробного characteriza-ции ферментов, участвующим. Они включают в себя урацил фосфорибозилтрансферазы (УПРТ) (Donald и Roos, 1995;. Картер и соавт, 1997; Шумахера и др., 2002), гипоксантин-ксантин-гуанин phosphori-bosyl трансферазы (HXGPRT) (Donald и др, 1996;. Шумахера. и др, 1996), аденозин-киназа (АК) (Дарлинг и соавт, 1999;. Салливан и др, 1999;. Кук и др., 2000; Recacha и др., 2000;. Шумахер и др, 2000), ИМП дегидрогеназы (IMPDH) (Sullivan и др., 2005), и аденозин транспортер (Чанг и др., 1999). После подтверждающей работы других групп привела к клонированию и подробного characteriza-ции ферментов, участвующим. Они включают в себя урацил фосфорибозилтрансферазы (УПРТ) (Donald и Roos, 1995;. Картер и соавт, 1997; Шумахера и др., 2002), гипоксантин-ксантин-гуанин phosphori-bosyl трансферазы (HXGPRT) (Donald и др, 1996;. Шумахера. и др, 1996), аденозин-киназа (АК) (Дарлинг и соавт, 1999;. Салливан и др, 1999;. Кук и др., 2000; Recacha и др., 2000;. Шумахер и др, 2000), ИМП дегидрогеназы (IMPDH) (Sullivan и др., 2005), и аденозин транспортер (Чанг и др., 1999). После подтверждающей работы других групп привела к клонированию и подробного characteriza-ции ферментов, участвующим. Они включают в себя урацил фосфорибозилтрансферазы (УПРТ) (Donald и Roos, 1995;. Картер и соавт, 1997; Шумахера и др., 2002), гипоксантин-ксантин-гуанин phosphori-bosyl трансферазы (HXGPRT) (Donald и др, 1996;. Шумахера. и др, 1996), аденозин-киназа (АК) (Дарлинг и соавт, 1999;. Салливан и др, 1999;. Кук и др., 2000; Recacha и др., 2000;. Шумахер и др, 2000), ИМП дегидрогеназы (IMPDH) (Sullivan и др., 2005), и аденозин транспортер (Чанг и др., 1999).

Возможность получения мутантов бескомпромиссное нулевые или нокаут гена в генах, кодирующих

пурин Б ферменты по существу недействительные пути как химиотерапевтические мишени в Toxoplasma и в тесно связанные кокцидиях, такие как Eimeria. Кроме того, сравнительный геномный анализ показал удивительное разнообразие в пурин спасательных путей среди Apicomplexa (Chaudhary и др., 2004), что делает его маловероятным, что одна терапевтическая стратегия найдет применение широкого спектра действия. Малярия не хватает АК и, как представляется, чтобы спасти пуринов исключительно через HXGPRT. С другой стороны, Theileria и Криптоспоридия отсутствие HXGPRT в целом, и спасти через АК.

В последнее время наблюдается некоторое усилие, чтобы определить новые подрывные субстраты активирующего адено-синусоидальной киназы, с использованием фермента Т. гондий для отношений структура-активность evaluat-ки (Ядав и др., 2004;. Раис и др, 2005). Несмотря на то, по-видимому, достигнуты определенные успехи в поиске соединений с большей селективностью по отношению к паразитарному ферменту по сравнению с ортологическим ферментом хозяина, аналоги 6-benzylthioinosine, описанные в этих ссылках, имеют ограниченную эффективность в пробирке или в естественных условиях, и, как представляются, мало возможностей для дальнейшей оптимизации без лучшего понимания-ков, как они транспортируются в или Metabo-lized паразитом.

