Некоторые аспекты биологии паразита делают работу с Т. гондиями относительно безопасными. В immunocompe-тентовые люди, инфекция производит обычно нет или только скромных симптомов. В зависимости от региона мира, 20-70 процентов населения уже заражены и устойчивы к повторному заражению. И, наконец, этап тахизоит, который наиболее широко используется в экспериментальной работе, не сильно заразным аэрозолем или проглатывания. Тем не менее, Т. гондий является человеческим патогеном со способностью вызывать серьезные заболевания, и должен быть обработан с надлежащим уходом (серьезные лаборатории авария произошла в прошлом).
В следующем разделе приведены несколько основных правил, хотя он не представляет всестороння SIVE руководства лаборатории по технике безопасности.
• Лабораторные работники, которые принадлежат к определенной группе риска (активный или потенциал тяжелой иммуно-подавление, беременность), не должны работать с живыми паразитами.
• Процедуры безопасности должны часто пересматриваться со всеми членами лаборатории.
• Паразиты должны быть обработаны в специально отведенных шкафах биологической безопасности. Этикетка, соответственно, все рабочие зоны, колбы, трубку и контейнеров для отходов, которые могут укрывают инфекционный материал.
• Носите лабораторный халат, перчатки и очки. Защитные очки особенно важны для работников, которые не носят очки; eyesplash может POTEN-ственно поставить высокую затравтку паразитов.
• Основной путь заражения тахизоитов непосредственно прививка травмы или через eyesplash. Будьте крайне осторожны во всех ситуациях, связанных с острыми предметами. Обратите внимание, что покровные, микро-сфера применения слайдов, и пластмассовые или стеклянные трубки могут привести к поломке и производить острые края. Если вы что-нибудь сломать, стерилизуют с помощью 70% этанола перед попыткой очистки. Игольчатые палочки являются наиболее
| РЕКОМЕНДАЦИИ |
общий источник лабораторных инфекций. Самый безопасный подход к минимуму таких ситуаций, чтобы избежать их. Рассмотрим, действительно ли важно для эксперимента использование диезами. Если вы действительно должны игольчатые PASS-инфицированные клетки, чтобы освободить паразит, оставить пластиковую оболочку на иглу и отрезать ее кончик, используя крепкие ножницы, несколько миллиметров до кончика иглы фактической. Это может помочь защитить вас от случайных палочек, а также обеспечивает дополнительную безопасность без каких-либо дополнительных затрат или усилий.
• Будьте особенно осторожны, работая со штаммами, которые кодируют устойчивость к лекарствам, обычно используемых для лечения людей, в том числе пириметамина, сульфадиазина, клиндамицина и азитромицина.
• Стерилизовать все материалы, которые были в контакте с живыми паразитами (автоклавных все пластиковые ткани-культуры материала, отбеливать все жидкости Accu-mulating, например, вакуумные бутылки, и часто стерилизуют поверхностей путем распыления и протирки с 70% -ным этанолом).
• Есть план возможной аварии. В то время как цель состоит в том, чтобы предотвратить несчастные случаи, они могут произойти, тем не менее. Установить местные, а также национальные контакты инфекционистов, которые могли бы предоставить рекомендации для диагностики и лечения Единения. (Справочные лаборатории включают в Пало-Альто Research Foundation (HTTP: // WWW. Pamf.org/serology) и лаборатория паразитологии и ФАО / Международный центр ВОЗ по научным исследованиям и Справочник по токсоплазмоз Государственного института сывороток, 2300 Copenhagen S, Дания).
• Обеспечить хорошую связь о безопасности лаборатории, и всегда раскрывать загрязнения, аварию или прививку. Информировать руководитель Вашей лаборатории о любой аварии, даже если это, кажется, незначительный инцидент.
БЛАГОДАРНОСТЬ
Работа в нашей лаборатории в настоящее время финансируется за счет грантов от Национального института здоровья (в БС) и от Wellcome Trust, Швейцарский национальный фонд и Говард Хьюз
Медицинские институты (для DS). Мы благодарим Луи Вайса за предоставление протоколов для распространения пара-сайты на мышах. Мы благодарим всех нынешних и бывших членов нашей лаборатории и многих Investiga-ров в области для протоколов и обсуждения, Маркус Мейснера за разрешение на публикацию Рис 15,1 и Марк-Jan Gubbels за разрешение на публикацию Рисунок 15.3.
РЕКОМЕНДАЦИИ
Al-Anouti, Ф. и Ananvoranich, S. (2002). Сравнительный анализ антисмысловой РНК, двухцепочечной РНК и рибозимов Дельта-опосредованной регуляции генов в токсоплазма. Антисенс Nucl. Acid Drug Dev. 12, 275-281.
Аль-Anouti, Ф., Quach, Т. и Ananvoranich, С. (2003). Двухцепочечный РНК может опосредовать подавление экспрессии урацила фосфорибозилтрансферазы в токсоплазме. Biochem. Biophys. Местожительство Commun. 302, 316-323.
Arrizabalaga, Г. Руис, Ф. Морено, С. и Boothroyd, JC (2004). Ионофора устойчивостью мутант токсоплазма показывает вовлечение в / теплообменник гидрокарбоната натрия в регуляции кальция. J. Cell Biol. 165, 653-662.
Черный, MW и Boothroyd, JC (1998). Разработка стабильного челночного вектора эписомных для токсоплазма. J. Biol. Химреагент 273, 3972-3979.
Черный, М., Seeber Ф., Soldati Д., Ким, К. и Boothroyd, JC (1995). Ограничение фермент-опосредованная intergra-ция повышает частоту трансформации и позволяет котрансфекцию токсоплазма. Mol. Biochem. Parasitol. 74, 55-63.
Черный, MW, Arrizabalaga, Г. и Boothroyd, JC (2000). Ионофор резистентных мутанты токсоплазма выявить клетки-хозяина пермеабилизацию как раннее событие в выходе. Mol. Cell Biol. 20, 9399-9408.
Bohne, У. и Руса, DS (1997). Стадия конкретных Expres-Sion селектируемых маркеров в токсоплазме допускает селективное ингибирование либо тахизоитов или bradyzoites. Mol. Biochem. Parasitol. 88, 115-126.
Bohne, В., Вирзинг, А. и Гросс, У. (1997). Брадизоитная-специфическая экспрессия гена в токсоплазме требует минимальных геномных элементов. Mol. Biochem. Parasitol. 85, 89-98.
Брехта, С., Erdhart, Х., Soete, М. и Сольдати, D. (1999). Геном инженерия токсоплазма с помощью сайт-специфического рекомбиназы Cre. Gene 234, 239-247.
Кэмпбелл, RE, тур, О. Палмер, А. Е. и др. (2002). Мономерного красный флуоресцентный белок. Proc. Natl Acad. Sci. USA 99, 7877-7882.
Кэри, KL, Вествуд, штат Нью-Джерси, Mitchison, TJ и Уорд, GE (2004). Небольшая молекула подход к изучению инвазивных механизмов токсоплазма. Proc. Natl Acad. Sci. США 101, 7433-7438.
Chaturvedi, С., ци, Х., Колман, D. и др. (1999). Конститутивная кальций-независимое высвобождение