Клопова В.А., Булатова Э. М. (студентка 5 курса лечебного факультета), Шевченко И.С.
Научный руководитель: к.м.н., доцент, заведующая кафедрой патологической анатомии И.В. Самсонова
УО «Витебский государственный медицинский университет»,
г. Витебск
Актуальность. Хронический панкреатит – это заболевание, характеризующееся тяжелым течением и частым развитием осложнений, которые в значительной степени могут влиять на качество жизни пациента и требуют сложных хирургических вмешательств. В течение последних десятилетий отмечают рост показателей заболеваемости и распространенности хронического панкреатита (ХП). В европейских странах в среднем заболеваемость ХП составляет 8,2 на 100000 населения, а распространенность - 27,4 на 100000 [1,4]. В Республике Беларусь распространенность хронического панкреатита варьирует от 25 до 35 случаев на 100000 населения [5].
Одной из причин актуальности проблемы хронического панкреатита является риск развития на его фоне рака ПЖ, а также опухолей пищеварительного тракта внепанкреатической локализации. Многоцентровое эпидемиологическое исследование в 7 клиниках 6 стран (Дании, Германии, Италии, Швеции, Швейцарии и США), включающее 2015 больных показало, что рак поджелудочной железы на фоне ХП через 10 лет развивается у 1,8%, а через 20 лет – у 4% пациентов. Встречаемость экстрапанкреатических опухолей на фоне ХП составляет от 3,9 до 12,5% [2,3].
Рак поджелудочной железы (РПЖ) - относительно редкое заболевание, составляющее всего 3% среди всех злокачественных опухолей человека, однако стоящее на 5 месте его смертности от рака. Только 3% пациентов с РПЖ выживает в течение 5 лет - это самая низкая выживаемость среди больных всеми видами рака. Медиана жизни не оперированных больных РПЖ составляет около 4 месяцев [2,3].
Диагностика РПЖ, позволяющая провести его лечение более эффективно на ранних стадиях заболевания, представляет собой сложную проблему. Выявлению РПЖ с помощью современных методов рентгеноскопии и магнитно-резонансной томографии в значительной степени препятствует наличие воспалительных и фибротических процессов как внутри, так и вокруг опухоли, причем это относится и к локализованному опухолевому процессу [2,3].
С опухолями поджелудочной железы, желудка, печени, толстой и прямой кишки ассоциирован гликопротеин муцинового типа. Он представляет собой гликопротеиновый антиген, определенный как модифицированный гаптен Lewis(a) системы групп крови человека по Lewis (SLA - SialosylLewisAntigen). СА 19-9 не является ни карциномо-, ни органоспецифичным, и поэтому его определение не может быть показано для проведения скрининга, но оно является важным при дифференциальной диагностике карциномы поджелудочной железы, что особенно важно при выраженных индуративных изменениях ткани при хроническом панкреатите.
Цель. Определитьэкспрессию CA19-9 в поджелудочной железе при хроническом панкреатите.
Материалы и методы исследования. Изучен 61 образец ткани поджелудочной железы пациентов с хроническим панкреатитом, которым была выполнена дуоденумсохраняющая резекция в ОНПЦ «Хирургия заболеваний печени и поджелудочной железы» на базе Витебской областной клинической больницы. Контрольную группу составили 9 образцов поджелудочной железы, полученные в морге Управления по Витебской области Государственной службы медицинских судебных экспертиз от умерших в результате несчастных случаев и не имеющих патологии поджелудочной железы.
После фиксации в 10% растворе нейтрального формалина и стандартной гистологической проводки серийные срезы окрашивали гематоксилином и эозином и иммуногистохимически с использованием CA19-9 BondRTUPrimary (Leica, UK).
С помощью световой микроскопии при увеличении х100, х200, х400 оценивали структурные изменения в ткани поджелудочной железы и экспрессию CA19-9. При проведении исследования использовали компьютерную систему анализа изображений (микроскоп LeicaDM 2000 с цифровой камерой и лицензионной программой LeicaAplicationSuite, Version 3.6.0).
Дальнейшую обработку цифровых изображений проводили в программе ImageJ 1.45s, в рамках которой проводилась количественная оценка интенсивности иммуногистохимического окрашивания препаратов. Статистическая обработка материала выполнялась с использованием лицензионной программы «Statistica 10.0» (StatSoft, Inc. 2001). Для выявления достоверности различий в группах использовался критерий T-test. Критическое значение уровня значимости при проверке статистических гипотез принимали равным 5% (р<0,05).
Результаты исследования. При микроскопическом исследовании в поджелудочной железе всех оперированных по поводу хронического панкреатита пациентов определялись дистрофические изменения ациноцитов и клеток островков Лангерганса, разной степени выраженности перилобулярный и интралобулярный фиброз, очаговая, разной степени выраженности, преимущественно лимфоцитарная, инфильтрация.
Иммуногистохимическое исследование CA19-9 показало его присутствие в ткани поджелудочной железы как при хроническом панкреатите, так и в образцах без патологии. Данный маркер определялся в виде мелкогранулярного или гомогенного цитоплазматического и мембранного окрашивания протокового эпителия в образцах исследуемой и контрольной групп.
При этом в неизмененной ПЖ экспрессия маркера преимущественно определялась в апикальной части клеток эпителия внутридольковых протоков крупных протоков и в ацинарных клеткок (рис.1).
а б
Рисунок 1. Экспрессия CA 19-9 в образцах поджелудочной железы при хроническом панкреатите (а) и в образцах без патологии (б). Окраска BondReady-To-UsePrimaryAntibodyCА 19-9. Увеличение ×400.
В образцах поджелудочной железы при хроническом панкреатите отмечалось снижение экспрессии исследуемого маркера с меньшей выраженностью в апикальной части и появлением цитоплазматического окрашивания.
Проведенная морфометрическая оценка показала достоверное уменьшение выраженности экспрессииCA19-9 в образцах поджелудочной железы при хроническом панкреатите, что связано, надо полагать, с активной перестройкой ацинарной ткани и развитием выраженного фиброза.
Выводы:
1. Хронический панкреатит с выраженными индуративными изменениями ткани поджелудочной железы сопровождался снижением по сравнению с нормой уровня экспрессии маркера CA19-9 и изменением характера его распределения с уменьшением содержания в апикальной части и появлением в диффузно в цитоплазме клеток.
2. Уровень CA 19-9 нельзя использовать в качестве абсолютного доказательства отсутствия злокачественного заболевания вследствие низкой клинической чувствительности и специфичности этого опухолевого маркера, но его определение важно в сочетании с данными других клинических исследований и методов при диагностике и прогнозировании заболевания.
Литература:
1. Beger, H. G. Diseases of the pancreas, current surgical therapy / H. G. Beger, S. Matsuno, J. L. Cameron. – Springer, 2008. – 919 p.
2. Chronic Pancreatitis: Relationship to Acute Pancreatitis and Pancreatic Cancer / G. Talamini [et al.] // Journal of the Pancreas. – 2000. - Vol.1. – Р. 69-76
3. Otsuki, M. Chronic pancreatitis and pancreatic cancer, lifestyle-related diseases / M. Otsuki, M.Tashiro // Int Med. – 2007. – Vol. 46. – P. 109–113.
4. Pedersen, N. T. Chronic pancreatitis / N. T. Pedersen, H. Worning // Scand J Gastroenterol Suppl. – 1996. – Vol. 216. – P. 52–58.
5. Эпидемиология и этиология хронического панкреатита / С.И.Третьяк [и др.] // Здравоохранение. – 2010. — №1.- С.15-19.