Система MN
Система MN пополнилась еще одним часто встречающимся антигеном -ENDA (MNS44). 
АнтителаIgM, открывающие его, были найдены в сыворотке крови англичанки, имевшей фенотип M+s+Mur+DANE+M(g-). С помощью молекулярно-генетических методов исследования у женщины выявлен новый гибридный гликофориновый аллель GYP(A-B-A), кодирующий антиген DANE. Вторая хромосома несла аллель Мк. Авторы пришли к заключению, что аминокислотная замена Не 46 на гликофорине А на Asn 45 на гликофорине GP.Dane не является обязательным условием для экспрессии антигена DANE (Velliquette и соавт. [72]).
Системы Р и GLOB
Описано 20 индивидов с редким фенотипом р, у всех найдена нонсенс-мутация 2911 > Т в гене галактозилтрансферазы -A4GALT. Тем самым установлен еще один вариант генетических нарушений, приводящих к появлению редкого фенотипа р (Hellberg и соавт. [27]).
Система Rh
Новые публикации, касающиеся системы Rh, посвящены двум аспектам. Все больше сведений о новых вариантах гена RHD, обусловливающих фенотипи-ческую мозаику этой системы. К настоящему времени общее число вариантов приближается к 170. Носители парциального или слабовыраженного антигена D подвержены анти-О-аллоиммунизации. В серии других сообщений приводятся случаи необычной сенсибилизации реципиентов к часто встречающимся антигенам Rh.
Marechal и соавт. [46] исследовали нуклеотидные последовательности гена BHD, пирующего вещество D, у 333 французских доноров и выявили 12 новых вариантов аллеля Д при которых определение резус-принадлежности серологическими методами было затруднено. Носители мутации Leu 214 Phe оказались способными продуцировать анти-Б-антитела после переливания им D-положительных эритроцитов. Авторы полагают, что молекулярно-генетические исследования крови лиц с необычными вариантами антигена D позволят уменьшить риск развития аллоиммунизации при проведении гемо-трансфузионной терапии (Marechal и соавт. [46]).
Esteban и соавт. [22] установили, что среди испанцев наиболее частой из парциальных антигенов D является категория DVI. При детальном изучении 20 образов эритроцитов категории DV1 обнаружен ранее неописанный гибридный ген RHD-Ce(3-5)-D. Происхождение экзона 2 в этом гене установить не удалось. Гибрид был представлен гаплотипом CDe, продуцирующим редко встречающийся антиген BARC (Rh52).
Flegel и соавт. [25] также нашли новые варианты гена RHD. Антиген, кодируемый аллелем DCS-1, содержал две аминокислотные замены: Т 667 G и G 676 С, вызванные мутациями в экзоне 5. Проведено сравнение DCS-1 с вариантами DFV и DCS-2 с соответствующими одиночными аминокислотными заменами: F 223 V и А 226 Р. Все указанные варианты сочетались с гаплотипом cDE. Плотность антигенных эпитопов D составила приблизительно 3000 на один эритроцит для категории DCS-1, 800 - для категории DCS-2 и 9300 - для DFV. На эритроцитах DCS-1 и DCS-2 отсутствовали некоторые эпитопы D, выявляемые моноклональными анти-Б-антителами. Эритроциты DFV экспресси-ровали почти нормальный антиген D, в этом образце крови выявлены аллоим-мунные антитела anti-LWa системы LW.