В отличии от плохого прогноза для метаболизма пуриновых нуклеотидов в качестве практической цели вмешательства, пиримидиновый путь биосинтеза показывает значительно более перспективный. Хотя Toxoplasma утилизирует урацил, De Novo пиримидина biosythesis действительно кажется важным. Нокаут мутация в Т. гондия карбамоильного фосфата синтетазы II, который катализирует совершил первый шаг пиримидинового biosythesis, является урацил ауксотрофы и полностью авирулентны в естественных условиях (Fox и Bzik, 2002). Ситуация является потенциально более благоприятной еще при малярии, в которой отсутствует пиримидиновые спасательные ферменты в целом и зависят от пути De Novo для пиримидиновых нуклеотидов (Gutteridge и Тригга, 1970; Reyes и др, 1982;. Сеймур и др., 1994). В соответствии со своей нетипичной природой,

уридинкиназы-урацил фосфорибозилтрансферазы и protobacterial тимидинкиназы (Striepen и др., 2004).

Липидного обмена

Apicomplexan apicoplast пути замешанные в метаболизме липидов привлекли значительное внимание в качестве потенциальных терапевтических мишеней, и были предметом предыдущих обзоров (Макфадден и Руса, 1999, Кенгуру и др 1999c;. Робертс и др 2003;. Seeber, 2003; Ральф. и др, 2004; Lu и др, 2005).. Существование apicoplast-ассоциированных бактерий типа II жирных кислот в пути Toxoplasma и Plasmodium впервые было обнаружено в ходе поисков вероятных пластид-целевые гены белка в общедоступных геномных и EST базы данных последовательностей. Двудольный лидерный пептид был идентифицирован в качестве подписи для ядерных кодируемых генов, импортируемых в apicoplast, и был показан, что достаточно для нацеливания гетерологичного GFP слитого белка или ядерного кодируемого ацил-носитель и рибо-сомного S9 белок этой органеллы в Toxoplasma (Валлер и др., 1998). Как apicoplast таргетирования последовательность сильно вырожденная и трудно с уверенностью предсказать, этот анализ импорта впоследствии был использован для подтверждения organellu-лар секционирования других импортируемых белков. Таким образом, компоненты с apicomplexan мевалонатного пути, ответственные за биосинтез изопреноидов и малярийной fosmidomycin senstiv-ность, также были обнаружены быть локализован в пластиды (ДЖОМАА и др., 1999). Аналогичным образом, токсоплазмы Plas-TID ацетил-СоА-карбоксилазы (АССазы) был идентифицирован-Fied, который катализирует ключ совершил шаг в ФАС biosythesis, и который чувствителен к clodi-nafop и связанных с ними гербицидов (Jelenska и др., 2001; Валлер др., 2003). Чувствительность Toxoplasma и Plasmodium с селективными ингибиторами FAS пути бактериальной II, в том числе thiolactomycin и триклозан,

Хотя использование гербицидов и антибиотиков для исследования липидного biosythetic пути наводит на мысли, она далека от окончательного доказательства их незаменимости.

Некоторые из этих реагентов, в то числе thiolactomycin производных (Waller и др., 2003) и ФОП гербициды (Zuther и др., 1999), показывает плохое antiparastic эффок-cacy как в пробирке и против своих гипотетических целей фермента fabH и АССазов (10-50 ìM IC₅₀). Aureobasidin А, хорошо охарактеризованный ингибитор биосинтеза phosphporylceramide грибкового инозита (Эндо и др, 1997;.. Takesaiko и др, 1993), показывает достаточную эффективность против tachzoites (~ 1ìM IC₅₀), Но его воздействие на паразитах сфинголипидов бассейнов появляется в относительно небольших количеств и другие противопаразитарных цели еще не могут быть исключены (Сонд и др., 2005). Другой хорошо известный ингибитор представляет собой антибактериальные дезинфицирующим триклозан, обычно используемый в зубных пастах и ​​мыл. У бактерий это показывает селективность в отношении еноили жирные кислоты редуктазы (Фаби). Триклозан показывает хорошую эффективность против Toxoplasma и малярии в пробирке (суб-ìM IC₅₀), А некоторая активность в мышиных моделях (Маклеод и др., 2001; Surolia и Surolia, 2001). Тем не менее, он имеет плохую растворимость и хорошо документированные неспецифические воздействия на мембраны (Villalain и др., 2001;. Lygre и др, 2003;. Гильен и др., 2004; Павел и др, 2004). Многое было сделано из наблюдения, что, в отличие от ингибиторов apicoplast ДНК или синтеза белка, триклозан, как представляется, действовать быстро (Surolia и др., 2004). Тем не менее, не ясно, в какой степени эффективность обусловлена ​​ингибированием мишени Fabi. Знание триклозан-reistant еноил-редуктазы аллелей у бактерий должна позволять строительство трансгенных Toxoplasma или Plasmodium паразитов, несущих ортологичных мутации резистентности (Хит и др., 2000; Brenwald и Fraise, 2003), чтобы лучше оценить, в какой степени триклозан эффективность является в зависимости от этого фермента. Стратегии улучшить клеточное поглощение триклозана были попытки, в том числе создание пролекарственных форм путем связывания с пептидным носителем для применения против T.gondii, тахи- zoites (Samuel и соавт., 2003) или на ядре бета-лактама для использования как антибиотик (Li и др., 2002;. Стоун и др, 2004). В обоих случаях улучшается клеточное поглощение и улучшение эффективности было убедительно продемонстрировано, связанная с внутриклеточным высвобождения клеточными эстераз и бета-лактамаз соответственно. Тем не менее, ни один из этих исследований показали обнадеживающие данные о антимикробных эффектах этих конъюгат в естественных условиях. Для того, чтобы преодолеть плохую растворимость триклозана. 2003) или к сердечнику бета-лактамным для использования в качестве антибиотика (Li и др, 2002; Stone и др, 2004).. В обоих случаях улучшается клеточное поглощение и улучшение эффективности было убедительно продемонстрировано, связанная с внутриклеточным высвобождения клеточными эстераз и бета-лактамаз соответственно. Тем не менее, ни один из этих исследований показали обнадеживающие данные о антимикробных эффектах этих конъюгат в естественных условиях. Для того, чтобы преодолеть плохую растворимость триклозана. 2003) или к сердечнику бета-лактамным для использования в качестве антибиотика (Li и др, 2002; Stone и др, 2004).. В обоих случаях улучшается клеточное поглощение и улучшение эффективности было убедительно продемонстрировано, связанная с внутриклеточным высвобождения клеточными эстераз и бета-лактамаз соответственно. Тем не менее, ни один из этих исследований показали обнадеживающие данные о антимикробных эффектах этих конъюгат в естественных условиях. Для того, чтобы преодолеть плохую растворимость триклозана

512 Toxoplasma В качестве модельной системы ДЛЯ APICOMPLEXAN открытия новых лекарств

для использования в качестве противомалярийное, новые коллоидные составы с использованием нано-технологических устройств, также были изучены (Маэстрелли и др., 2004). Альтернативно, синтез нового структурного класса широкого спектра Fabi-направленных антибиотиков с более подходящими фармакокинетическими свойствами, может быть стоит исследовать (Payne и др., 2002).

Существенный фактор, осложняющий в использовании токсоплазмов в качестве модели для понимания APICOM-plexan липидных биосинтетических путей и для целей целевой проверки является формирующейся доказательствой существенных различий между видами. В то время как малярия имеет единственный apicoplast bacte-риал (тип II) FAS путь, то Toxoplasma геном имеет дополнительные гены, кодирующие цитозольный (тип I) F и АССазы ферменты (Jelenska и др., 2001;. Ральф и др, 2004). Криптоспоридия не хватает apicoplast и имеет цитозольный тип I-жирную кислоту синтазы (Zhu и др., 2000; Zhu, 2004). Theileria, как представляется, гавани сильно зауженной apicoplast, что не хватает жирной кислоты biosythetic пути типа II, но который сохраняет Абиль-ность для получения изопреноидов (Гарднер и др., 2005). Цитозольного типа I. жирных кислот путь биосинтеза также, как представляется, отсутствует.