Описана 28-летняя женщина из Ливана, группа крови которой при рутинном исследовании определена как A(II)D-. Она имела анти-Б-антитела, в анамнезе - две неразвившиеся беременности из-за внутриутробной гибели плодов. Отец женщины и два ее брата были D-. Солгасно результатам молекулярно-генетического исследования, пациентка и ее упомянутые родственники оказались D+, поскольку содержали значительные фрагменты гена RHD. При последующием анализе с использованием РНК-ПЦР выявлено 5 транскриптов гена RHD, при этом самым длинным оказался транскрипт, в котором отсутствовали нуклеотидные последовательности экзона 8, замещенные нуклеотидными цепями из интрона 7. Секвенирование ДНК позволило выявить делецию большого участка величиной 995 пар нуклеоти-дов, которая затронула часть интрона 7, весь экзон 8, а также интрон 8 гена RHD. Данный аллель RHD (delEx8) кодировал слабый антиген D, выявляемый только адсорбцией - элюцией. Таким образом, пациентка, ее отец и бра-Цр имели фенотип/
Аллель с делецией большого участка гена RHD нашли Richard и соавт. [62]. Lomas-Francis и соавт. [45] описали два случая полиаллоиммунизации у реципиентов негроидов. Негритянка, больная Р-талассемией, имела фенотип D+, в сыворотке ее крови ранее были выявлены антитела анти-пгв, анти-Е, анти-М, а также тепловые поливалентные аутоантитела. Во время операции ей были перелиты по жизненным показаниям 4 дозы эритроцитов, 2 из которых были серологически несовместимы. Одновременно были предприняты усилия по поиску доноров D+hrB- и -D-. Когда позднее они были найдены, в пробах с сывороткой крови больной клетки указанных редких фенотипов давали положительные реакции. Дальнейшее детальное изучение специфичности антител показало, что у больной в дополнение к ранее имевшимся образовались анти-D-антитела. Другой реципиент, мужчина, больной серповидно-клеточной анемией, был D+ и имел антитела анти-hr8, анти-С, анти-Е и анти-К. После трансфузий серологически совместимых эритроцитов в дополнение к перечисленным антителам образовались анти-Б-антитела.
Эритроциты обоих лиц содержали парциальный антиген D категории Dili а, встречающийся среди негроидов с частотой около 4 %. Эритроциты этой категории дают отчетливо выраженные положительные реакции с реагентами анти-D, поэтому таким пациентам переливают Rh-положительные эритроциты, которые им противопоказаны. У негроидов нередко образуются антитела анти-пгв. После их идентификации гемотрансфузионную терапию обычно продолжают с использованием эритроцитов ccDEE, так как эритроциты этой группы являются одновременно е- и пгв-отрицательными. Это приводит к образованию у некоторых больных антител к другому часто встречающемуся антигену - HrB (Rh34) в сочетании с анти-Е-антителами или без последних. Реципиентам, имеющим такие антитела, можно переливать эритроциты только от доноров Rhnull и с некоторыми делениями, поскольку только они не содержат антиген HrB (Rh34). Авторы публикации указывают на высокую частоту парциальных антигенов D среди негроидов, в связи с чем у некоторых D-положительных реципиентов могут образоваться антитела анти-D.
Win и соавт. [80] наблюдали 2 женщин с генотипом DIIIce/Cces (одна латиноамериканского происхождения, другая - негритянка), у которых после нескольких родов появились антитела анти-пгв(Rhl9) и анти-Нгв (Rh34). У одной из женщин выработались также анти-О-антитела в сочетании с анти-Се. Эритроциты новорожденных давали положительную прямую реакцию Кумбса, однако клинических проявлений гемолитического заболевания у них не отмечалось. Указанные антитела относятся к клинически значимым, поэтому для женщин были зарезервированы эритроциты чрезвычайно редких доноров - ccddEE и Rhafc, однако трансфузии женщинам не понадобились.
Опубликованы данные о распределении вариантов гена RHD у жителей Африки. Так, в Конго (Браззавиль) среди ПО лиц, представителей народности теке, эритроциты которых давали отрицательные реакции с анти-О-антителами, 7 были отнесены к слабому DIV-типу по результатам ПЦР. Среди остальных 103 выявлены лица с делецией RHD, наличием Д#£>-псевдогена и гибридного аллеля RHD-CE-D. Среди лиц D+ идентифицированы аберратные RHD, DAU, DIVa, слабый DIV3-Tnn. Идентифицирован новый, характерный для негроидов, вариант RHD, получивший обозначение DAU-7. Среди D- преобладали лица с делецией RHD (Touinssi и соавт. [69]).
Среди жителей Западной Индии парциальные антигены D встречаются с частотой 0,15 %. Из известных категорий в указанной популяции наиболее часто представлен антиген DFR (Kulkarni и соавт. [37]).