Несмотря на обещание множества потенциальных терапевтических мишеней, связанных с пластид липидного обмена, ряд важных Ques-ций остаются об их druggability. Toxoplasma и малярия роются большую часть липидов из инфицированных клеток-хозяев, в том числе жирные кислоты, фосфо-липидов и холестерина (Rock, 1971а, 1971b;. Флакон и др, 1999; Коппенс и др., 2000; Charron и Сибли, 2002; Джексон и др., 2004). Если паразит не делает большую часть своего липида De Novo, что функция apicoplast липидного biosythesis? Маркировочные эксперименты и биохимический анализ еще предстоит определить конкретные продукты этого пути. Будет ли ингибирование этих паразитов путей вызывают cytoci-декалитров, цитостатическое или замедленное действие на рост? Для лечения острого токсоплазмоза или церебральной P. трехдневной малярии, цитоцидные соединения, которые быстро действуют на основных целях явно желательно. С другой стороны, цитостатические соединения, но, вероятно, не инерционные из них, может быть достаточными для профилактического применения. К счастью, с толком-способностью молекулярных инструментов для токсоплазмов и плазмодии, предстоящая генетическая рассечения

ферментные компоненты паразит липидной Биосины-тетический пути должны дать некоторые ответы. Первый шаг в этом направлении был строи-ции из гондий ацила белка-носителя T. (ACP) Condi-ционного нуль-мутант (Мазумдар и др., 2006). Под без разрешающих условьте х, рост этого паразита клеточной линии был уменьшен в пробирке, с тяжестью ингибирования возрастает с дополнительными раундами роста монослоев HFF клеток. Эти результаты демонстрируют важность пути FAS II для роста тахизоит, но и подтвердить Impres-Сион, что химиотерапевтические таргетирований этого пути может быть ограничена задержкой цитостатической эффективностью.

Цитоскелет

Toxoplasma доказала свою превосходная система модель для понимания механизмов APICOM-plexan моторики, а также лежащие в основе динамики и архитектуры паразита цитоскелета (Carruthers, 2002;. Soldati и др, 2004; Сольдати и Мейснер, 2004; Ветцель, 2004), Цитоскелет структурные белки являются мишенью для различных неселективных токсинов натуральных продуктов, таких как цитохалазин D (против актина), и антимитотические колхицины, vinblastines и таксолы (против тубулина). Высокая степень сохранения наблюдается по эукариотических видов для этих белков, казалось бы, сделать их далеко от идеальных целей для селективного inhibi Тион эукариотических микроорганизмов. Тем не мение, Commer-бенно успешные синтетические ингибиторы полимеризации тубулина, были разработаны для ликвидации грибковых культур патогенных микроорганизмов (беномил) и паразитических гельминтов (бензимидазолы), а также селективной борьбы с сорняками в сельскохозяйственных культур (дини-troaniline гербициды). Dintroaniline гербицид трифлуралин также избирательно токсичен для простейших, в том числе apicomplexan паразитов (Stokkermans и др, 1996;. Белл и др, 1988;. Armson и др, 1999;.. Dow и др, 2002) и кинетопластиды паразитов (Трауб Cseko и др и др., 2001). В культуре клеток, в APICOM-plexan паразиты Toxoplasma, Plasmodium, и Cryptosporidium значительно более чувствительны к этим агентам (низкий в том числе apicomplexan паразитов (Stokkermans и др, 1996;. Белл и др, 1988;. Armson и др, 1999;.. Dow и др 2002) (. Трауб Cseko и др, 2001) и кинетопластиды паразиты. В культуре клеток, в APICOM-plexan паразиты Toxoplasma, Plasmodium, и Cryptosporidium значительно более чувствительны к этим агентам (низкий в том числе apicomplexan паразитов (Stokkermans и др, 1996;. Белл и др, 1988;. Armson и др, 1999;.. Dow и др 2002) (. Трауб Cseko и др, 2001) и кинетопластиды паразиты. В культуре клеток, в APICOM-plexan паразиты Toxoplasma, Plasmodium, и Cryptosporidium значительно более чувствительны к этим агентам (низкийìМ до суб-ìДиапазон М), чем являются кинетопластиды Trypanosoma и Leishmania пара-сайтов. К сожалению, их нерастворимость, желательное свойство для гербицида, препятствует их использованию