Ye и соавт. [84] провели молекулярно-генетический анализ аллеля RHD у китайцев D- (лица Dd из выборки исключены). Выявлено 8 вариантов. Один из них проявлялся точковой мутацией, другой представлял собой гибрид RHD/CE. Чаще присутствовал гибридный аллель RHD(l)-CE(2-9)-D(10) и ранее описанный RHD(711 delC).
Другая группа китайских исследователей (Yan и соавт. [82]) провели обширные популяционные исследования. Среди 305 672 обследованных 99,94 % были D+, остальные 0,06 % - D~, 37 человек имели варианты антигена D, среди которых преобладал слабый D, встречались также парциальные антигены D^3 и Dv. Выявлено 3 новых аллеля, обусловленных единичными нуклеотидными заменами. Авторы отметили, что у китайцев по сравнению с европейцами и неграми имеются существенные отличия в отношении как частоты антигена D, так и его химической структуры.
Polin и соавт. [59] исследовали с помощью ПЦР кровь 23 300 лиц, которые по результатам первичного обследования были тестированы как резус-отрицательные. У 94 обнаружены RHD-специфические маркеры экзонов 4, 7 и 10, свидетельствующие о том, что эти лица в действительности являются резус-положительными. Слабые антигены D (п=55) и фенотип Del (n = 19) идентифицированы в 74 образцах. Такие лица как реципиенты входят в группу повышенного риска аллоиммунизации антигеном D, а как доноры представляют опасность, если их кровь будет перелита резус-отрицательным реципиентам. Авторы предлагают ввести ПЦР-генотипирование в рутинную практику для всех доноров, эритроциты которых в серологических реакциях оказываются D-отрицательными.
Немецкие исследователи (Duscher и соавт. [21]) нашли, что полиморфизм гена RHCE столь же выражен, как и полиморфизм гена RHD. При ДНК-вдютипировании 122 доноров с измененной экспрессией антигенов С, с, Е и е Шявлено 34 аллеля гена RHCE. Постоянно определялись три аминокислотные «щены: Met 167 Lys, Gly 96 Ser и Leu 12 Arg.
Другая группа немецких авторов (Bugert и соавт. [10]) также провели исследования в этом направлении. Генотипирование и секвенирование 10 эк-зонов гена RHCE у 43 лиц с ослабленной экспрессией антигенов С, с, Е и е позволили выявить 22 аллеля, 10 из которых ранее не были известны. Преобладали одиночные аминокислотные замены, выявлены также гибридные аллели RHCE-D-CE с участием различных сегментов экзона 5 гена RHCE. Установлено, что указанные варианты встречаются в Северной Германии с частотой 0,012 - 0,2 %.
На молекулярном уровне исследована регуляция функции генов RH (Denomme и соавт. [20]). Так, в проксимальных участках генов RHD и RHCE идентифицированы промоторные 5'-фланкирующие регионы величиной 1246 пар нуклеотидов. Последние регулируют экспрессию пептидов RhD и RhCE в i/ис-положении. В указанном регионе промоторную функцию выполняют участок величиной 105 пар нуклеотидов и мотив (55 пар), участвующий в транскрипции.
Отмечен полиморфизм локуса RHCE у жителей Карибского бассейна (Noizat-Pirenne и соавт. [50]). Обнаружены парциальные антигены hr' (с), а также редкий аллель RHCE*ceAR, свойственный негроидам, который кодирует парциальный антиген hr" (e). На эритроцитах лиц, гомозиготных по этому редкому аллелю, отсутствует часто встречающийся антиген Hrs (Rhl8).
Peyrard и соавт. [54] описали 21-летнюю женщину, больную талассемией, с фенотипом B(III)CcDeekk. В сыворотке ее крови выявлены антитела анти-с, анти-се, анти-Fy11, анти-Jk3 и анти-S. Антитела анти-с + се, выделенные путем адсорбции - элюции, реагировали с эритроцитами лиц ceAR/ceEK,ceEK/ceEK и ceAR/ceBI. С эритроцитами лиц ceAR/ceAR, сеМО/сеМО и сеs(340)/ ces(340) эти антитела не реагировали. Известно, что эритроциты лиц, имеющих какой-либо из 6 перечисленных генотипов, содержат парциальные антигены hr' (с). Таким образом, установлено, что редкий аллель RHCE*ceAR наряду с парциальным антигеном hr" (e) кодирует парциальный антиген hr' (с). Авторы высказали предположение, что на эритроцитах лиц, имеющих генотипы ceAR/Ce, ceAR/ceAR, сеМО/сеМО и ces(340)/ces(340), отсутствует эпитоп, свойственный нормальному антигену hr' (с) и некоторым парциальным антигенам hr' (с).
Описан 40-летний негроид с серповидно-клеточной анемией, которому многократно производили гемотрансфузии (Pham и соавт. [55, 56]). Больной имел фенотип DCcee, при этом антигены С, с, е и се на его эритроцитах были нормально выражены и выявлялись как с использованием поликлональных, так и моноклональных антител. На основании серологических и генетических исследований установлен генотип больного - (C)ces/DCe. Сыворотка фт крови содержала антитела к антигенам D, с, Е, е, V, Jsa и S. Фракция I специфичностью анти-с была выделена адсорбцией - элюцией. Антитела реагировали интенсивнее с эритроцитами с+се+, чем с+се-. Отрицательные реакции были получены с эритроцитами лиц, гомозиготных по гену (C)ces. Таким образом, было показано, что упомянутый аллель (С)се\ свойственный негроидам, кодирует парциальный антиген hr' (с) и другие слабовыра-женные антигены системы резус у негроидов. Авторами выявлены два варианта аллеля (C)ces, кодирующих слабые варианты антигена hr" (e) и других антигенов.
Среди негроидов часто встречался парциальный антиген rh' (С) (Tournamille и соавт. [70]), кодируемый аллелями (C)ces и RN. Среди 177 случайно отобранных лиц у 49 выявлены необычные варианты антигена С. Среди больных серповидно-клеточной анемией, имеющих парциальный антиген С, 50 % содержали анти-С-антитела, появившиеся после повторных гемотранс-фузий. Авторы указывают на необходимость идентификации парциального антигена С у больных серповидно-клеточной анемией и переливания им С-отрицательных эритроцитов во избежание развития аллоиммунизации к этому антигену.
Получены убедительные доказательства качественных различий антигенов Нгви hrB (Pham и соавт. [57]). В частности, у Нгв-отрицательных лиц выявлены антитела анти-hr8, а у пгв-отрицательных - анти-Нгв. Среди сенсибилизированных были как гомозиготы, так и гетерозиготы по редкому алле- лю (C)ces.
Hue-Roye и соавт. [29] уточнили молекулярную основу антигена Веа (Berrens, Rh36). В середине 1950-х годов этот антиген был включен в систему Rh из-за его связи с ослабленной экспрессией антигенов с, е и f. Молекулярно-генетическое обследование 4 Веа-положительных членов одной семьи со сла-бовыраженным антигеном hr' (с) выявило мутацию F 668 G в экзоне 5 гена RHCE*ce. Последняя приводила к замене пролина на аргинин в положении 221 протеина Rhce. Авторы высказали предположение, что такая замена оказывает влияние на пространственную структуру и электрически заряд данного участка протеина Rhce, что ослабляет экспрессию антигенов с, е и f (се) у лиц Ве(а+).
Убедительно показана принадлежность антигена Crawford к системе Rh (Flegel и соавт. [24]). Этот антиген обусловлен аллелем ceCF, кодирующим полипептид RHce с аминокислотными заменами Тгр 17 Cys, Gin 233 Glu и Leu 245 Val. Авторы считают его одним из вариантов гена се\ свойственного негроидам. Фенотип ceCF встречается у них с частотой 0,056 %.
Вариант гена се, кодирующий выработку некоторого количества D-эпитопов, найден Chen и соавт. [11] в Швейцарии у 11 доноров и 1 больного с фенотипом cde. Эритроциты этих лиц, обработанные бромелином, давали положительные ©еаздии с некоторыми моноклональными анти-Б-антителами. Фенотип, полу-чдаший обозначение ceSL (по аллелю ceSL), встречался с частотой 1: 675 среди окрестностей г. Берна. У жителей других районов Швейцарии, а также в Южной Германии он не выявлен.