системно в качестве лекарственного средства в животных (Бенбоу и др., 1998; Armson и др, 1999;.. Dow и др, 2002). Тем не менее, этот структурный класс соединений служит полезным реагентом - и токсоплазмы в качестве удобной модели - для исследования тубулина в качестве терапевтической мишени.

Toxoplasma тахизоиты очень чувствительны к динитроанилиновым гербицидам ethafluralin, оризалины (IC₅₀ 100 нМ) и трифлуралин (ИС₅₀300 нМ) (Stokkermans и др., 1996). Крайняя плоть человек фиброзно-бласты (HFFS), используемый для выращивания паразитов нечувствительны к этим соединениям, даже на уровнях, превышающих 100 раз выше, чем те, ингибированию роста паразитов. Электронно-микроскоп УЛЬТРАСТРУКТУРНАЯ-Турал исследование показало, что все соединения нарушают митотического веретена-полюсный прогнозный Тион (Stokkermans и др., 1996). В то же время, соединения оказывают незначительное воздействие на клеточном метаболизме, как измерено с помощью меченного урацил включения. Оризалин и ethafluralin имеют несколько различных эффектов на другие аспекты тубулина цитоскелета. Оризалины обработка приводит к потере subpellicular микротрубочек, тогда как ethafluralin имеет больший эффект на endoplas-микрофонных ретикулум и ядерной оболочке. В этом исследовании (Stokkermans и др., 1996),

Последующее, более всеобъемлющее, Investiga-ние механизма оризалин сопротивлений среди большой коллекции мутантов выполнило это ранее прогноз. В общей сложности 21 различных замен аминокислотных на 16 позиций вα-tubulin были идентифицированы, которые отображаются на два различные структурные домены, основанные на модели крупного рогатого скота (Bos Taurus)α-tubulin кристаллическая структура (Morrissette и др., 2004). При введении в паразит, либо в качестве трансген или аллельного замещают-ку, мутации были достаточны, чтобы придать оризалина сопротивления. Некоторые из мутаций карты в регионы (М или N циклов), которые, как полагают, опосредуют адгезию боковых протофиламентов и, возможно, счетчик dintroaniline действия путем hyperstabilizing микротрубочек. Большинство из них были признаны в ядре

α-tubulin, где у них есть потенциал, чтобы повлиять на конформация участка связывания dintroaniline. Стыковка моделирование на основе подобия модели последовательности Т. гондий были использовано для определения местоположения с высокой аффинностью оризалин сайта связывания. Результаты анализа свидетельствуют о том, что оризалин не взаимодействует с эквивалентными остатками в последовательности крупного рогатого скота. Два Т. гондийα-tubulin замены в остатках сайта связывания, Thr239Ileu и Ser165Ala, предсказаны, чтобы блокировать связывание оризалин напрямую. Thr239Ileu аллель также ассоциируются с резистом-ANCE к динитроанилинам в goosegrass сорняков (Энтони и др., 1998). Как остатки, которые предсказаны, чтобы вступить в контакт с оризалиной в белке Т. гондии не ограничиваются заводом и простейшимиα-tubulin, другие аминокислоты (в том числе ряда основных аллелей лекарственной устойчивости домена, участвующих в данном исследовании) должны косвенно стабилизировать трехмерную конформацию этой привязки-ки сайта. К сожалению, последствия этих результатов - особенно в контексте ограниченного разрешения Т. гондийα-tubulin сходства модель - не жалуют структуры на основе подходов для выявления альтернативных фармакофоров.