Описан вариант аллеля се, получивший обозначение ceRA (Noizat-Pirenne и соавт. [50, 52]). Этот генный комплекс кодирует слабый антиген hr" (e), при этом отсутствует ассоциированный с ним антиген hrs (Rhl9). При молекулярно-генетических исследованиях выявлены мутации G 50 и G 540 в экзонах 1 и 4 гена RHCE. Последние приводят к аминокислотным заменам Тгр 16 Cys и Gly 180 Arg во внутримембранном домене RHCE-полипептида с выраженными изменениями экспрессии антигенов, которые на нем расположены. Антиген hr" (e) не выявлялся на эритроцитах пробанда многими образцами анти-е-антител даже при проточной цитофлюориметрии. Авторы полагают, что именно аминокислотная замена Gly 180 Arg обусловливает повышенный риск аллоиммунизации антигеном hr" (e). Они рекомендуют учитывать это при подборе эритроцитов реципиентам, особенно негроидам с серповидно-клеточной анемией.
Группой исследователей из Аргентины (Cotorruelo и соавт. [14]) проведены молекулярно-генетические исследования у 148 лиц, унаследовавших га-плотип Dee. С помощью ПЦР исследованы экзоны 1 и 5, а также интрон 2 гена RHCE. Установлено присутствие нуклеотидов С 48 в экзоне 1 и G 733 в экзоне 5 RHCE. Авторы считают важным присутствие определенных нуклеотидов в положении 48 в экзоне 1. Ими идентифицированы варианты аллеля RHce в виде гаплотипов Dee (С 48), Dces (G 48), Dee (G 48) и Dces (С 48). Присутствие G в позиции 733 экзона 5 коррелировало с появлением антигена VS (Rh20), свойственного негроидам. Авторы объясняют присутствие аллелей Dces (G48) и Dces (С 48) среди жителей Аргентины метисацией с негроидами.
Продолжены молекулярно-генетические исследования редкого антигена JAL (Rh48), открытого более 30 лет назад. Последний найден как среди европеоидов, так и среди негроидов. Позднее JAL-положительные индивиды обнаружены среди жителей Карибского бассейна. Hustinx и соавт. [31], Westhoff и соавт. [78] провели молекулярно-генетические исследования крови 17 JAL-положительных лиц. Оказалось, что у европеоидов антиген JAL является продуктом гена Се, тогда как у представителей других рас - продуктом локуса се. У всех обследованных в экзоне 3 имелась мутация 374>Т, ведущая к аминокислотной замене Arg 114 Тгр в RhCE-полипептиде. У африканцев в гене се обнаружена точковая мутация 735>G, обусловливающая аминокислотную замену Leu 245 Val. Этот аллель оказался сцепленным с нормальным геном RHD и парциальным вариантом RHD*DAU. Авторы высказали предположение, что в результате аминокислотной замены Arg 114 Тгр участок полипептидной цепи протеина RHCE утрачивает пространствен-ipo жесткость в области аминокислот, определяющих С- и с-специфичность.
Изменения затрагивают аминокислоты в позиции 226, определяющей Е- и е-специфичность. В результате изменяется экспрессия антигенов С, с, е, а также V и VS (Westhoff и соавт. [78]).
Из 17 упомянутых лиц JAL+ 3 оказались аллоиммунизированными в результате гемотрансфузий. В сыворотке их крови определялись антитела, напоминающие анти-с + анти-е. Детальное изучение антител позволило установить их специфичность. Они были направлены к новому часто встречающемуся антигену, антитетичному JAL (Daniels и соавт. [19], Lomas-Francis и соавт. [43, 44]). Антиген получил обозначение CEST и был включен в систему Rh как RH57. Таким образом, система Rh пополнилась еще одним антигеном.
Coghlan и соавт. [13] установили молекулярную основу редкого антигена LOCR (Rh55). У 5 неродственных лиц LOCR+ выявлена замена нуклеотидов G 286 А в гене RHCE. Интересен тот факт, что возникновение антигена Rh26 также связано с аминокислотной заменой в этой позиции. Возникло предположение, что антигены LOCR и Rh26 могут быть антитетичны. Однако в серологических реакциях лишь некоторые, но далеко не все эритроциты Rh26-имели фенотип LOCR+.